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cDNA文库技术
2021-07-25
问题描述:

请教一下:建立CDNA文库目前方法很多,试剂盒的种类也非常繁杂。我想用固相法来建立文库,即利用磁珠的吸附特性合成。但不清楚这样的操作是否容易控制反应条件?另外,这样作出的库容量是否能达到较高?磁珠的应用对库容的影响到底大不大?不知哪位高手做过这方面的实验,烦告知!不胜感激!

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effiejason
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我现在用的是clonetech公司的smart技术建库的试剂盒,效果还不错
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feeling
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我见过有人用clonetech公司的这个试剂盒,但是到筛库及测序时遇到了问题,不知你用的是什么载体?可以讨教一下!
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sm_honker
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clonetech公司的做的还可以
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feeling
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用SMART技术所构建的文库,扩增偏性很大啊!如何考虑这一问题?
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如风冷
  用户
我也用clontech的试剂盒,还没开始做,不过可能从总RNA开始,effiejason可以指点一下吗?多谢。能告诉我你的e-mail吗。
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xyhan04
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对于基因结构完全不清楚而且很难提纯的DNA病毒,可否用正常细胞和感染细胞来做差示文库以获得其主要的功能基因吗?恳请高手指教!!
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keith
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本人认为Stratagene公司的ZAP-CDNA®Gigapack®IIIGoldCloningKit是最优秀的cDNA文库构建试剂盒,使用mRNA建库,载体为pBluscriptSK(+/-),但该试剂盒价格比clontech的贵不少
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xib99
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请教各位建文库的高手,建文库前你们是否也将总RNA用DNA酶消化痕量DNA,还是直接用总RNA建文库。谢谢!
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Onobel
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偶用mRNA开始的。。。
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jgliang
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直接用总RNA建库相对于用mRNA建库有哪些方面的优缺点。这方面我了解的很少,请指教。
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dbfpp
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哪位大侠可以告知建库时直接用总RNA好还是用mRNA好?
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gipsygirl
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直接用总RNA即可,我现在正在建
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