HCPFmiRNAisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationin
invitrodiagnosticprocedures.
Quantity:1μg
HumanChoroidPlexusFibroblastmicroRNA(HCPFmiRNA)ispreparedfromearlypassageHumanChoroidPlexusFibroblastsusingLifeTechnologies’mirVanaTMmiRNAIsolationKit.ThemicroRNAispurifiedbyorganicextractionandenrichedbyimmobilizationofRNAonglass-fiberfilters.ThemicroRNAiselutedandstoredinnuclease-freewater.MicroRNAfrom
SciencellResearchLaboratoriesisaconvenientandcosteffectivealternativetoacquiringexpensivetissues.
Specifications:
CatalogNo. | 1327 |
CountryofManufacture | UnitedStates |
ProductCode | HCPFmiRNA |
Size/Quantity | 1μg |
ProductUse | ThisProductisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationininvitrodiagnosticprocedures. |
Storage | Storeat-80�C |
ShippingInfo | Dryice. |
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(一) 实验流程(1和2为并列步骤) 1.慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,PCR(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(CDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。 2.慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构,退火后连入慢病毒干扰质粒载体 3
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上海希匹吉生物技术有限公司是单核苷酸多态性(SNP)检测服务技术服务商之一,从事单核苷酸多态性(SNP)检测服务已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业单核苷酸多态性(SNP)检测服务技术服务,您可以搜索更多相关的单核苷酸多态性(SNP)检测服务实验技术服务,以便挑选到性价比高,合适的单核苷酸多态性(SNP)检测服务产品。而生物在线将会为您在单核苷酸多态性(SNP)检测服务方面提供全方位的解决方案。
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生物素酰化探针的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。在标准的切口平移实验体系中,生物素-11-dNTP取代了dNTP,DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围,...
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上海康朗生物科技有限公司在发布的外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重组蛋白供应信息,浏览与外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重组蛋白相关的内容。
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Detection of Apoptosis in Paraffin-embedded tissues by ISEL (In Situ End Labeling)The ISEL technique identifies morphologically apparent karyorrhetic cells and
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上海研生实业有限公司所提供的大鼠5核苷酸酶ELISA试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息!
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一滴残留在裙子上的精液使得美国总统BillClinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerasechainreaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的
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p53 is a transcription factor who"s activity is regulated by phosphorylation. The function is p53 is to keep the cell from progressing through the cell cycle i
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北京德元国际科技有限公司在发布的寡核苷酸纯化试剂盒 供应信息,浏览与寡核苷酸纯化试剂盒 相关的产品或在搜索更多与寡核苷酸纯化试剂盒 相关的内容。
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小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:5-NT试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知5-NT浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将5-NT和生物素标记的抗体同时温育。小鼠5核苷酸酶ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中5-N...
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下列关于DNA连接酶的叙述.正确的是A.不能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键B.E·coliDNA连接酶只能缝合黏性末端.T4DNA连接酶黏性末端与平末端都可以...
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常见问题
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我想要定量血浆miRNA,目前用的方法就是Qiagen公司的血浆提取、逆转、SYBGreenPCR试剂盒,引物也是qiagen,目前做出来的结果不是很理想,公司不提供引物序列,只有miRbase上的参考序列,想要证明引物序列、扩增产物是否是我们想要的,有人推荐设计Tapman探针,再做PCR,对比SYBGreenPCR结果,从而来看引物特异性。我的问题是:这样对比有意义吗?我问过很多公司做tapman只合成不设计,要自己提供序列,可我只有数据库中的参考序列,如果我自己有序列了不就可以合成特异引物,为啥要用tapman探针来验证呢?求专业人士答疑解惑!谢谢
tRNA中是有氢键的。
tRNA不是一条直的单链,而是弯曲的,呈现一个三叶草的形状。在弯曲的部位,tRNA自己的碱基跟自己的碱基互补配对连起来,碱基对中存在氢键。
其他的RNA一般为单链不存在氢链,但双链的由于碱基互补配对存在氢键。
有问题要请教实验前辈!
用SiRNA抑制蛋白A的表达,SiRNA转染48小时后可观察到蛋白A表达明显下降.
现在想检测SiRNA抑制A蛋白表达后对凋亡蛋白、迁移蛋白及周期蛋白的影响,应该在SiRNA干扰后多长时间检测这些蛋白的变化?48小时?72小时?96小时?
望高手解答,我的理解是转染48小时后A蛋白表达下降,如果要观察A蛋白对以上蛋白的影响,应该在转染后超过48小时再检测这些蛋白的变化,比如72小时或96小时,不知道我的理解对不对?
先谢了!
