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101Bio//( 10 rxn)/W2569-10
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101Bio//( 10 rxn)/W2569-10
品牌 / 
101Bio
货号 / 
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HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Name

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Cat. #

W2569-10
$ 39.00
(10 rxn)
W2569-30
$ 79.00
( 30 rxn)
W2569-100
$199.00
(100 rxn)
How to pay with

Application

  • Reverse transcription, 1st strand cDNA synthesis
  • cDNA library construction
This product is for research use only.

Specifications

Optimal Reaction Temperature:42℃
Final cDNA size:Up to 12 kb
Reaction time:30 ~ 50 min.
Reverse Transcriptase:HiFiScript
RNase H Activity:Reduced
Sensitivity:High
cDNA yield:High

Description and features

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit has been designed for the first-strand cDNA synthesis kit in a two-step RT-PCR experiments. HiFiScript reverse transcriptase in the kit is a new recombinant Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase (M-MLV RT) with novel mutations, which endorse HiFiScript the following features:

  • High transcriptional efficiency – higher yields of cDNA
  • High sensitivity – pg level total RNA and/or mRNA can be used to synthesis first strand cDNA.
  • RNase H activity is removed – improved the elongation ability of the enzyme, and increased affinity of transcriptase to RNA template.Generate first strand cDNA up to 12 kb.

The optimized RT Buffer make the reverse transcriptase a wider range of applications, and with high compatibility for subsequent PCR and quantitative PCR experiments.

Shipping / Storage

Ship at 4℃. Store at -20℃ for up to 1 year and avoid freeze-thaw cycles.

Manual (protocol)

101Bio.com HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Components

ComponentsAmount
W2569-10W2569-100
HiFiScript, reverse transcriptase, 200 U/μL10 μL100 μL
5X RT Buffer50 μL500 μL
Primer Mix24 μL240 μL
dNTP Mix, 2.5 mM Each50 μL500 μL
DTT, 0.1 M24 μL240 μL
RNase-Free Water1 mL1 mL

RT reaction system

HiFiScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit

Note: If the starting RNA is less than 50 ng, RNase Inhibitor (RNasin, Cat.#: W0596) should be added.

