Product Specifications:
Item#40001: Recombinant HBV Surface Antigen Ay (E.coli)
Concentration: See vial
Diluent: 10mMNa-PO4, 50mM NaCl, pH 6.8 10% Glycerol
Purity: Approx. 92%
Stabilizer: None
Preservative: None
Storage: -75°C
Physical State: Aqueous Solution
Stability: 24 Months at -75oC.
Applications: Recommended concentrations for use are approximate values. A dose dependent response assay should be performed to determine the optimal concentration for use in specific applications.
ELISA and Western ELISA require 0.1-1.0µg protein depending on the nature and affinity of the secondary detection reagent. Studies with HBV convereted human sera are performed in 1:200 to 1:10,000 antibody dilution range.
Description: Recombinant HBV surface protein Ay expressed in the E.coli Expression system.
Purification: Proprietary. Purity approx. 92% as determined by SDS_PAGE, reduced. MW: 22kD
Specificity: Strongly binds to HBV converted human serum antibodies as determined by ELISA and Western ELISA. Protein is suitable for lateral flow diagnostic assays.
CHO- expressed HIV-1IIIB rgp120 (2.5 μg) and biotinylated cyclic V2-TH023 peptide (1 μg and 5 μg) were incubated with RPMI8866 cells
Glossary
Gene and Gene Products
Structural Proteins: Structural proteins – the products of gag, pol and env genes, which are essential components of the retroviral particle.
Regulatory Proteins: Regulatory proteins – tat and rev proteins of HIV/SIV and tax and rex proteins of HTLVs; essential for viral expression in infected cells.
Accessory Proteins: Accessory proteins – additional (non-regulatory) virion – and non virion-associated proteins produced by HIV/SIV retroviruses: vif, vpr, vpu, vpx, and nef. Although, the accessory proteins are not necessary for viral propagation in tissue culture, they have been conserved in the different isolates; this conservation and experimental observations suggest that their role in vivo is very important.
gag
gag – group-sepecifc antigens or capsid proteins; the precursor is the p55 myristoylated protein, which is processed to p17 (Matrix) p24 (Capsid) and p7 (NucleoCapsid) proteins by the viral protease. Other small proteins are generated from the gag polyprotein.
pol
pol – (p66) generates the viral enzymes protease (p11), reverse transcriptase (p51), endonuclease and integrase (p32) after the processing of a gag-pol precursor polyprotein by the viral protease; gag-pol precursor is produced by ribosome frameshifting.
env
env – viral glycoproteins produced as a precursor (gp160) and processed to the external glycoprotein (gp120) and the transmembrane glycoprotein (gp41). The mature proteins are held together by noncovalent interactions; as a result substantial amount of gp120 is released extracellularly. The external glycoprotein (gp120) contains the binding site for the CD4 receptor.
tat
tat – transactivator of HIV gene expression; one of the two necessary viral regulatory factors (tat and rev) for HIV gene expression. Two forms are known, tat-1 exon (minor form) of 72 amino acids, and tat-2 exon (major form) of 86 amino acids. The electrophoretic mobility of these two forms in SDS gels is anomalous; they are approximately 16 kD and 14 kD in weight. Low levels of both proteins are found in persistently infected cells. tat is localized primarily in the nucleolus/nucleus; it acts by binding to the TAR RNA element and activating transcription from the LTR promoter. Post-transcriptional effects of tat have been postulated.
rev
rev – the second necessary regulatory factor for HIV expression. A 19 kD phosphoprotein localized primarily in the nucleolus/nucleus, rev acts by binding to RRE and promoting the nuclear export, stabilization and utilization of the viral mRNAs containing RRE.
vif
vif – viral infectivity factor, typically 23 kD; required for the efficient transmission of cell-free virus in tissue culture. In the absence of vif, the produced viral particles are defective, while the cell-to-cell transmission of virus is not affected significantly. It has been reported that the cellular localization is in the Golgi (vif is not found in the virion).
nef
nef – approximately 27 kD non-virion protein found in the cytoplasm of infected cells. Potentially myristoylated and associated with the inner plasma membrane. One of the first HIV proteins to be produced in the infected cells, it is the most immunogenic of the accessory proteins and may be used in the future for diagnosis and staging of the disease. NEF is dispensable and probably suffers counter-selection during ex vivo viral propagation in vivo. Recent evidence suggests that SIV nef is required for viral propagation in vivo.
