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Wheaton/WSR Top Drive 6F 5 x 11 Deck/WSTPF5110-A
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Wheaton
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核酸内切酶(endonuclease)在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等分解DNA的酶;RNase、RNaseT1等分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并... 查看更多>
相关专题 限制性核酸内切酶产品选择专题 一、限制性内切酶对DNA消化的方案 1.限制性内切酶反应在灭菌的0.5ml离心管中进行。 2. 20μl体积反应体系如下: DNA 0.2-1 μg 10×酶切buffer 2.0 μl 限制性内切酶 1-2 u(单位) 加ddH2O 至 20 μl 限制性内切酶最后加入,轻轻混 ... 查看更多>
5月2日,国际权威学术期刊《自然》在线发表了来自中科院上海生物化学与细胞生物学研究所徐国良院士联合复旦大学唐惠儒教授和中科院武汉水生生物研究所黄开耀研究员等多个课题组合作完成的研究成果“A vitamin-C-derived DNA modification catalysed by an algal TET homologue”。该研究首次在莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)这种单细胞真核生物中鉴定到一种新... 查看更多>
限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。Ⅰ型限制性内切酶既... 查看更多>
特性 耐热性好 可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测(1,3) 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变(4) 概述Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 4 查看更多>
Enzymatics专注于于酶产品的研发,为市场带来了特殊的、高品质的产品。是一家试剂、试剂盒和测定的生产商,使全球客户变革了诊断、治疗和生命科学的研究。业务包括:试... 查看更多>
T4 DNA连接酶(T4 DNA ligase)产品介绍及价格链接请点击T4 DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可连接双链DNA的平末端、互补粘性末端及其中的单链切口,也能催化RNA连接到DNA或者双链RNA上,但不催化单链核酸的连接。必拓生物采用先进技术研制出高纯度、高品质的T4 DNA连接酶,媲美TaKaRa、NEB产品。必拓®T4 DNA连接酶与NEB T... 查看更多>
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RNA加工修饰,主要加工方式是切断和碱基修饰,真核生物tRNA前体一般无生物学特性,需要进行加工修饰。... 查看更多>
特性 连接单链 RNA 和 DNA 用 5 -[32P] pCp 进行 RNA 3末端标记 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接 合成单链寡脱氧核苷酸 蛋白质中掺入非天然氨基酸 概述催化 3→5 磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5 -磷酸末端和 3-羟基末端连接。伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi 作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸(1)。 来源携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E.coli 菌株。 反应条件1X T4 RNA 连接酶缓冲液[50 查看更多>
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来自瑞士日内瓦大学的J?rgMorf及其同事发现冷诱导的RNA结合蛋白(CIRP)的周期性积累会受到体温的调控,他们还发现CIRP赋予了昼夜节律振荡器的健壮性。
详情:
http://www.bioku.cn/201212/science-cirp-circADIan-gene-clip-posttranscriptional-modification-fibroblast/
在哺乳动物组织中,节律基因的表达受到局部的振荡器或视交叉上核中生物钟主钟控制的系统信号的调控。本研究发现是受刺激的体温循环而不是外周振荡器,控制纤维母细胞中的冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的节律性表达。反过来,功能缺失性实验表明CIRP是高振幅的节奏基因表达所需的。利用基于生物素-链亲和素的交联和免疫沉淀反应(CLIP),本研究对CIRP结合的RNA进行了全转录组分析,发现了一些编码昼夜节律振荡器蛋白的转录物,包括CLOCK蛋白。此外,在CIRP缺失的纤维母细胞中,CLOCK的含量大大减少。因为在这些细胞中,CLOCK的异位表达提高了节律基因的表达水平,因此我们猜测CIRP通过调节CLOCK的表达水平赋予了昼夜节奏振荡器的健壮性。
研究称DNA修饰可控制个体恐惧感来自昆士兰大学昆士兰脑研究所的神经学家或许发现了控制个体产生恐惧感的方法
对许多人来说,类似乘坐飞机或看到蜘蛛在地板上爬过这样的经历,并不只是简单地导致心跳加速和手心出汗,而是已经成为严重的恐惧症,能带来沉重的焦虑。近日,一个国际研究团队的论文指出,他们或许发现了通过DNA修饰来控制个体恐惧感的方法。
昆士兰大学昆士兰大脑研究所(QBI)的高级研究员、神经科学家TimothyBredy博士称,研究团队阐明了如何缓解与恐惧相关的记忆,特别是在恐惧症或创伤后精神压力障碍的病例中。
TimothyBredy博士称,他们已经发现了与消除恐惧有关的基因调控新机制。这种机制是一种抑制性的学习过程,当无需做出反应的时候,这一过程对于控制个体的恐惧至关重要。Bredy说:“基因运作的方式并不是静态的,而是动态变化的,能随着我们每天的生活经验而改变,与情绪有关的事件会产生显著的影响。”
通过了解在不改变内在序列的前提下改变DNA功能的机理,可以为未来开发与恐惧相关的焦虑症靶向疗法提供依据。Bredy说:“通过新型的表观遗传学调控模式对基因实施靶向作用,选择性地加强消除恐惧的记忆,从而达到想要的效果。”
研究团队中的博士生XiangLi说,恐惧消除是个体快速行为适应的一个明显例子。恐惧消除过程中的障碍与焦虑症(恐惧相关的)的出现具有密切联系。Bredy博士称,该研究首次综合分析了DNA修饰如何影响恐惧的消除。参与这项研究的还有来自加州大学欧文分校和哈佛大学的学者。相关研究结果发表在近期的《美国科学院院刊》(PNAS)上。
原文检索:
XiangLi,WeiWei,Qiong-YiZhao,JocelynWidagdo,DanayBaker-Andresen,CharlotteR.Flavell,AnaD’Alessio,YiZhang,andTimothyW.Bredy.NeocorticalTet3-mediatedaccumulationof5-hydroxymethylcytosinepromotesrapidbehavioraladaptation.PNAS,April22,2014;doi:10.1073/pnas.1318906111
一般来说,以DNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶都的结合位点都在DNA上。
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 (也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶),它们的结合位点在RNA上.
也就是说,模版是谁,结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列,如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
DNA聚合酶有特异性的,DNA聚合酶只能催化核苷酸与核苷酸短链的连接,且具有方向性,由DNA5'端点开始复制到3'端的。
RT-nPCR实际叫做反转录-巢式PCR,反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强。
LabScan XE Tomato (LSXE) HunterLab123
leyoutianxia142021-08-11
这跟你所用的反转录酶是有关的。按照你所用的反转录酶的说明书来操作。