Exosome IsolationPurity > 95%
Protein Extraction1 min total protein, 40 min membrane protein
3D Cell Culture Gel30% < mkt="">
PCR Kits50% < mkt="">
Beta-Hexosaminidase Activity Colorimetric Assay Fast and sensitive, High-throughput
Endotoxin-Free Plasmid Kitsmaxi, midi and mini-prep
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公司介绍
公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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椎间盘源性腰痛在临床上较为常见,表现为腰骶部中线部位的胀痛不适以及通过骶髂关节和髂嵴的牵涉痛,不能久坐,久站,卧床休息常不能缓解,最终往往需要手术干预。目前许多学者认为椎间盘切除椎体间融合可切除疼痛根源,消除了节段的异常运动,取得了较好的治疗效果。 对于复发性腰椎间盘突出而言,如果采用传统的手术方式,依然自原手术入路进入,由于手术疤 查看更多>
鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒是由南京森贝伽生物科技有限公司代理或销售的森贝伽品牌的试剂,产品来源于南京。南京森贝伽生物科技有限公司是中国最权威的鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒试剂销售服务商之一,在南京等地方销售鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒产品 查看更多>
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。近年大量研究证实,生物素—亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大... 查看更多>
甄准合金检测及监测用标准品溯源至NIST,合金检测及监测用标准品溯源至NIST 查看更多>
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Purification of Plasmid from 50 ml-culture1. Shake E. coli harboring plasmid at 37 C overnight in 50 ml of TB containing appropriate antibiotics. (when using a 查看更多>
合成的寡核苷酸在合成时其5端缺少一个磷酸基, 因而极易用T4噬菌体多核苷酸化反应,这种探针可达到于γ=32P从[γ=32P]ATP本身同样高的放射比活度。下面所述的反应是为对10pmol寡核苷酸进行高比活度的标记而设计的。通过扩大或缩小这一反应的规 查看更多>
近日,国家药品监督管理局经审查,批准了北京纳捷诊断试剂有限公司研制的创新产品“丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法)”的注册。该产品基于自主创新的一管法的PCR专利技术,用于体外定量测定血清样本中的丙型肝炎病毒(HCV)核酸(RNA)。该产品适用于需要进行HCV感染检测的患者和接受抗病毒治疗的丙型肝炎患者。国家药品监督管理局鼓励支持医疗器械产业创新发展,进一步做好创新医疗器械审查。食品药品监管部门将加强产品上市后质量监管,保障公众用械安全,确保医疗器械产业的健康有序发展。 查看更多>
1.1 核酸序列的检索 http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast软件的核酸序列同源性分析 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/blas 查看更多>
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基因工程中标记基因必不可少,基因工程的核心步骤,构建基因表达载体,中用标记基因检测重组质粒是否已经导入受体细胞中,从而区分己导入细胞和未导入细胞。(标记基因通常是抗生素基因。)
似乎都是鉴定目的基因是否导入受体细胞 没有鉴定是否成功导入质粒的 鉴定目的基因是否导入受体细胞有四个层次 1 直接鉴定受体细胞中是否有目的基因 用DNA分子杂交 2 鉴定目的基因是否转录 分子杂交(mRNA) 3 目的基因是否表达 抗原-抗体 (蛋白质) 4 看受体细胞发育成的个体是否表现出相关性状
cDNA文库是通过RNA反转录得来的,真核生物含有内含子(即转录为RNA后会被剪掉不表达的部分),而原核生物不含内含子,所以cDNA文库适用于真核生物,基因组文库适用于原核生物
请问pSilencer和pSUPER干扰载体(普通的质粒,不是腺病毒或慢病毒)转染动物细胞后,质粒能够整合到染色体上吗?
若不整合,干扰效果能稳定持续多长时间啊?
细胞会不会最终把游离的质粒摔掉?

各种系统都可以使用,AlleleID7.0没搞的定

本软件只作为学习研究之用,研究完后马上删除,支持正版。。。




感谢ddd198599及其他司机的信息及启发

http://www.stemcell8.cn/thread-20673-1-1.html



AlleleID6破解版.rar(44952.85k)

本人,大学本科生小白,想问一下各位老师,sirna设计出来之后,用snapgene吧sirna与靶mrna进行序列对比为什么没有同源序列,还有如果我想检验sirna是不是脱靶,是不是可以将sirna序列与相关影响的非靶基因序列对比确定哪。

表达载体构建正义和反义,一般用于基因功能的研究,正义为强势表达
(forced expression)或过表达(overexpression),以观察基因表型,反义则是用来抑制基因表达,以观察在目的基因的表达受到抑制的情况下表型的变化
相关疾病:高血压慢性心力衰竭冠心病心肌梗死糖尿病1977年施贵宝公司科学家ondetti等根据血管紧张素转换酶底物的化学结构推测设计出ACE的活性部位模型,1981年全球第一个血管紧张素转换酶抑制剂类药物卡托普利上市并用于治疗高血压,被列入降压药物......

《血管紧张素转换酶抑制剂在心血管病中应用的中国专家共识》.PDF(242.69k)
标准品应该用十万分之一的天平称量,应该最低称量多少?如果是浓度为10ug/ml的标准品又应该怎么称量?

请教大家一个问题,不同厂家cIEF的Marker能混合使用吗?另外,如果我对其它厂家pI值为6.0的marker进行cIEF测定,那测得的pI值会等于6.0吗?谢谢!