vpr
vpr – virion-associated protein of unknown function found in HIV-1, HIV-2, SIVmac, and SIVmnd; typically 15 kD. May be homologous to vpx. Also called “rap” for rapid.
vpu
vpu – protein that promotes extracellular release of viral particles. Found only in HIV-1. Integral membrane phosphoprotein of 16kd; similar to M2 protein of influenza virus. It may be involved in env maturation. It is not found in the virion.
vpx
vpx – virion protein of 12 kD found only in HIV-2 infection. (vpx may have some homology with vpr).
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解析：1.细胞质基质（也叫胞质溶胶）是指除细胞器外细胞质的其余部分。细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所。
2.细胞新陈代谢的次要场所是：细胞核、线粒体基质、叶绿体基质等基质。
缓慢的代谢在许多重要的方面保护了白血病细胞，使得它们能够更好的生存。研究小组还发现了一种针对这一独特代谢状态的实验性药物，并已开始检测它治疗这一疾病的效力。研究人员将相关结果发表在1月17日的《细胞干细胞》（CellStemCell）杂志上。
研究的通讯作者、罗彻斯特大学医学中心癌症中心教授CraigT.Jordan博士正在与一个药物制造商建立合作关系，在这一领域开展进一步的测试。实验室研究中的化合物已被用于临床试验。
Jordan说：“我们认为针对白血病干细胞代谢是一种独特的方法，有潜力广泛应用于几种形式的白血病。我们的研究工作令人感到兴奋，是因为我们鉴别出了一些现正开发用于临床的药物，我们希望其有巨大的潜力，可很快用于改善白血病患者的护理。”
主要研究员、Jordan实验室博士后EleniLagADInou说，当研究小组发现白血病干细胞的代谢与其他的肿瘤细胞如此不同之时，他们集中研究了这一过程的确切作用机制。
他们发现，白血病干细胞是通过一种称作氧化磷酸化的单一过程，在线粒体中生成了它们需要的所有能量。相比之下，其他的癌细胞和正常干细胞还依赖于第二种燃料来源——糖酵解来生成能量。
获得了这一新信息，随后研究人员探索了与氧化磷酸化相关的信号通路，以寻找致命弱点终止这一过程。他们发现一种称作BCL-2的重要基因表达增高，这对于白血病干细胞能量生成至关重要。
研究小组还了解了制药行业处于不同研发阶段的BCL-2抑制药物；Lagadinou和Jordan发现了两种这样的化合物，并在人类白血病样本中对它们进行了测试。研究结果表明，药物倾向性杀死不活跃的、代谢较慢的白血病干细胞。
众所周知，白血病细胞能够长时间休眠，在接受治疗后，可以突然发动另一轮的攻击。
Lagadinou说：“这种治疗有望靶向传统药物相对无法触及的，休眠白血病干细胞亚群。还有重要的一点需要指出，化合物不会损伤正常细胞，因为正常细胞能力利用另一条信号通路来生成能量。”
不会对健康细胞产生毒性，研究人员希望这些药物能够在缓解期靶向这一疾病，此时肃清残余白血病是极其重要的。
白血病，这种血癌可分为四种常见类型：急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病（CML）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）。AML在成人中最常见，且最难治疗，其部分原因是它影响了未成熟细胞。每年近5万新病例被确诊，约一半人死亡。
研究人员发现在过去的十年里，许多治疗并非旨在除去白血病根源——“白血病干细胞”，因此从未真正根除这一疾病。
Jordan说，事实上，即便是最现代的癌症治疗也是假设：所有的癌症代谢都依赖于糖酵解作为燃料来源。新研究发现氧化磷酸化是白血病干细胞的唯一燃料来源，这对提出新的改进治疗具有格外的意义（本文来自生物谷）
