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| 선택 | Cat.No. | 제품명 | 가격(VAT별도) | 수량 |
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제품특징
□ 농도 0.2~2.0 U/㎕
□ 형상
| 25 mM | Tris-HCl(pH7.9) |
| 500 mM | NaCl |
| 1 mM | EDTA |
| 0.1 mM | DTT |
| 50 % | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 기원
Escherichia coli B
□ 제품설명
본 효소는 각종 polynuceotide의 3’말단에 adenyl 잔기를 중합하는 효소이다. 단일가닥 RNA는 프라이머로 사용할 수 있으나 이중가닥 RNA, 합성 polynucleotide, 짧은 oligonucleotide 등은 프라이머가 되기 어렵다. DNA는 프라이머로 기능하지 않는다. 이 효소는 AMP 잔기를 중합하지만 기질로서는 ATP만을 이용하므로, ADP, dATP는 기질이 될 수 없다. 또 UTP, CTP의 기질 이용율은 ATP의 5% 이하이고, GTP는 중합할 수 없다.
□ 활성의 정의
ATP를 기질로 하여 37℃, pH7.9의 조건에서 10분 동안 1 nmol의 AMP를 프라이머에 중합시키는 효소활성을 1 U으로 한다.
□ 활성 측정용 반응액 조성
| 50 mM | Tris-HCl (pH7.9) |
| 10 mM | MgCl2 |
| 2.5 mM | MnCl2 |
| 250 mM | NaCl |
| 1 mM | DTT |
| 0.05% | BSA |
| 400 ㎍/ml | tRNA |
| 0.1 mM | [3H]ATP |
□ 순도
2 U의 본 효소와 1㎍의 16S와 23S rRNA를 37℃, 16시간 반응하여도 RNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
□ 용도
- RNA에의 poly(A) tail의 부가- RNA의 3’말단 표식
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实验需要请问有没有养THP-1细胞的同仁？能否寄一皿我，我在广州南方医科大学，不胜感激！
激光共聚焦的看活细胞皿哪里买呢
想问下各位大神，本人用皿养的PC-9GR细胞突然有大片飘起，也并没有成团状飘起，求解决方法？
如题~
已经基本养好了贴壁的原代细胞了，准备鉴定了，看到好多都在说细胞爬片的问题，我可以不做爬片直接在皿里操作吗？具体需要注意些什么呢？感谢各位大神
ps：大皿和6孔板里细胞密度、培养条件等等都几乎一样。
我看园子里有人提过类似的问题，但还没人给出答案，希望有经验或有想法的战友帮忙分析分析啊~谢谢！
同学说传代必须是一皿传多皿，一皿传一皿就不算传代~求高手指点~~
传代后5天，依然没有长满，怕影响活力，想传代和冻存，不知这样是否可以？？
做细胞实验快半年了，一直都还挺顺的，这次五一放完假回来，复苏一支HK2，操作都跟以前一样，没想到出了好多问题：
冻存方法：包裹棉花直接-80℃过夜，第二天转移到液氮
冻存时间：1个半月前冻存的细胞，密度保证没问题，冻存前状态也好
复苏方法：液氮取出后37℃水浴，约2分钟溶解，加入6倍体积的完全培养基，800转离心5分钟，弃去上清，1ml完全培养基重悬，转移入培养皿（进口一次性塑料培养大皿），补足完全培养基，培养箱培养
第二天看细胞全都没贴壁，但是也没死，聚集成团装飘着，没有污染。不想重新离心加重机械损伤，就一直试试看的心态放在培养箱里养着了。又重新复苏一支，还是一样的结果，全飘着没贴壁。不死心，就往前面复苏的那一皿里直接加了1ml的血清，相当于18%的血清比例，过了一天去看，这下细胞都贴壁了。没有另外添加血清的那一皿就还是没贴壁。
另外还有一支以前复苏的HK2，也是一样的方法复苏的，那次复苏很好，细胞基本没什么死的，也都贴壁了，养在皿里状态也不错，但是拿来铺板就还是不贴壁，同样的培基（10%血清），铺板就一个不贴，皿里就都可以贴上。
求助各位战友：
1、复苏不贴壁是为什么？
2、增加血清比例能使复苏的细胞贴壁，这样的细胞是不是可以认为状态并不好，以后的培养是不是要一直这么高比例的血清？还是可以培养一段时间逐步减少血清比例？
3、仍然是10%血清，为什么铺板就不贴壁，而皿里的就没事？是不是铺板的时候也要增加血清比例呢？那在板里干预的过程中是不是要一直保持高比例的血清培养？
4、我的冻存及复苏方法是否有错？我觉得我的HK2从形态、生长速度上来说状态应该是不错的，而且我已经更换了全新的培基、血清和双抗，重新配置了完全培养基，不知道为什么会出现这种不贴壁的问题
拜托各位集思广益，细胞实验已经为了这个不贴壁的问题停滞快2周，心急如焚啊，拜托各位！
