Hito Alcian Blue pH-2.5 OptimStain™ Kit is formulated for the staining of acid mucins, sulfated / carboxylated acid mucopolysaccharides and sulfated / carboxylated sialomucins (glycoproteins). This Kit can be used with paraffin-embedded tissue sections (Frozen tissue section can be used, but not recommended). Hito Alcian Blue pH-2.5 OptimStain™ Kit is designed in a ready-to-use format and offers high quality, rapid and reproducible staining. Hito Alcian Blue pH-2.5 OptimStain™ Kit has been tested extensively on the tissues from several species of animals and it is a simple solution for your research.
| Kit Contents | |
| Solution-1 | 100 ml |
| Solution-2 | 100 ml |
| Solution-3 | 100 ml |
| Solution-4 | 100 ml |
| Staining Jars | 4 |
| User Manual and MSDS | 1 |
Before using Hito Alcian Blue pH-2.5 OptimStain™ Kit, please make sure you have the following Required Equipment / Materials in your lab (not included in the kit): Microtome and light microscopeEthanol, Xylene, double distilled or deionized waterSlides and coverslipsStaining jars for slides washResinous mounting medium  Hito Alcian Blue pH 2.5 OptimStain™ Kit Manual and MSDS | |
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ps：大皿和6孔板里细胞密度、培养条件等等都几乎一样。
我看园子里有人提过类似的问题，但还没人给出答案，希望有经验或有想法的战友帮忙分析分析啊~谢谢！
它最初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（1852－1921）于1887年设计，故又称为“佩特里皿”。
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其实就是常见的圆形的上下盖培养皿，你可以看看它的英文，就叫做petri dish，直译过来就叫做——佩特里小碟子——也就是皮氏培养皿
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第二，三段为原创手打……第一段为摘抄
做细胞实验快半年了，一直都还挺顺的，这次五一放完假回来，复苏一支HK2，操作都跟以前一样，没想到出了好多问题：
冻存方法：包裹棉花直接-80℃过夜，第二天转移到液氮
冻存时间：1个半月前冻存的细胞，密度保证没问题，冻存前状态也好
复苏方法：液氮取出后37℃水浴，约2分钟溶解，加入6倍体积的完全培养基，800转离心5分钟，弃去上清，1ml完全培养基重悬，转移入培养皿（进口一次性塑料培养大皿），补足完全培养基，培养箱培养
第二天看细胞全都没贴壁，但是也没死，聚集成团装飘着，没有污染。不想重新离心加重机械损伤，就一直试试看的心态放在培养箱里养着了。又重新复苏一支，还是一样的结果，全飘着没贴壁。不死心，就往前面复苏的那一皿里直接加了1ml的血清，相当于18%的血清比例，过了一天去看，这下细胞都贴壁了。没有另外添加血清的那一皿就还是没贴壁。
另外还有一支以前复苏的HK2，也是一样的方法复苏的，那次复苏很好，细胞基本没什么死的，也都贴壁了，养在皿里状态也不错，但是拿来铺板就还是不贴壁，同样的培基（10%血清），铺板就一个不贴，皿里就都可以贴上。
求助各位战友：
1、复苏不贴壁是为什么？
2、增加血清比例能使复苏的细胞贴壁，这样的细胞是不是可以认为状态并不好，以后的培养是不是要一直这么高比例的血清？还是可以培养一段时间逐步减少血清比例？
3、仍然是10%血清，为什么铺板就不贴壁，而皿里的就没事？是不是铺板的时候也要增加血清比例呢？那在板里干预的过程中是不是要一直保持高比例的血清培养？
4、我的冻存及复苏方法是否有错？我觉得我的HK2从形态、生长速度上来说状态应该是不错的，而且我已经更换了全新的培基、血清和双抗，重新配置了完全培养基，不知道为什么会出现这种不贴壁的问题
拜托各位集思广益，细胞实验已经为了这个不贴壁的问题停滞快2周，心急如焚啊，拜托各位！
同学说传代必须是一皿传多皿，一皿传一皿就不算传代~求高手指点~~
传代后5天，依然没有长满，怕影响活力，想传代和冻存，不知这样是否可以？？
想问下各位大神，本人用皿养的PC-9GR细胞突然有大片飘起，也并没有成团状飘起，求解决方法？
实验需要请问有没有养THP-1细胞的同仁？能否寄一皿我，我在广州南方医科大学，不胜感激！