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酶的作用是催化剂,促进或抑制反应的进行.加热主要是通过升高温度加快反应速率,无机催化剂和酶的原理相同,都是通过降低反应的活化能加快反应速率
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Seahorse细胞代谢分析
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美国海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF24通过特殊的细胞培养微孔板设计，在测量时临时形成的约5ul微环境中，利用无创的专利光学传感器同步地实时探测溶解氧（OCR）和pH值变化，从而快速了解细胞内两大能量转换途径（线粒体的有氧代谢和糖酵解）的能量代谢状态。在使用XF24的检测过程中，研究人员可以通过预设程序控制在特定时间向待测细胞的培养基中添加多达四种药物，以便研究不同药物对细胞新陈代谢的影响，理解细胞的生物能量变化，快速解析细胞或组织的基础代谢率、ATP转换、膜的完整性、极限呼吸率、线粒体功能，产生氧自由基及超氧化物等有毒物的情况，省时省力，实验数据更科学，更具有说服力。
显性视神经萎缩（dominantopticatrophy）是一种以生命早期明显的进行性、对称性视觉丧失为特征的遗传性视觉疾病，一个叫做OPA1的基因发生突变是导致这一疾病的原因。
在一项全面深入的OPA1研究中，由DulbeccoTelethon研究所研究人员、帕多瓦大学生物化学教授LucaScorrano，以及西班牙国立心血管病研究中心（CNIC）组织稳态和修复项目协作者JoséAntonioEnríquez博士领导的研究小组，发现这一基因在细胞代谢中充当了“帮手”。未来研究人员有可能利用这一特性来治疗线粒体疾病。目前许多的线粒体疾病并没有现成的治疗方法
Enriquez博士解释说：“线粒体存在于我们所有的细胞中调控许多重要的过程，例如由食物源性的分子生成可利用的能量，适当的时候为细胞分裂、分化或甚至细胞死亡做准备。”
“多年来，我们的研究小组针对线粒体的功能以及与其功能失常相关的疾病独立开展了研究工作，想找到一些对策来开发出针对线粒体疾病的特异治疗，了解线粒体功能改变导致更常见疾病的机制。”
5年前两个研究小组加入合作，设法来了解线粒体疾病：显性视神经萎缩。罹患这一视觉疾病的患者具有OPA1基因突变。在过去的数十年里意大利的研究小组确定了OPA1基因编码蛋白的特征。OPA1蛋白调控了线粒体的形状，在显性视神经萎缩患者中这一蛋白缺失会引起一种神经元：视网膜神经节细胞进行性死亡，由于视网膜神经节细胞负责将来自眼睛的图像传送至大脑视觉中心，因此这导致了缓慢而进行性的视力丧失。这一疾病通常在学龄前期就显现症状，一个家庭中的成员疾病严重程度有所差异。西班牙研究小组为线粒体功能研究所开发的一些模型，为研究OPA1功能提供了合适的新型工具。
Enriquez和Scorrano说：“我们证实了，OPA1的任务是调控呼吸作用的效率，影响了呼吸链元件（将营养物质中的能量转换为可利用来进行细胞活动的能量形式的蛋白质复合物）在线粒体内膜中的连接方式。”
线粒体内膜就像一个流体，可响应刺激不断地改变形状；这些称之为嵴（cristae）的折叠形状并非是随意的，而是由OPA1活性所决定。
该研究证实，通过提高这一蛋白的活性有可能提升呼吸链生成能量的效率，促进细胞生长。作者们提出“在未来，我们或许要思考利用这一特性对线粒体病患者进行治疗干预，在不考虑导致线粒体功能异常的遗传缺陷条件下改善代谢的前景。”
Scorrano博士说：“对于诸如此类的罕见和异质性疾病，我们必须寻找能够适应于各种疾病的广泛治疗方法。我们正在致力从事这方面的工作，但现在谈及可能的治疗还为时过早。”
Enríquez说：“我们的研究工作标志着，我们对于细胞结构功能及形状之间关系的理解取得了重大的进展。线粒体嵴结构非常的独特，在不同组织、活动、食物摄取、病理等等之间它的形状显示巨大的差异。然而，长期以来并不清楚线粒体嵴可变形状与生物能量活动之间的关系。这项研究证实，改变嵴结构通过调节呼吸复合体的超组装诱导了线粒体生物能量学能力的直接改变。”
原文：http://www.ebiotrade.com/newsf/read.asp?page=2013922144343994
细胞质中有各种细胞器,细胞内的化学反应大多都是在细胞质中进行,因此是代谢中心.
细胞核中有DNA,是遗传信息库,是细胞代谢和遗传的控制中心.