求有经验的大神指教,我的载体和目的基因连不上,转化不到大肠中,比例为1:3。另外,为啥胶回收后的载体浓度那么低,大约6ng/ul了,影响连接么?

RNA聚合酶分三类。
RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,转录rRNA顺序。RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,转录大多数基因,需要“TATA”框。RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中,转录很少 RNA聚合酶几种基因如tRNA基因如5SrRNA基因。有些重复顺序如Alu顺序可能也由这种酶转录。
观察以下dna结构图,判断dna聚合酶能够与哪一个结合
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
反转录和逆转录有什么区别? 123
生曰快樂_02482021-08-15
两者是同一生理过程的不同提法,没有本质的区别,都是遗传信息流动的方向是从RNA到DNA。但在一些考题中,它们又有所区别的。反转录是人工条件下,借用逆转录酶,根据逆转录原理,实现用细胞生物mRNA为模板,合成目的基因的过程。目的基因的获得方法中有反转录法,而中心法则的补充时则用逆转录法。就像下面的一道考题,答案就是B。已获得了某种蛋白质的mRNA,通过利用这个mRNA分子获得目的基因,在下列获得目的基因的方法中,哪一种最可取(  ) A、超速离心法   B、反转录法  C、逆转录法   D、鸟枪法cDNA为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA,即complementary DNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链。

大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊
拓扑异构酶抑制剂()_123
songyunlong2021-07-26
相关疾病:癌症肿瘤结肠癌宫颈癌卵巢癌近年来,肿瘤化疗取得了相当大的进步,肿瘤患者生存时间明显延长,特别是对白血病、恶性淋巴瘤等的治疗有了...
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