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NEB/ΦX174 RF II DNA/N3022S/30 μg
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Description:
Thisisthedouble-stranded,nicked,circularformofΦX174DNA(relaxedform).ThemolecularweightofΦX174DNAis3.50 X 106daltonsitis5,386basepairsinlength.Greaterthan90%ofthemoleculesareRFII,theremainderareRFI(supercoiled)andlinearΦX174DNA.DNASUandAddgenearecentralrepositoriesforplasmidclonesandcollectionsthatmayalsobehelpful.
ProductSource
ΦX174RFIIispreparedbyrelaxing(nicking)ΦX174RFIDNAinhighsaltat75°C.Greaterthan90%ofthemoleculesareintheRFIIformasindicatedbyagarosegelelectrophoresis.蚂蚁淘电商平台
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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2018-04-10
经过我们和元上海专业团队呕心沥血的努力，终于研发出了一种简单有效感染胰腺的新血型病毒载体——AAV-PAN 胰腺是机体重要的内外分泌的功能器官，参与机体消化，血糖代谢，脂质代谢等。当其发生病变会导致糖尿病、胰腺癌的发生，因此在代谢和肿瘤研究中找到靶向胰腺的病毒载体非常重要。 过去，为了感染胰腺，我们常用AAV8病毒载体，但是其感染过程非常复杂，需要用微夹钳夹住胆胰管的近肝端和近十二指肠端，然后用泵将病毒注入胆管感染胰腺。 胰腺病毒载体... 查看更多
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2021-09-16
上海沪震实业有限公司在发布的载体HDM-Tat1b供应信息，浏览与载体HDM-Tat1b相关的产品或在搜索更多与载体HDM-Tat1b相关的内容。 查看更多
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2018-04-06
pKD46载体是由深圳市伟通生物公司代理或销售的Stratagene品牌的试剂，产品来源于国外。深圳市伟通生物公司是中国最权威的pKD46载体试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售pKD46载体试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业pKD46载体仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的pKD46载体产品 查看更多
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【基于慢病毒载体的miRNA载体构建服务】生物实验,分子生物学实验技术,BIOLEAF.实验技术服务 tosciencebio@126.com 选实验技术服务，还在上海通善。 您的选择，就是对我们公司的肯定。 相信通善，相信自己，我们有太多优势，让您在众多信息流中独具慧眼的找到我们。【基于慢病毒载体的miRNA载体构建服务】生物实验,分子生物学实验技术,BIOLEAF.实验技术服务 tosciencebio@126.com 一，通善 查看更多
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2021-07-21
上海北诺生物科技有限公司在发布的pBI101植物双元表达载体供应信息，浏览与pBI101植物双元表达载体相关的产品或在搜索更多与pBI101植物双元表达载体相关的内容。 查看更多
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上海盖宁生物科技有限公司在发布的pGIPZ empty载体供应信息，浏览与pGIPZ empty载体相关的产品或在搜索更多与pGIPZ empty载体相关的内容。 查看更多
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2018-02-16
北京华夏远洋科技有限公司在发布的SLC30A3 溶质载体锌转运3抗体供应信息，浏览与SLC30A3 溶质载体锌转运3抗体相关的产品或在搜索更多与SLC30A3 溶质载体锌转运3抗体相关的内容。 查看更多
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2018-05-21
上海宾智生物科技有限公司在发布的VPK-411 pAAV-MCS Promoterless Expression Vector 质粒pAAV-MCS无启动子表达载体供应信息，浏览与VPK-411 pAAV-MCS Promoterless Expression Vector 质粒pAAV-MCS无启动子表达载体相关的产品或在搜索更多与VPK-411 pAAV-MCS Promoterless Expression Vector 质粒pAAV-MCS无启动子表达载体相关的内容。 查看更多
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2018-08-08
本章将会讨论昆虫来源的杆状病毒展示载体的设计及其潜在的用途。建立展示库的一般步骤和这些基因递送载体的特性也将会在本章中进行阐述。作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」 查看更多
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2018-03-20
上海羽朵生物科技有限公司在发布的纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）供应信息，浏览与纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）相关的产品或在搜索更多与纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）相关的内容。 查看更多
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RNA干扰后mRNA表达量会上升吗? 分子生物 学术科研...123
captain小浪花2017-11-07
正常情况是要mRNA表达量下降的，但是如果你这个小RNA设计的不好，那有可能下降的水平有限，再通过定量PCR检测时候几个循环的误差就可以弥补回来下降那些的量了，所以尽量不要用太多的循环跑定量。厚百生物祝您选择适用的培养基，实验顺利！
目的基因启动子能启动报告基因吗123
█绪凡█2832017-11-05
目的基因启动子能启动报告基因
启动子是RNA聚合酶能够识别并与之结合,从而起始基因转录的一段DNA序列,通常位于基因上游.一个典型的启 动子包括CAAT-box和TATA-box,它们分别依赖DNA的RNA聚合酶的识别和结合位点,一般位于转录起始位点上游几十个碱基处.在核心启动子上 游通常会有一些特殊的DNA序列,即顺式作用元件,转录因子与之结合从而激活或抑制基因的转录.一旦RNA聚合酶定位并结合在启动子上即可 启动基因转录,因此启动子是基因表达调控的重要元件,它与RNA聚合酶及其他蛋白辅助因子等反式作用因子的相互作用是启动子调控基因转录的实质.
