Name | 101Bio HRP Substrate Kit | |||||||||
Cat. # | P5W1 How to pay with ![]() Also can buy from : ![]() ![]() | |||||||||
Application | Western Blot Ready to use, strong and long-lasting signal (>4h), low background. This product is for research use only. | |||||||||
Product Size | 30 ml / 30 ml | |||||||||
Description | 101Bio HRP substrate kit provides high intensity signal and low background detection of low abundance endogenous proteins. This highly sensitive ECL substrate is available in a two-bottle format for Western blotting with horseradish peroxidase (HRP) enzyme conjugates.This high-performance substrate will pick up your most difficult-to-detect proteins in Western Blots.The ECL substrate is compatible with different membranes, blocking reagents and a wide range of antibody dilutions. 101Bio HPR substrate kit provides excellent performance, versatility and long-lasting signal for high quality data.
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Shipping / Storage | Ship at room temperature.Store at 4℃ | |||||||||
Shelf Life | 12 months | |||||||||
Manual (protocol) | ![]() | |||||||||
Components |
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| Name | Cat. # | Size | ||
|---|---|---|---|---|
| 101Bio HRP Substrate Kit | P5W1 | 30 ml /30 ml | ||
| 101Bio Antibody Enhancer | P5W2 | 30 ml | ||
| 101Bio WB Stripping Solution | P5W3 | 250 ml | ||
| 101Bio Ponceau S Stain | P5W4 | 250 ml | ||
| 101Bio Peroxidase Suppressor | P5W5 | 30 ml | ||
| 101Bio High Efficiency Protein Precipitation kit | P5W6 | 30 ml /30 ml | ||
| 101Bio Red Blood Cell Lysis Buffer | P5W7 | 250 ml | ||
| 101Bio WB Blocking Solution | P5W8 | 250 ml | ||
| 101Bio Denaturing Protein Solubilization Reagent | P5W9 | 10 ml | ||
| 101Bio Non-Denatured Protein Solubilization Reagent | P5W10 | 10 ml | ||
| 101Bio Protein Solubilization Reagent for MS | P5W11 | 2 ml | ||
| 101Bio SDS-Remover | P5W12 | 10 ml | ||
| 101Bio Albumin Depletion Reagent for Plasma and Serum | P5W13 | 10 ml | ||
| 101Bio Protein A+G Agarose Beads | W0349 | 1 ml | ||
| 101Bio Protease Inhibitor Cocktail (100x) | W2200 | 1 ml | ||
| 101Bio Yeast Total Protein Extraction Kit for SDS-PAGE | Y203-50 | 50 rxn |

![]() | Exosome Isolation | Purity > 95% |
![]() | Protein Extraction | 1 min total protein, 40 min membrane protein |
![]() | 3D Cell Culture Gel | 30% < mkt=""> |
![]() | PCR Kits | 50% < mkt=""> |
![]() | Beta-Hexosaminidase Activity Colorimetric Assay | Fast and sensitive, High-throughput |
![]() | Endotoxin-Free Plasmid Kits | maxi, midi and mini-prep |
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而且保真性要高一点的,因为今后要用来做表达
摘要:随着转基因技术的发展,获取目的基因片段的方法也越来越多样化,获取目的基因片段的技术也日新月异,但是无论获取的方法和手段怎么样发展,获取的主要思路始终在围绕一根主线在开展。
关键词:基因 ,遗传效应,基因克隆,体外重组
一、基因工程
基因工程作为一门理论性与实践性较强的学科,其方法与技术已经渗透到现代生命科学的各个分支领域,成为生命科学的一门核心技术。基因工程包含许多独特的实验方法和技术,不仅内容丰富,涉及面广,实用性也强。基因工程是通过DNA 重组技术, 获得具有特殊生物遗传性状和功能的遗传工具生物体, 基因工程技术广泛应用于农业、医学、食品工业等。本文就基因工程的应用现状综合阐述。
基因工程技术是一项极为复杂的高新生物技术, 它利用现代遗传学与分子生物学的理论和方法, 按照人类所需, 用DNA 重组技术对生物基因组的结构和组成进行人为修饰或改造, 从而改变生物的结构和功能, 使之有效表达出人类所需要的蛋白质或人类有益的生物性状。基因工程从诞生至今, 仅有30 年的历史, 然而, 无论是在基础理论研究领域, 还是在生产实际应用方面, 都已取得了惊人的成绩。首先,基因工程给生命科学自身的研究带来了深刻的变化。目前科学家已完成了多种细胞器的基因组全序列测定工作。其次, 基因工程具有广泛的应用价值, 能为工农业生产、医药卫生、环境保护开辟新途径。
基因工程( 又称DNA 重组技术、基因重组技术) , 是20 世纪70 年代初兴起的技术科学, 是用人工的方法将目的基因与载体进行DNA重组, 将DNA 重组体送入受体细胞, 使它在受体细胞内复制、转录、翻译, 获得目的基因的表达产物。这种跨越天然物种屏障, 把来自任何生物的基因置于毫无亲缘关系的新的寄主生物细胞之中的能力, 是基因工程技术区别于其他技术的根本特征。 基因工程研究内容为:
(1) 从复杂的生物有机体基因组中, 经过酶切消化或PCR 扩增等步骤, 分离出带有目的基因的DNA 片段。
(2) 在体外, 将带有目的基因的外源DNA 片段连接到能够自我复制并具有选择记号的载体分子上, 形成重组DNA分子。
(3)重组DNA 分子转移到适当的受体细胞, 并与之一起增殖。
(4) 从大量的细胞繁殖群体中, 筛选出获得了重组DNA 分子的受体细胞克隆。
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 (也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶),它们的结合位点在RNA上.
也就是说,模版是谁,结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列,如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
没有序列识别的功能,他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
最近遇到了实验上的大问题,就是用一步法做RNA的荧光定量PCR时,发现低浓度的做不出来,而DNA是可以的,想请问各位在一步法PCR中有没有什么高见,就是逆转录的Buffer有没有什么需要注意的地方!就是在逆转录酶的最适Buffer和Taq酶的最适Buffer中寻找一个最适的Buffer!
DNA水解酶,用于切断磷酸二酯键的酶,这些酶使糖-磷酸酯主链上的磷酸二酯键水解.一般分为两种:外切核酸酶和内切核酸酶。
简介:
原理
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。