免疫沉淀
当然,确定miRNA与mRNA之间的互作,我们还有更直接的方法,那就是从实验上寻找物理相互作用。我们可以利用RNA诱导沉默复合物(RISC)中的Argonaut(AGO)蛋白的抗体进行免疫共沉淀(co-IP)。生物通 www.ebiotrade.com
目前更先进的方法是通过紫外线照射以交联复合物,然后开展深度测序以鉴定发现的RNA,这种方法被称为紫外交联免疫沉淀结合高通量测序(HITS-CLIP),或CLIP-seq。利用这种方法来寻找miRNA的靶基因,能够明显降低miRNA结合位点的假阳性预测率,并且缩小miRNA结合位点的空间范围,可在全基因组范围内鉴定AGO蛋白与不同RNA上的结合。现在有多家公司提供CLIP-seq服务,如锐博生物。
Clontech公司(Takara旗下)也推出了一种新工具,能协助鉴定细胞中的miRNA靶点。这一工具名为MirTrap系统。它利用RISC蛋白的显性失活突变体,允许miRNA与其目标结合,但限制进一步的加工。此亚基整合到内源的Argonaute/RISC复合物中,并“锁定”miRNA-目标mRNA。显性失活亚基上的DYKDDDDK(FLAG表位)标签有助于整个Ago/RISC复合物的捕获和分离。这样就能实现miRNA及其目标的免疫沉淀,从而通过新一代测序或定量PCR来鉴定或定量。生物通
整个过程大致如下:
1. 创建miRNA模拟物。生物通 www.ebiotrade.com
2. 将这些miRNA模拟物和pMirTrap载体共转染到哺乳动物细胞,并孵育24小时。同时利用miR-132、pMirTrap载体和pMirTrap对照载体开展对照转染。
3. 利用附带的MirTrap分离试剂盒裂解转染后的细胞培养物。生物通 www.ebiotrade.com
4. 利用分离试剂盒中的磁珠对RISC复合物(其中包括靶标mRNA)进行免疫沉淀。
5. 利用附带的NucleoSpin RNA XS试剂盒分离与磁珠结合的靶标mRNA。
6. 通过qPCR或新一代测序分析分离出的RNA,鉴定出特定miRNA的靶标mRNA。
Sigma-Aldrich的MISSION Target ID cDNA文库让研究人员能够在实验室内开展全转录组范围的miRNA和ncRNA靶基因鉴定。它是个全转录组范围的cDNA文库。在文库转染和选择之后,细胞被已知miRNA转染。对于那些包含与miRNA相互作用的cDNA的细胞,它们将生存到第二轮。那些选择出的cDNA可通过测序来鉴定。这样,研究人员只需投入很少,就能实现大范围的筛选。
靶基因的验证
预测终归是预测,miRNA的靶基因还必须经过验证。这个过程与一开始寻找靶基因的过程相似,也就是抑制或过表达miRNA,然后检查mRNA或蛋白水平的反应。生物通 www.ebiotrade.com
目前最常用的方法是荧光素酶报告基因法。首先,构建荧光素酶表达载体,将希望鉴定的miRNA靶基因的3’UTR插入荧光素酶基因的3’UTR中,然后将构建好的重组载体转染到细胞中,并改变miRNA的表达水平,最后检测荧光素酶的表达情况,以分析3’UTR中是否含有miRNA的靶位点。
目前有多家公司提供荧光素酶报告载体或构建服务。Promega就提供pmirGLO双荧光素酶表达载体。它采用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶这两种报告基因,其中萤火虫荧光素酶(luc2)作为主要报告基因,其表达减少意味着内源性的或外源引入的miRNA 与克隆的miRNA 的靶序列发生了结合;海肾荧光素酶/新霉素基因(hRluc-neo)作为对照报告基因,既能实现归一化处理,又能筛选稳定转染的细胞系。这样就以一个载体实现了以往两个载体的功能。
就目前而言,预测和鉴定miRNA靶基因的方法虽然不少,但仍然没有一种常规方法。随着计算机算法的不断改进和生物学技术的快速发展,这种现状有望改变。让我们拭目以待吧。(生物通 余亮)
将新产品定型后制定企业标准,然后进行检测,再送专家组鉴定。