根据启动子的转录模式可将其分为3类：组成型启动子、组织或器官特异性启动子和诱导型启动子.
启动子是RNA聚合酶能够识别并与之结合,从而起始基因转录的一段DNA序列,通常位于基因上游.一个典型的启 动子包括CAAT-box和TATA-box,它们分别依赖DNA的RNA聚合酶的识别和结合位点,一般位于转录起始位点上游几十个碱基处.在核心启动子上 游通常会有一些特殊的DNA序列,即顺式作用元件,转录因子与之结合从而激活或抑制基因的转录.一旦RNA聚合酶定位并结合在启动子上即可 启动基因转录,因此启动子是基因表达调控的重要元件,它与RNA聚合酶及其他蛋白辅助因子等反式作用因子的相互作用是启动子调控基因转录的实质.
根据启动子的转录模式可将其分为3类：组成型启动子、组织或器官特异性启动子和诱导型启动子.
RNA干扰的RNA干扰主体实验是怎样的呢? – 手机爱问123
猥琐哥5Px2017-11-25
siRNA表达载体构建好后，即可进行RNA干扰主体实验。
RNA干扰主体实验的重点在于： 按照nature的标准，一个严格的RNAi介导knockdown实验要有6个对照：
⒈转染试剂对照（监控转染及培养条件对结果的影响）；
⒉nonsense siRNA对照（监控外源核酸本身对结果的影响）；
⒊positive siRNA对照（监控假阴性）；
⒋技术重复对照（也叫off-target 对照，也就是利用至少2个靶点的siRNA同时实验，2个siRNA互为off-target control，当两者的表型相同时，才有可能是特异性的knockdown效应）；
⒌rescue 对照（knockdown之后做超表达，看是否有性状的逆转，这也是为了说明knockdown的特异性）；6.全表达组扫描对照（就是转录/表达芯片扫描，以最终确定表型不是由于off-target造成）。
实际实验中，全表达组扫描对照很少有文献涉及。其它几个对照中，1,2两种对照即所谓的空白细胞对照、NC对照，基本是所有杂志都要求具备的。4,5两种对照，主要是为了解决off-target效应，选做一种即可，一般建议选5，涉及的实验即所谓的“RNA干扰回复实验”， 一般应该从mRNA水平、蛋白质水平、细胞表型水平三个层次来检测干扰效率。
mRNA水平：RT-PCR、Real-time PCR；蛋白质水平：Western-blot、ELISA、免疫组化；细胞表型水平：MTT、克隆形成实验、流式细胞检测、细胞小室实验等。RNA干扰效率在动物模型上的进一步验证（体内） 动物模型实验可以采取“体内法”和“体外法”。
体内法，即先做裸鼠成瘤模型，再将质粒或病毒导入裸鼠，检测RNA干扰效果。此法操作复杂，对质粒和病毒产品的质和量要求都较高，但是比较贴近实际，说服力较显著。体外法，即先将质粒或病毒导入肿瘤细胞，再将肿瘤细胞导入动物体内，然后检测RNA干扰效果。此法操作较简单，对质粒和病毒产品的质量要求较低，所以为大多数文献所采用。建议采用此方法来进行动物模型水平的实验。向左转|向右转
RNA干扰主体实验的重点在于： 按照nature的标准，一个严格的RNAi介导knockdown实验要有6个对照：
⒈转染试剂对照（监控转染及培养条件对结果的影响）；
⒉nonsense siRNA对照（监控外源核酸本身对结果的影响）；
⒊positive siRNA对照（监控假阴性）；
⒋技术重复对照（也叫off-target 对照，也就是利用至少2个靶点的siRNA同时实验，2个siRNA互为off-target control，当两者的表型相同时，才有可能是特异性的knockdown效应）；
⒌rescue 对照（knockdown之后做超表达，看是否有性状的逆转，这也是为了说明knockdown的特异性）；6.全表达组扫描对照（就是转录/表达芯片扫描，以最终确定表型不是由于off-target造成）。
实际实验中，全表达组扫描对照很少有文献涉及。其它几个对照中，1,2两种对照即所谓的空白细胞对照、NC对照，基本是所有杂志都要求具备的。4,5两种对照，主要是为了解决off-target效应，选做一种即可，一般建议选5，涉及的实验即所谓的“RNA干扰回复实验”， 一般应该从mRNA水平、蛋白质水平、细胞表型水平三个层次来检测干扰效率。
mRNA水平：RT-PCR、Real-time PCR；蛋白质水平：Western-blot、ELISA、免疫组化；细胞表型水平：MTT、克隆形成实验、流式细胞检测、细胞小室实验等。RNA干扰效率在动物模型上的进一步验证（体内） 动物模型实验可以采取“体内法”和“体外法”。
体内法，即先做裸鼠成瘤模型，再将质粒或病毒导入裸鼠，检测RNA干扰效果。此法操作复杂，对质粒和病毒产品的质和量要求都较高，但是比较贴近实际，说服力较显著。体外法，即先将质粒或病毒导入肿瘤细胞，再将肿瘤细胞导入动物体内，然后检测RNA干扰效果。此法操作较简单，对质粒和病毒产品的质量要求较低，所以为大多数文献所采用。建议采用此方法来进行动物模型水平的实验。向左转|向右转
动物细胞表达系统中常用的表达载体有哪些123
LR0271LR2017-10-02
病毒，噬菌体衍生物，质粒（环状DNA分子）
【求助】请问有没有带荧光的RNA干扰载体？_问答详情_载体_其他分...123
wlnju2021-07-22
想做稳定克隆用，有没有这样的载体啊？
RNA干扰载体的构建的实验流程123
血刺SC3422017-11-06
在RNA干扰实验中
首先需要构建dsRNA表达载体
将这种载体导入受体细胞中后
表达产生的dsRNA在DICER酶作用下形成siRNA
