midnolinisoformProtein1中脑核仁蛋白1(抗原)
克隆鼠单抗的可变区基因,可从基因组文库中分离,也可用PCR技术分离。
人抗体恒定区可根据需要选择,不同的恒定区会带给嵌合抗体不同功能。为避免人抗体的恒定区产生不需要的副作用,可通过点突变来修饰调整其效应。
人一鼠嵌合抗体与鼠单抗相比,免疫原性大大降低,利于在人体内应用,所以目前已制备出上百种抗各种抗原(包括肿瘤相关抗原)的嵌合抗体。
尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多,但有时它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗体的鼠源成分,发展出CDR移植技术。
CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内,所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体,也就是人源化抗体。
全合成法是以人抗体序列为骨架,以鼠抗体的CDR置换人抗体的CDR,将整个可变区序列的两条链分解成若干片段,并使相邻的片段具有彼此互补的粘性末端。合成所有DNA片段,每组片段分别退火,然后逐组连接成完整的可变区基因,插入质粒中,进一步即可用于构建和表达改形抗体。
DR序列合成几种突变引物,用定点突变的方法将人的可变区基因的CDR序列变为鼠抗体的CDR序列,然后表达出改型抗体。
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