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제품특징
□ 내용 (농도 0.5 ㎍/㎕)
pRI 101-AN DNA 10 ㎍ pRI 101-ON DNA 10 ㎍
□ 보존 : -20℃
□ 제품설명
pRI101 DNA 시리즈는 형질전환 식물에서 외래유전자를 고효율로 발현시키기 위한 vector이다. Cauliflower mosaic virus (CaMV)의 35S promoter 아래쪽에 ADH (AlcoholDehydrogenase) 유전자 유래의 5’ untranslated region (5’-UTR)을포함하고 있으며, 해당 영역이 가지는 translationenhancer 기능에 의해 식물체에서 목적유전자산물을 고효율로 발현시킬 수 있다. 애기장대 ADH 유래 5’-UTR (AtADH 5’-UTR)을 탑재한 pRI101-AN DNA와 벼 ADH 유래 5’-UTR (OsADH 5’-UTR)을 탑재한 pRI101-ON DNA의 2종류가 있어서 쌍떡잎 식물에는 pRI101-AN DNA를, 외떡잎 식물에는 pRI101-ON DNA를 이용할 수 있다.또한 본 제품은 식물형질전환용 binary vector인pRI910 DNA (Code 3261)을 기본으로 하는 binary vector이며, Rhizobium rhizogenes Riplasmid 유래의 변이형 복제 기점(Ri ori)을 가지고 있다. pUC 계의 plasmid와 같은 복제 기점 (ColE1 ori)도 가지고 있어 대장균에서 높은 카피수의 plasmid로유지되며, cloning site가 T-DNA내 식물선택마커의 right border (RB)측에 배치되어 있기 때문에 목적 유전자가 결실되지 않고 안정적으로 식물 염색체에삽입이 가능하다.본 벡터는 국립 대학 법인 나라 (奈良) 첨단과학기술대학원대학에서 기술 및 실험자료의 제공을 받고, 다카라바이오가제품화하였습니다.
□ 순도
● Double strand covalently closed circular form (RF I)을 70%이상 포함하고 있다.
● Dideoxy법에 의한 시퀀싱 결과 클로닝 사이트를 유지하고 있다는 것을 확인하고 있다.
● Cloning site에서만 1곳을 절단하는 제한 효소에 의해 해당 절단을 확인하고 있다.
□ 용도
Binary vector법에 의해 Agrobacterium 을 매개로 식물을 형질전환하기 위한 vector.애기장대, 토마토, 담배 등의 쌍떡잎 식물 (pRI101-AN DNA를 사용) 또는 벼 등의 외떡잎 식물 (pRI101-ON DNA를 사용)의 형질전환 및 외래 유전자의 높은 발현을 실현.
pRI 101-AN DNA와 pRI 101-ON DNA
ebiomall.com
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做细胞实验快半年了，一直都还挺顺的，这次五一放完假回来，复苏一支HK2，操作都跟以前一样，没想到出了好多问题：
冻存方法：包裹棉花直接-80℃过夜，第二天转移到液氮
冻存时间：1个半月前冻存的细胞，密度保证没问题，冻存前状态也好
复苏方法：液氮取出后37℃水浴，约2分钟溶解，加入6倍体积的完全培养基，800转离心5分钟，弃去上清，1ml完全培养基重悬，转移入培养皿（进口一次性塑料培养大皿），补足完全培养基，培养箱培养
第二天看细胞全都没贴壁，但是也没死，聚集成团装飘着，没有污染。不想重新离心加重机械损伤，就一直试试看的心态放在培养箱里养着了。又重新复苏一支，还是一样的结果，全飘着没贴壁。不死心，就往前面复苏的那一皿里直接加了1ml的血清，相当于18%的血清比例，过了一天去看，这下细胞都贴壁了。没有另外添加血清的那一皿就还是没贴壁。
另外还有一支以前复苏的HK2，也是一样的方法复苏的，那次复苏很好，细胞基本没什么死的，也都贴壁了，养在皿里状态也不错，但是拿来铺板就还是不贴壁，同样的培基（10%血清），铺板就一个不贴，皿里就都可以贴上。
求助各位战友：
1、复苏不贴壁是为什么？
2、增加血清比例能使复苏的细胞贴壁，这样的细胞是不是可以认为状态并不好，以后的培养是不是要一直这么高比例的血清？还是可以培养一段时间逐步减少血清比例？
3、仍然是10%血清，为什么铺板就不贴壁，而皿里的就没事？是不是铺板的时候也要增加血清比例呢？那在板里干预的过程中是不是要一直保持高比例的血清培养？
4、我的冻存及复苏方法是否有错？我觉得我的HK2从形态、生长速度上来说状态应该是不错的，而且我已经更换了全新的培基、血清和双抗，重新配置了完全培养基，不知道为什么会出现这种不贴壁的问题
拜托各位集思广益，细胞实验已经为了这个不贴壁的问题停滞快2周，心急如焚啊，拜托各位！
ps：大皿和6孔板里细胞密度、培养条件等等都几乎一样。
我看园子里有人提过类似的问题，但还没人给出答案，希望有经验或有想法的战友帮忙分析分析啊~谢谢！
所谓上皿式指的是称量盘在支架上面；而称量盘吊挂在支架下面的为下皿式。
目前使用较为广泛的是上皿式电子天平。
实验需要请问有没有养THP-1细胞的同仁？能否寄一皿我，我在广州南方医科大学，不胜感激！
各位战友，小弟刚开始养细胞，但是细胞状态一直不好，最近一次传代后，一传二，居然两个皿里细胞状态完全不同，第一个皿还能看见细胞的形态，而第二个皿几乎看不见贴壁的细胞，请问大家遇见过这种情况吗？
如题~
已经基本养好了贴壁的原代细胞了，准备鉴定了，看到好多都在说细胞爬片的问题，我可以不做爬片直接在皿里操作吗？具体需要注意些什么呢？感谢各位大神
它最初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里（1852－1921）于1887年设计，故又称为“佩特里皿”。
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其实就是常见的圆形的上下盖培养皿，你可以看看它的英文，就叫做petri dish，直译过来就叫做——佩特里小碟子——也就是皮氏培养皿
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第二，三段为原创手打……第一段为摘抄
