做WB，actin内参出不来，但是曝光的时候marker能曝出来，就是条带出不来！！
2017-08-19
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铜钱草草
用户
同问。一样的条件在跑，突然间曝光变得很吃力，以为可能是一抗效价不行了，毕竟用了一个多月了，就换了新的一抗，结果依然是空白条带。楼主要是有什么发现，麻烦告知。
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波尔吉斯夜
用户我最近也出现了这类问题，楼主有什么新发现吗，感谢告知
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翠葆霓笙
用户我也是，很头疼
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cecily0000001
用户会不会是发光液太久了呢
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铜钱草草
用户cecily0000001会不会是发光液太久了呢发光液都是现配现用的，还有其他可能的原因吗？
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cecily0000001
用户用的ECL发光液？
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Dynamite115
用户cecily0000001用的ECL发光液？是的啊，每次都是现用现配。而且也买了新的。
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铜钱草草
用户cecily0000001用的ECL发光液？shi de
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cecily0000001
用户铜钱草草shi deECL也现用现配？那定影液显影液呢
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Dynamite115
用户铜钱草草同问。一样的条件在跑，突然间曝光变得很吃力，以为可能是一抗效价不行了，毕竟用了一个多月了，就换了新的一抗，结果依然是空白条带。楼主要是有什么发现，麻烦告知。你的做出来了么
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铜钱草草
用户Dynamite115你的做出来了么要看今天的曝光结果
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铜钱草草
用户cecily0000001ECL也现用现配？那定影液显影液呢显影液和定影液是啥…peroxidesolution和enhancersolution？
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cecily0000001
用户就是最后让膜上的带显到X光片上，在小黑屋用到的那两个液体呀
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Dynamite115
用户铜钱草草要看今天的曝光结果我的今天做出来，把Marker剪掉开始孵育的一抗。做出来有条带，但是很淡。跟以前比还是不太正常。
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铜钱草草
用户cecily0000001就是最后让膜上的带显到X光片上，在小黑屋用到的那两个液体呀我们是转到PVDF膜上加发光液后机器曝光的
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铜钱草草
用户Dynamite115我的今天做出来，把Marker剪掉开始孵育的一抗。做出来有条带，但是很淡。跟以前比还是不太正常。我出来了部分。同一抗体同时孵育的两个条带曝光难易程度差很多。明天在看看内参。我有点怀疑我的一抗是不是不行了。
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cecily0000001
用户有可能
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铜钱草草
用户cecily0000001有可能不过，我抗体应该是五六月份买的，-20保存，冻融了两三次吧，这么容易坏？
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cecily0000001
用户这种不好说，抗体救你一个人用吗，如果有其他人用，出问题可能性也很大
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铜钱草草
用户cecily0000001这种不好说，抗体救你一个人用吗，如果有其他人用，出问题可能性也很大只有我一个人在用
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cecily0000001
用户那除了actin，此次试验的其他抗体的带夜视这个情况吗
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铜钱草草
用户cecily0000001那除了actin，此次试验的其他抗体的带夜视这个情况吗内参和其中一个目的最近都正常了。另外两个目的我觉得可能是一抗的问题，这俩抗体一开始连条带都没有，现在慢慢出来了，就是条带不明显，背景高。当初买来刚用的时候也是条带不明显背景高，然后慢慢清晰。难道要多用几次？
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Dynamite115
用户铜钱草草内参和其中一个目的最近都正常了。另外两个目的我觉得可能是一抗的问题，这俩抗体一开始连条带都没有，现在慢慢出来了，就是条带不明显，背景高。当初买来刚用的时候也是条带不明显背景高，然后慢慢清晰。难道要多用几次你的内参是怎么出来的，换了一抗么？
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铜钱草草
用户Dynamite115你的内参是怎么出来的，换了一抗么？一抗没换，只是以前和目的蛋白放一起了，最近分开来了，然后二抗浓度调高了。
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