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ZYMO RESEARCH/Quick-DNA  Miniprep Plus Kit/10 Preps/D4068
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ZYMO RESEARCH/Quick-DNA Miniprep Plus Kit/10 Preps/D4068
品牌 / 
ZYMO RESEARCH
货号 / 
D4068
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Streamlined DNA isolation from any cells, tissues, and biological fluids (Proteinase K included).
Highlights

  • Quick & Easy: Simple 20 minute procedure.
  • Highest Yield: Recover 3x more DNA.
  • Ultra-Pure: Ready for qPCR, Next-Gen Sequencing, arrays, etc.
Description

The Quick-DNA Plus Kits are the easiest DNA isolation kits for high yield total DNA extraction (e.g., genomic, mitochondrial, viral) from cell culture, solid tissue, saliva, and any biological fluid sample. Innovative reagents and Zymo-Spin Technology allow for ultra-pure and concentrated genomic DNA (> 50 kb) to be eluted in as little as 35 µl. Zymo-Spin Columns ensure no buffer retention. Purified DNA is RNA-free,removing the need for RNase A treatments and ensuring accurate quantification for applications like library preparations. Isolated DNA is suitable for immediate use in sensitive downstream applications including qPCR, DNA-seq, arrays, and methylation analysis.


Elution Volume≥ 35 µl
EquipmentWater bath or heat block (55°C), microcentrifuge, and vortex.
PurityHigh quality DNA is ready for all sensitive downstream applications such as PCR, endonuclease digestion, Southern blotting, genotyping, Next-Gen sequencing, bisulfite conversion, etc. (A260/A230≥ 2.0).
Size RangeCapable of recovering genomic and mitochondrial DNA sized fragments > 50 kb. If present, parasitic, microbial, and viral DNA will also be recovered.
WorkflowUtilize a Proteinase K Digestion and Zymo-Spin Column for effective recovery of DNA.
YieldThe DNA binding capacity of the column is 25 µg. Typically, mammalian tissues yield: 1-3 µg DNA per mg skeletal, heart, lung, and brain tissues and 3-5 µg DNA per mg liver and kidney. Human whole blood will yield 3-7 µg DNA per 100 µl blood sampled.D4068 Sample Type Table

Q1: What is the difference between the digestion buffers? Can one buffer be used for all sample types?

The BioFluid & Cell Buffer (Red) is designed to allow for rapid Proteinase K digestion with easy-to-lyse samples (e.g. mammalian cells and biological fluids).The Solid Tissue buffer (Blue) can be used for any sample type and requires a longer PK digestion time compared to using the BioFluid & Cell Buffer (Red).

Q2: What is the difference between Quick-DNA and Quick-DNA Plus kits?

The Quick-DNA is optimized for cells, soft tissues, and homogenized/digested samples using a single lysis/binding buffer. The Quick-DNA Plus kits contain an optimized Proteinase K for processing a wider variety of sample inputs, such as cells, blood, tissues, etc. The upgraded Quick-DNA Plus recovers more DNA with higher purity compared to the Quick-DNA Kits.

Q3: Can Proteinase K digestion be performed overnight in DNA/RNA Shield?

Yes, samples can be digested overnight. Make sure to follow the appendix (page 8 appendix B) for processing liquids samples in DNA/RNA Shield and incubate at room temperature.

Q4: I’m seeing some yield inconsistencies with my blood samples, what’s happening?

White blood cells, which are the major source of genomic DNA in blood, easily and quickly settles. Mix the blood sample well prior to aliquoting for purification.

Q5: Can the Quick-DNA Plus kit be used with bacterial samples?

E.coli cells are easy-to-lyse and can be processed directly with the Biological Fluids & Cells protocol. For an all-inclusive kit with any type of microbes (including tough-to-lyse), use any of Zymo Research’s Environmental Kits (e.g. Quick-DNA Fungal/Bacterial, Quick-DNA Fecal/Soil, ZymoBIOMICS DNA, etc.).

Q6: Can I use Quick-DNA Plus to clean-up previously isolated DNA?