引起具有相同序列的mRNA发生讲解
导致细胞或个体不能合成相应的蛋白质
所以个体会表现出功能缺失表型
构建表达载体通常选用dsRNA
需要注意的一些方面是
dsRNA序列中GC的含量要小于50%
高GC含量会降低RNAi的效果
选定的dsRNA序列应通过搜索数据库确保与其他基因无同源性
以避免对其他同源性基因表达的抑制
不同区域的dsRNA具有不同的基因沉默效果
可同时构建两个以上针对同一基因不同靶区域的dsRNA表达载体
还要充分考虑siRNA的结构特征
siRNA与mRNA的同源程度对RNAi有明显影响
启动子区或者编码区与siRNA同源的基因受siRNA抑制
但siRNA在动物细胞中对mRNA的前体没有影响
所以含非编码区序列的dsRNA不会引起RNAi
而且在构建表达载体时
经常使用U6启动子等RNA聚合酶Ⅲ能够识别的启动子序列
最后将其转入到质粒中
这里说的只是一个简单的过程
总的来说构建表达载体是个比较复杂的过程
如果要知道详细的技术
建议还是去看书吧
这里是说不清的
首先需要构建dsRNA表达载体
将这种载体导入受体细胞中后
表达产生的dsRNA在DICER酶作用下形成siRNA
引起具有相同序列的mRNA发生讲解
导致细胞或个体不能合成相应的蛋白质
所以个体会表现出功能缺失表型
构建表达载体通常选用dsRNA
需要注意的一些方面是
dsRNA序列中GC的含量要小于50%
高GC含量会降低RNAi的效果
选定的dsRNA序列应通过搜索数据库确保与其他基因无同源性
以避免对其他同源性基因表达的抑制
不同区域的dsRNA具有不同的基因沉默效果
可同时构建两个以上针对同一基因不同靶区域的dsRNA表达载体
还要充分考虑siRNA的结构特征
siRNA与mRNA的同源程度对RNAi有明显影响
启动子区或者编码区与siRNA同源的基因受siRNA抑制
但siRNA在动物细胞中对mRNA的前体没有影响
所以含非编码区序列的dsRNA不会引起RNAi
而且在构建表达载体时
经常使用U6启动子等RNA聚合酶Ⅲ能够识别的启动子序列
最后将其转入到质粒中
这里说的只是一个简单的过程
总的来说构建表达载体是个比较复杂的过程
如果要知道详细的技术
建议还是去看书吧
这里是说不清的
常用哺乳动物过表达载体质粒有哪些– 960问答123
小三爱布丁2472021-07-24
这个问题有点笼统，粗略地说，质粒有很多种，比如说克隆载体，表达载体，还有用于RNA干扰的载体等等，表达载体还能分开原核表达的，酵母表达的，昆虫细胞表达的，哺乳动物细胞表达的等等。最基本的是需要复制起点，筛选抗性基因和多克隆位点。还有些含有lacZ之类的报告基因，表达载体还需要有启动子，增强子，蛋白纯化用的tag等等。
基因表达载体是怎样进入微生物细胞内的123
夏露露HW632021-07-27
1、目的基因：是人们需要的特定基因，主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子．
2、基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
②启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，故②正确；
③终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，故③正确；
④由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，
2、基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
②启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，故②正确；
③终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，故③正确；
④由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，
腺病毒载体是什么意思?腺病毒载体疫苗的优缺点、原理、安全性...123
newton1322021-09-21
病毒载体有哪些？有什么优缺点？
双荧光素酶实验 武汉巴菲尔生物技术服务有限公司123
箲神2017-11-07
生物发光，是生物素酶
一种新型双荧光素酶报告基因表达载体的构建123
逗比2号2021-09-18
Cre转基因小鼠学术百科知网空间123
天堂狗16182017-11-07
目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础.方法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射入BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异.结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行X-gal染色,在Geo-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制.结论成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠.
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