Thermo Reverse Transcriptase
- First-strand cDNA synthesis
- Active at 42~55℃. Optimum at 50℃.
- RNaseH negative
- Superior performance in RT-PCR. Up to 12 kb or more
- High processivity and sensitivity
Products
| Cat.No. | Product | Size |
|---|---|---|
| RT10K | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase | 10,000 units |
| RT50K | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase | 50,000 units |
| RT10KN | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase (with dNTP Mix) | 10,000 units |
| RT50KN | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase (with dNTP Mix) | 50,000 units |
- Description
- Data
- Details
- Documents
HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase, a Thermo stable and RNase H negative variant of M-MLV RTase, can synthesize cDNAs from purified RNA templates at a temperature range of 42℃ ~ 55℃ and especially shows the highest activity at 50℃. At the escalated temperature, the cDNA synthesis is enhanced partially due to the less internal structural formation of the template RNA and increased polymerization activity of RTase. The high processivity and productivity of HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase allows this enzyme to amplify the high yield of product and can synthesize cDNA of target gene up to 12 kb from RNA template. This enzyme is quite suitable to synthesize the first-strand cDNA for RT-PCR of target gene. The cDNA synthesis from total RNA or poly-(A)+ RNA is performed by random primer, oligo-d(T) primer, or gene-specific primer.
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四字原则:吸 擦 调 放
吸:用吸耳球吸取液体,四指拿移液管,食指扣于移液管上口。
擦:吸取后用滤纸擦干管壁。
调:放松食指使液体流出,调至刻度线,按紧。
放:沿器壁放入所需容器。
垂直是为了保证最后只剩下半滴时,移液管不计算在内的体积。如果移液管上没有写“吹”字,那么最后半滴可以不要。
移液管
用来准确移取一定体积的溶液的量器。移液管是一种量出式仪器,只用来测量它所放出溶液的体积。它是一根中间有一膨大部分的细长玻璃管。其下端为尖嘴状,上端管颈处刻有一条标线,是所移取的准确体积的标志。
大家做溶出曲线稀释溶液时有某有再用移液枪?移液枪量取1ml的体积准确不?
2、吸液:用右手的拇指和中指捏住移液管的上端,将管的下口插入欲吸取的溶液中,插入
不要太浅或太深,一般为10~20mm处,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,
太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球,接在管的上口把溶液慢慢吸入,先吸入该管 容量的1/3
左右,用右手的食指按住管口,取出,横持,并转动管子使溶液接触到刻度以上 部位,以置换内壁的水分,然后将溶液从管的下口放出并弃去,如此用反复洗3
次后,即可 吸取溶液至刻度以上,立即用右手的食指按住管口。 3、调节液面:将移液管向上提升离开液面,管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上,管身保
持直立,略为放松食指(有时可微微转动吸管)使管内溶液慢慢从下口流出,直至溶液的弯
月面底部与标线相切为止,立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉,移出移液管,插 入承接溶液的器皿中。
4、放出溶液:承接溶液的器皿如是锥形瓶,应使锥形瓶倾斜30°,移液管直立,管下端紧
靠锥形瓶内壁,稍松开食指,让溶液沿瓶壁慢慢流下,流完后管尖端接触瓶内壁约15 秒后,
再将移液管移去,残留在管末端的少量溶液,不可用外力强使其流出,因较准时已考虑了末 端保留的溶液的体积。
我们每天长时间都在实验室里和移液器(俗称“枪”)打交道,枪已经成为实验室标配,因为它是很多实验过程和分析的基础。但正因为如此,我们都认为它很简单,就像走路和呼吸一样自然,不需要你花任何心思,它就可以做你想做的事情。但事实真的是这样吗?
事实上,枪虽小但往往关系到实验结果的准确性,有小伙伴经常抱怨枪老出问题:
1.用了一段时间就不准漏液了?
2.液体容易倒吸?
3.移液排不干净?……
到底是哪里出问题了呢,你有没有碰到这样的迷之困惑?
当当当,福利到,来自梅特勒-托利多瑞宁移液技术专家自告奋勇来解答大伙儿的困惑,有任何关于移液器使用的问题欢迎来和我们探讨共同进步哟~
最后感谢丁香园支持本活动!
我们会每天抽时间统一回复大家的问题,专家答疑截止12月31日哦!
像乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮这类毒性较低,挥发性不是很大的,移液枪取肯定没问题,但是一个移液枪最多也就取10ml,我觉用这么精准的仪器来取溶剂,既麻烦又没必要;
像一些吡啶、哌啶类的毒性较大的,你用移液枪取后很容易有残留,造成污染就不好了;
还有就是性质不稳定的例如三氯氧磷啊、二氯亚砜啊这类,挥发枪,和空气中水反应。。。最好不要用移液器,你想取样精密点,就查密度称重取就好了。。。
还有很多例如氯苯之类的密度大于水的有机溶剂,粘度又小,用移液枪取很容易滴漏,造成损失误差;
你说一句“有机溶剂”,但其实情况很复杂的。。。所以,具体情况具体分析