No, the kit is designed for direct use with biological samples. For clean-up of previously isolated DNA, please use the Genomic DNA Clean & Concentrator or the DNA Clean & Concentrator kits.

Q7: What is the purpose of adding beta-mercaptoethanol? Can this step be substituted or omitted?

Beta-mercaptoethanol is a reducing agent that helps break down proteins and improves DNA recovery and purity. Addition of beta-mercaptoethanol is recommended to enhance sample lysis, but can be substituted with dithiothreitol (DTT, final concentration of 10 mM) or omitted.

Q8: Can Quick-DNA process crude lysates?

Yes, add 4 volumes of Genomic Lysis Buffer to 1 volume of crude lysate, homogenized, or digested sample (see Cell Suspensions and Proteinase K Digested Samples) and proceed with the remainder of the protocol.



This kit is easy to use and provides a high quality yield.

-M.B. (Syracuse University)

“I was very impressed with the purity of the DNA.”

-C.V. (UCLA)

“Improved yield than Bioline and Qiagen Kits.”

-F.C. (Manchester Metropolitan University)
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Cat #NameSizePrice
C1001-50Collection Tubes50 Pack$15.00
D3004-2-50g-DNA Wash Buffer50 ml$18.00
D3004-4-1DNA Elution Buffer1 ml$11.00
D3004-4-10DNA Elution Buffer10 ml$14.00
D3004-2-200g-DNA Wash Buffer200 ml$54.00
D3004-4-50DNA Elution Buffer50 ml$32.00
D3004-5-50DNA Pre-Wash Buffer50 ml$26.00
D3004-5-30DNA Pre-Wash Buffer30 ml$21.00
D3001-2-20Proteinase K w/ Storage Buffer Set20 mg$14.67
D3001-2-5Proteinase K w/ Storage Buffer Set5 mg$7.00
D4068-1-12BioFluid & Cell Buffer (Red)12 ml$24.00
D4068-1-45BioFluid & Cell Buffer (Red)45 ml$59.00
D4068-2-22Solid Tissue Buffer (Blue)22 ml$38.00
D4068-2-6Solid Tissue Buffer (Blue)6 ml$12.00
D4068-3-25Genomic Binding Buffer25 ml$28.00
D4068-3-85Genomic Binding Buffer85 ml$95.00
C1103-50Zymo-Spin IC-XM Columns50 Pack$63.00
C1104-50Zymo-Spin IIC-XLR Columns50 Pack$66.00
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DNA-Methyltransferase AssayThis protocol was written by Jean-Pierre Issa, based on Adams et al.* Kam-Wing Jair has made some useful shortcuts that work well if 查看更多>
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QPCR常见问题123
富家子弟2021-07-30

各位好,希望能得到你的建议与帮助!

从人的冰冻组织提取DNA,Nanodrop定量纯度a260/a280在1.86左右,qubit2.0定量浓度达到了100ng/ul以上,按照Thermo的建库试剂盒操作,建库完成后,利用qPCR进行文库定量,有几个文库定量值只有20pM,问题在哪呢?

我试着更换Barcode重新建库,部分文库定量居然达到了600多pM,问了技术支持,他们也没有相关经验,请问群里的大神可否遇到过?

建库试剂盒是在保质期内IONAmpliseqlibrarykit2.0,引物是2013年自己定制的panel,一直储藏在-20℃冰箱,Barcode超出保质期半年。

请教DOP-PCR和ALU-PCR在扩增BAC/PACDNA制备探针文库时的优劣,或者说都可以。
效果好的话当然是promega或者omega的,不过会贵很多 都是美国佬的东西
便宜点的就是国产的tiangen,效果会差一点点 如果是大样本的全血 用这个也凑合
axygen dna提取试剂盒有证书的,一般代理商都有证书,
这个是用于代理授权的,这个可以说是唯一辨别产品真伪的方法,
有证书的企业,销售的产品可信度比较高。
DNA提取方法的选择:全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种(比如Qiagen、Promega、Bioteke;摒弃酚氯仿手提的方法,时间长毒性大),原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号,让人不知如何去选择,但从原理和操作步骤看,基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说,离心柱(DP1801)的提取纯度高一些,但是处理量小(0.1-1ml)、得率略低;溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大(1-10ml)得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上,一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候,很多人以为进口一定比国产的好,我们觉得没有最好,只有更好!在不断的进行试验优化之后,全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术,不需要蛋白酶K消化,进口的都是要借助蛋白酶K的啊!DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间,而且提取量和稳定性更好。
哪位专家可以帮我一下,能不能给我一份详细些的关于构建基因组文库的基因组DNA的提取流程及注意事项?谢谢大家了!
另外,我准备买clonetech公司的基因组文库构建试剂盒,大家认为怎么样?有什么好的建议?

