Thermo Reverse Transcriptase
- First-strand cDNA synthesis
- Active at 42~55℃. Optimum at 50℃.
- RNaseH negative
- Superior performance in RT-PCR. Up to 12 kb or more
- High processivity and sensitivity
Products
Cat.No. | Product | Size |
---|---|---|
RT10K | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase | 10,000 units |
RT50K | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase | 50,000 units |
RT10KN | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase (with dNTP Mix) | 10,000 units |
RT50KN | HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase (with dNTP Mix) | 50,000 units |
- Description
- Data
- Details
- Documents
HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase, a Thermo stable and RNase H negative variant of M-MLV RTase, can synthesize cDNAs from purified RNA templates at a temperature range of 42℃ ~ 55℃ and especially shows the highest activity at 50℃. At the escalated temperature, the cDNA synthesis is enhanced partially due to the less internal structural formation of the template RNA and increased polymerization activity of RTase. The high processivity and productivity of HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase allows this enzyme to amplify the high yield of product and can synthesize cDNA of target gene up to 12 kb from RNA template. This enzyme is quite suitable to synthesize the first-strand cDNA for RT-PCR of target gene. The cDNA synthesis from total RNA or poly-(A)+ RNA is performed by random primer, oligo-d(T) primer, or gene-specific primer.
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1、移液管是准确移取一定量溶液的量器(量出式量器,符号为Ex). 它是一根细长而中间膨大的玻璃管在管的上端有一环形标线,膨大部分标有它的容积和标定时的温度.常用的移液管有10 mL、25 mL、50 mL、100mL等规格。
2、吸量管的全称是"分度吸量管",又称为刻度移液管. 它是带有分度线的量出式玻璃量器。用于移取非固定量的溶液。吸量管可分为以下四类:
(1) 规定等待时间15s的吸量管
这类吸量管零位在上,完全流出式,它的任意一分度线的容量定义为:在20℃时,从零线排放到该分度线所流出20℃水的体积(m1).当液面降到该分度线以上几毫米时,应按紧管口停止排液15s,再将液面调到该分度线。在量取吸量管的全容量溶液时,排放过程中水流不应受到限制,液面降至流液口处静止后,要等待15s,再移走吸量管。
(2) 不完全流出式吸量管。
不完全流出式吸量管均为零点在上形式,最低分度线为标称容量.这类吸量管的任一分度线相应的容量定义为:20℃时,从零线排放到该分度线所流出的20C水的体积(mL) 。
(3)完全流出式吸量管。
这类吸量管有零点在上和零点在下两种形式.其任一分度线相应的容量定义为:在20℃时,从分度线排放到流液口时所流出20℃水的体积(mL),液体自由流下,直到确定弯月面已降到流液口静止后,再脱离容器(指零点在下式);或者从零线排放到该分度线或流液口所流出20℃水的体积(指零点在上式)。
(4) 吹出式吸量管。
这类吸量管流速较快,且不规定等待时间。有零点在上和零点在下两种形式,均为完全流出式。吹出式吸量管的任意一分度线的容量定义为:在20℃时,从该分度线排放到流液口(指零点在下)所流出的或从零线排放到该分度线(指零点在上)所流出的20℃水的体积(m1)。使用过程中液面降至流液口并静止时,应随即将最后一滴残留的溶液一次吹出。
目前市场上还有一种标“快”字的吸量管,其容量精度与吹出式吸量管相近似。吹出式及快流速吸量管的精度低、流速快,适于在仪器分析实验中加试剂用,最好不用其移取标准溶液。
吸量管的其它操作方法同移液管。
移液管,即带很多小刻度移液管
对于我们生物/医学实验ers来说,每天必用移液器;它的准确与否直接关系到实验结果的准确性及可重复性。可能在大家看来,玩“枪”就像吃饭喝水一样soeasy!但扫地僧的故事告诉我们:愈是看似简单的事物,却往往蕴藏着大道理。你真的知道吸液时该浸入液面以下多深吗?你能尽可能准确地移取Tween、高浓度蛋白溶液等粘稠、发泡的液体吗?长期使用后,你的移液器还准吗?你会自检移液器吗?
答案是No的小伙伴们,你们有任何关于移液器的问题都可以来问我,大家一起讨论共同进步哈~同时感谢丁香园交流平台和版主的支持!谢谢!
本活动技术支持来自普兰德(上海)贸易有限公司。
版主科研无止尽留言:
好帖
大家做溶出曲线稀释溶液时有某有再用移液枪?移液枪量取1ml的体积准确不?
2、吸液:用右手的拇指和中指捏住移液管的上端,将管的下口插入欲吸取的溶液中,插入
不要太浅或太深,一般为10~20mm处,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,
太深又会在管外沾附溶液过多。左手拿洗耳球,接在管的上口把溶液慢慢吸入,先吸入该管 容量的1/3
左右,用右手的食指按住管口,取出,横持,并转动管子使溶液接触到刻度以上 部位,以置换内壁的水分,然后将溶液从管的下口放出并弃去,如此用反复洗3
次后,即可 吸取溶液至刻度以上,立即用右手的食指按住管口。 3、调节液面:将移液管向上提升离开液面,管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上,管身保
持直立,略为放松食指(有时可微微转动吸管)使管内溶液慢慢从下口流出,直至溶液的弯
月面底部与标线相切为止,立即用食指压紧管口。将尖端的液滴靠壁去掉,移出移液管,插 入承接溶液的器皿中。
4、放出溶液:承接溶液的器皿如是锥形瓶,应使锥形瓶倾斜30°,移液管直立,管下端紧
靠锥形瓶内壁,稍松开食指,让溶液沿瓶壁慢慢流下,流完后管尖端接触瓶内壁约15 秒后,
再将移液管移去,残留在管末端的少量溶液,不可用外力强使其流出,因较准时已考虑了末 端保留的溶液的体积。
像乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮这类毒性较低,挥发性不是很大的,移液枪取肯定没问题,但是一个移液枪最多也就取10ml,我觉用这么精准的仪器来取溶剂,既麻烦又没必要;
像一些吡啶、哌啶类的毒性较大的,你用移液枪取后很容易有残留,造成污染就不好了;
还有就是性质不稳定的例如三氯氧磷啊、二氯亚砜啊这类,挥发枪,和空气中水反应。。。最好不要用移液器,你想取样精密点,就查密度称重取就好了。。。
还有很多例如氯苯之类的密度大于水的有机溶剂,粘度又小,用移液枪取很容易滴漏,造成损失误差;
你说一句“有机溶剂”,但其实情况很复杂的。。。所以,具体情况具体分析