①tRNA前体在tRNA剪切酶的作用下,切成一定在小的tRNA分子。大肠杆菌RNase P可特异剪切tRNA前体的5’旁顺序,因此,该酶被称为tRNA5’成熟酶。除了RNaseP外,tRNA前体的剪切尚需要一个3’-核酸内切酶,这可将tRNA前体3’端的一段核苷酸序列切下来。此外RNaseD是tRNA3’端成熟酶。近年来的研究表明大肠杆菌RNaseP是一种非常特殊的酶分子,它是由RNA和蛋白质组成,最近发现RNAaseP分子中的RNA部分在某些条件下,可以单独地催化tRNA前体的加工成熟,这个发现和四膜虫tRNA能自我拼接被认为是近十年来生化领域内最令人鼓舞的发现之一。说明RNA分子确具有酶的催化活性。经过剪切后的tRNA分子还要在拼接酶作用下,将成熟tRNA分子所需的片段拼起来。
②成熟的tRNA分子中有许多的稀有碱基,因此tRNA在甲基转移酶催化下,某些嘌呤生成甲基嘌呤如A→mA,G→mA。有些尿嘧啶还原为双氢尿嘧啶。尿嘧啶核苷转变不假尿嘧啶核苷。某些腺苷酸脱氨基为成为次黄嘌呤核苷酸(Ⅰ)
③3’末端加上CCA:在核苷酸转移酶作用下,3’--末端除去个别碱基后,换上tRNA分子统一的CCA-OH末端,完成tRNA分子中的氨基酸臂结构。
成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高,一些试剂由于本身毒性的影响,太低的细胞数量时毒性明显,所以会要求较高的细胞密度(汇合度),顺便说一句,看一个转染试剂的毒性,看它要求转染时的细胞密度就知道了。siRNA的转染和DNA的转染不一样,DNA的转染是过量表达,死亡一些细胞对过量表达的蛋白本身来说影响不大,但siRNA的转染,死亡的细胞所有的基因表达(包括特定目标基因)都下降,将与siRNA造成的特定目标基因的表达下降现象是一致的,将大大影响实验结果。选用低细胞毒性的转染试剂其实很重要,比如engreen的Entranster-R4000.
由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板密度较高,细胞一方面转染效果不理想,直接影响沉默效果和数据可靠性,另一方面,48小时甚至更长时间后,沉默检测最佳点时,过于密集的细胞将影响细胞状态,从而影响实验结果。
求助:
编码线虫的氨基酰tRNA
合成酶是否和编码大鼠的氨基酰tRNA合成酶的基因相同?
probe英[prəʊb]美[proʊb]
n.[医] (对伤处等的) 针探,探查; [医] 探针,取样器; 探测仪;探头;
vt.探索,调查; 用探针(或探测器等)探查,探测;
vt.盘问; (用试探性袭击等)侦察(敌情) ; 用尖物刺穿(物件); 用力使向前推进;
The more they probed into his background, the more inflamed their suspicions would become
他们越调查他的背景,疑团就越多。
最近用TaqMan探针做已知位点的SNP分型,用FAM和VIC分别标记对应探针,试验中发现纯合子中不配对的探针信号也会上升(如图一,GG型只允许FAM上升,结果VIC也上升;图三只允许VIC上升,结果FAM同时上升。。),想问一下是什么原因?怎么解决?谢谢大家!
RNAi的阴性对照不应该是空细胞,而是同样长度,不对任何基因产生敲减效应的siRNA,其序列网上可以查到,所有的siRNA合成也都有售. Non-silencing siRNA作为阴性对照,作用是检测体系的非特异性反应,其本身是对目的siRNA特异性敲减目的基因的一种。
国庆节到了,给大家整理下园子内关于siRNA转染的资料。供刚开始进行转染的科研者使用。同时附上自己转染的经验。
第一部分
siRNA理论知识
siRNA转染讨论-蚂蚁淘论坛
细胞转染小技巧-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】siRNA观念性问题-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】siRNA基因敲除-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】shRNA和siRNA的区别-蚂蚁淘论坛
回复:RNAishRNA和siRNA的区别是什么,两者分别用于什么时候?-蚂蚁淘论坛
关于这方面的理论知识去看看文献综述是个好办法。
第二部分
siRNA的设计
siRNA设计的原则-蚂蚁淘论坛
siRNA设计原则-蚂蚁淘论坛
回复:【共享】SiRNA序列的设计方法-蚂蚁淘论坛
请问siRNA和shRNA的设计有何区别?-蚂蚁淘论坛
第三部分
siRNA转染效率
FAM-siRNA转染效率检测-蚂蚁淘论坛
荧光显微镜检测细胞转染效率前是否需要换液-蚂蚁淘论坛
回复:siRNA效率-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】为何siRNA转染效果不佳-蚂蚁淘论坛
回复:用lipo3000转染结直肠癌细胞dld-1,质粒DNA浓度偏低-蚂蚁淘论坛
关于siRNA转染效率的就推荐这5个帖子吧。有反馈结果的,都基本成功的帖子。外加第5个为质粒转染。
第四部分
siRNA动物体内转染
RNAi及siRNA转染相关实验技术答疑,有问题尽管提-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】活体内的RNAi导入实验设计请教-蚂蚁淘论坛
rRNA(核糖体RNA)是核糖体的组成成分,它和蛋白质共同组成了核糖体。
tRNA(转运RNA)可以转运氨基酸。
mRNA(信使RNA)是由细胞核内的DNA转录来的,相当于蛋白质的设计图纸。
翻译的过程:核糖体附着在mRNA上,然后tRNA搬运氨基酸,运往到核糖体上,从而拼合成蛋白质。