各位战友好,因实验要求需要提取人的唾液DNA,但因标本需要在临床采集,无法做到当天就提取DNA,因此天根等漱口水提DNA的试剂盒都不满足实验需求。

之前一直在用艾德莱的唾液DNA保存运输提取试剂盒,但是这段时间下来感觉提取效率太低,而且特别不稳定,经常50%以上的标本都提不出来DNA,或者浓度特别低,完全崩溃的感觉!所以想更换试剂盒或者直接提供唾液DNA的保存液。另国外的这种试剂盒太贵了,因经费问题无法承受,所以希望战友们能够推荐一家效率高些的试剂盒,小女子不胜感激!!

作为何种用途啊,还有材料的种类呢?动植物方面差别很大,我个人只了解植物、细菌、藻类、土壤DNA的提取,植物总DNA的哪里的都差不多,价格0.5-2.5元每个样品,关键在研磨和酚类、多糖的去除(抽提),细菌核基因组DNA和土壤宏基因组冻融1.5*CTAB法足以,也没有太好的盒子。volume62提到的磁珠法绝对是非常好的方法,而且十分高效,适合高通量,就是贵啊,对样品的要求也较严格。其实大多数DNA试剂盒都是基于CTAB或SDS法制作的,其优点一般是简单快速,外加药品的来源稳定(自己配药的话这方面可以考虑西格玛分装或者国药,其实真的国药的是很不错的,只是不好搞),再就是配方好了,毕竟试剂公司的研发部门也不是白饭的。
所谓基因表达,就是从DNA到mRNA再到蛋白的一个过程,基因表达水平一般是通过该基因转录的mRNA的多少来衡量的。每个基因转录产生的mRNA的量,是受到时空等多种因素调控的,个体在不同的生长发育阶段,或者不同的组织水平,基因转录出mRNA的量都是不一样的。例如,当某种植物长期生长在高盐的环境里,该植物体内与抗盐相关的基因的表达量就会增加,以适应这种高盐环境,是植物能够生存下来,这时植物抗盐相关的基因表达水平就相对高,希望我的回答能够帮你弄清这个问题,呵呵!
你说的是哪款试剂盒呢?根据样本不同,可以选择不同的试剂盒的。比如抽血液样本的QIAamp DNA Blood Mini Kit 50次目录价为1630元。如果要购买应该会给折扣。
各位战友:

样本:从沸水煮过的中药上清
目的:提取DNA并进行PCR检测

问题:
(1)这样的样本中DNA应该会大部分降解,仅有痕量保留,能否推荐一些痕量DNA提取或检测的试剂盒
(2)Qiagen的法医级别试剂盒有人用过吗?效果如何?
(3)这样的实验战友们有成功的案例吗?

非常感谢!
是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul10mM dNTP(自己配制)xuldd H2O1ulRNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5.取2ul二链产物,同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder,确定双链的大小范围。注:一链,二链的电泳图是smear,且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注:第3,第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程:1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇,混匀。2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB,混匀。3.加入spin column中,13000rpm离心1min。4.加入0.75ml buffer PE,13000rpm离心1min。5.13000rpm,再离心1min。6.将spin column放入一新的离心管中,加入50ul buffer EB,静置10min。7.13000rpm离心2min。8.加入30ul buffer EB,静置10min。9.13000rpm离心2min。10.加入1/10体积3M的NaAc,2.5倍体积无水乙醇,混匀,-20℃沉淀过夜。