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| 선택 | Cat.No. | 제품명 | 가격(VAT별도) | 수량 |
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제품특징
□ 내용 (RR066A,100 회)
| 2×One Step TB Green™ RT-PCR Buffer III *1 | 840㎕×3 |
| TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) | 100㎕ |
| PrimeScript RT enzyme Mix II | 100㎕ |
| RNase Free dH2O | 1.25 ㎖×2 |
| ROX Reference Dye (50×conc)*2 | 100 ㎕ |
| ROX Reference Dye II (50×conc)*2 | 100 ㎕ |
*1 dNTP Mixture, Mg2+ 및 TB Green™ 포함*2 Applied Biosystems 사 Real Time PCR 장치 등, well간의 signal 보정이 필요한 기기로 해석하는 경우에 사용한다. ABI PRISM 7000/7700/7900 HT나 7300 Real-Time PCRSystem에는 Rox Reference Dye를, 7500 Real-Time PCR System에는 ROX ReferenceDye II를 이용한다.Thermal Cycler Dice Real Time System (TaKaRa Code TP800)이나 Smart CyclerSystem, LightCycler 에서는 필요없다.
□ 보존 -20℃
2×One StepTB Green®RT-PCR Buffer 4는 차광후 -20℃에서 보존
□ 제품설명
본 제품은 TB Green™을 포함한 Real Time One Step RT-PCR 전용의 키트이다. RT-PCR을 하나의 튜브 내에서 연속적으로 실시할 수 있기 때문에 조작이간편하고 오염의 걱정이 없다. 또, 증폭 산물을 실시간으로 검출할 수 있어 PCR후에 전기영동 등으로 확인할 필요가 없다. RNA 바이러스 등 미량 RNA의 검출에 최적이다.반응에는 신장성이 뛰어나고 단시간의 반응으로 효율적인 cDNA 합성이 가능한PrimeScript RTase와 PCR 효소로서 정평이 있는 TaKaRa Ex Taq HS를 이용하여, 1 Step RT-PCR 에 최적화되어 있다.종래의 제품보다 반응 특이성, 증폭 효율이 향상되어 있어, 안정된 Real Time 1 Step RT-PCR을 실시할 수 있다.
□ 적용 기종
Thermal Cycler Dice Real Time System (TaKaRa Code TP800)Smart Cycler System/Smart Cycler II System (Cepheid사)ABI PRISM 7000, 7700, 7900 HT 및, 7300, 7500 Real-Time PCR System(Applied Biosystems사)LightCycler (Roche Diagnostics사) 등
□ 사용상의 주의
본 키트에 의한 역전사 반응에는 PCR용의 Specific 프라이머 (Reverse)를 이용해야 합니다. Random 프라이머나 Oligo dT 프라이머는 사용할 수 없습니다.
□ 특징
1 Step RT-PCR에 의해 RNA 바이러스 등 미량의 RNA 해석을 신속하고 정확하게 실시하는 것이 가능하다.PCR에는 Hot Start용 효소 TaKaRa Ex Taq HS를 이용하고 있다. 버퍼는 RealTime PCR용으로 최적화 되어있기 때문에, 증폭 효율이 좋고, 고감도로 검출을할 수 있다. 또한 버퍼는TB Green®을 미리 포함한 2×농도의 pre-mixture이므로 반응액의 조제가 간단하다.
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实验需要请问有没有养THP-1细胞的同仁？能否寄一皿我，我在广州南方医科大学，不胜感激！
激光共聚焦的看活细胞皿哪里买呢
想问下各位大神，本人用皿养的PC-9GR细胞突然有大片飘起，也并没有成团状飘起，求解决方法？
如题~
已经基本养好了贴壁的原代细胞了，准备鉴定了，看到好多都在说细胞爬片的问题，我可以不做爬片直接在皿里操作吗？具体需要注意些什么呢？感谢各位大神
ps：大皿和6孔板里细胞密度、培养条件等等都几乎一样。
我看园子里有人提过类似的问题，但还没人给出答案，希望有经验或有想法的战友帮忙分析分析啊~谢谢！
同学说传代必须是一皿传多皿，一皿传一皿就不算传代~求高手指点~~
传代后5天，依然没有长满，怕影响活力，想传代和冻存，不知这样是否可以？？
做细胞实验快半年了，一直都还挺顺的，这次五一放完假回来，复苏一支HK2，操作都跟以前一样，没想到出了好多问题：
冻存方法：包裹棉花直接-80℃过夜，第二天转移到液氮
冻存时间：1个半月前冻存的细胞，密度保证没问题，冻存前状态也好
复苏方法：液氮取出后37℃水浴，约2分钟溶解，加入6倍体积的完全培养基，800转离心5分钟，弃去上清，1ml完全培养基重悬，转移入培养皿（进口一次性塑料培养大皿），补足完全培养基，培养箱培养
第二天看细胞全都没贴壁，但是也没死，聚集成团装飘着，没有污染。不想重新离心加重机械损伤，就一直试试看的心态放在培养箱里养着了。又重新复苏一支，还是一样的结果，全飘着没贴壁。不死心，就往前面复苏的那一皿里直接加了1ml的血清，相当于18%的血清比例，过了一天去看，这下细胞都贴壁了。没有另外添加血清的那一皿就还是没贴壁。
另外还有一支以前复苏的HK2，也是一样的方法复苏的，那次复苏很好，细胞基本没什么死的，也都贴壁了，养在皿里状态也不错，但是拿来铺板就还是不贴壁，同样的培基（10%血清），铺板就一个不贴，皿里就都可以贴上。
求助各位战友：
1、复苏不贴壁是为什么？
2、增加血清比例能使复苏的细胞贴壁，这样的细胞是不是可以认为状态并不好，以后的培养是不是要一直这么高比例的血清？还是可以培养一段时间逐步减少血清比例？
3、仍然是10%血清，为什么铺板就不贴壁，而皿里的就没事？是不是铺板的时候也要增加血清比例呢？那在板里干预的过程中是不是要一直保持高比例的血清培养？
4、我的冻存及复苏方法是否有错？我觉得我的HK2从形态、生长速度上来说状态应该是不错的，而且我已经更换了全新的培基、血清和双抗，重新配置了完全培养基，不知道为什么会出现这种不贴壁的问题
拜托各位集思广益，细胞实验已经为了这个不贴壁的问题停滞快2周，心急如焚啊，拜托各位！
