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enogene/EnoGeneFec™ 2000 Transfection Reagent/1500μl/EGF2000-1500
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EnoGeneFec™ 2000 Transfection ReagentPDF
Catalog Number:
EGF2000-1500Amount:
1500μlStorage/Stability:
and stabilityEnoGeneFec™ 2000 Transfection Reagent is provided in 1μg/μL concentration. It is shipped at room temperature and is stabilized for extended storage at +4°C for one year when very tightly closed.产品介绍EnoGene新推出的EnoGeneFec™ 转染试剂以最高的转染效率、使用方便、细胞毒性小、生物可降解为设计宗旨，EnoGene的新型配方克服了常见的阳离子或脂质体转染试剂带来的细胞毒性作用，更适合做长效和瞬时转染。使用这种新的转染试剂操作方便，可用于转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等，在实际使用中获得了非常理想的效果。EnoGeneFec™ 2000是针对贴壁细胞设计的转染试剂，可用于体外转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等。对常用的贴壁细胞转染效率可达80%以上。EnoGeneFec™ 2000可以形成微小的（平均大小约100-400nm）单层脂质体，靠静电作用结合到DNA的磷酸骨架上以及带负电的细胞膜表面，并与寡核苷酸等能形成稳定的较小的纳米胶体颗粒，通过细胞"内吞作用"进入细胞，能吸收溶酶体的H+，在复合体中形成酸性环境使核酸酶失活，保护DNA免受核酸酶的降解。进入细胞后，复合体囊泡肿胀破裂，将DNA释放到细胞质中，实现基因转染。EnoGeneFec™ 2000与其他转染试剂相比无论在转染效果和实验操作上都有明显的优势，主要表现为：●转染效率很高，对大多数贴壁细胞使用效果综合评价明显高于其它常用转染试剂●细胞毒性低，需要转染较大剂量的DNA时，毒性明显低于其它常用转染试剂●操作简单，以最短的时间完成转染，转染试剂-DNA复合物的形成时间只需20min试剂盒组分组分EnoGeneFec™ 2000 Transfection ReagentEGF2000-5000.5mlEGF2000-10001mlEGF2000-15001.5ml操作步骤（以6孔板为例）转染前18-24小时使用完全培养基在6孔细胞培养板，每孔接种2ml 细胞培液（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），约为1-3×105个细胞，转染前细胞密度应达到70－90%。若使用其他的培养板或培养皿，可以参照下表中提供的孔（或皿）表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2000加量。培养板表面积(cm2/孔or皿)可容纳培养基体积（ml/孔or皿）DNA（或其他核苷酸类成分）用量（µg）EnoGeneFec™ 2000用量待加的无血清、无抗生素的培养基体积96孔0.30.1-0.20.2μg溶于 20 μl 培养基0.4-1.0 μl 溶于 20 μl培养基50μl24孔20.5(0.2-)1 μg溶于 25 μl 培养基2-5 μl 溶于 25 μl培养基0.4ml12孔41.0(0.5-)2.0 μg溶于 100 μl培养基4-10 μl 溶于 100 μl培养基0.6ml6孔102.0(1.0-)5.0 μg溶于 100 μl培养基10-25 μl 溶于 100 μl培养基0.8ml35 mm102.0(1.0-)5.0 μg溶于 100 μl培养基10-25μl 溶于 100 μl培养基0.8ml60mm205ml(3.0-)10.0μg 溶于 500 μl培养基20-50μl 溶于 500 μl培养基2.4ml10-cm6010ml(8.0-)20.0 μg 溶于 1.5ml培养基40-100μl 溶于 800μl培养基6.4ml2. 转染复合物的制备：溶液A：将5µg 质粒DNA（或其他核苷酸类成分）加入到100μl无血清、无抗生素的培养基，在1.5ml无菌EP管中混匀后，室温放置5分钟。溶液B：EnoGeneFec™ 2000在使用前请震荡混匀。将10-25µl EnoGeneFec™ 2000加入到100μl 无血清、无抗生素的培养基中，在1.5ml无菌EP管中混匀，室温放置5分钟。将溶液A加入到溶液B中，轻轻混匀，室温放置20分钟，获得约200μl转染复合物 （注：该转染复合物在室温下5小时内是稳定的）。3. 将800μl 无血清、无抗生素的培养基加入到上述的200μl转染复合物中，轻轻混匀，获得约1.0ml转染复合物溶液。4. 将培养板中的培养基弃去，将第3步获得的1.0ml转染复合物溶液加入到培养孔中覆盖细胞。5. 于5-8小时后，弃去每孔中的转染复合物溶液，加入2.0ml完全培养基（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），37℃孵育转染细胞18-24小时6. 收集细胞用于分析。如要建立稳定转染，于转染24小时后将细胞按1:10传代至新鲜培养基中（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），传代次日可以换用选择培养基。注意事项1.质粒DNA的质量使用高纯度的质粒DNA也是转染试验中的关键因素。为了保证试验的结果，建议对提取的质粒DNA的量和纯度进行检测。DNA含量(μg/mL)=50×(260 nm的读数)×稀释倍数，另外通过检测质粒DNA在260nm和280nm的OD值的比值（OD260/OD280）估计核酸的纯度，OD260/OD280=1.8说明DNA样本纯度较高。2. 转染细胞的要求细胞的传代次数是影响转染效果的重要因素，推荐使用在50代以内的细胞进行转染试验。要求在转染前24小时对细胞再次传代。3. 血清的影响。在EnoGeneFec™ 2000和DNA形成转染复合物的过程中不能添加血清。4. EnoGeneFec™ 2000的用量为了达到更高的转染效率，对于接种细胞密度在70%-90%之间的样本，可通过预试验在EnoGeneFec™ 2000（μl ）∶DNA（μg ）=1∶1 - 5∶1之间选择最佳的比例。EnoGeneFec™ 2000（μl）∶DNA（μg）的推荐比例为2∶1或5：1。对于一般细胞，2：1即可获得理想转染效果；对于较难转染的细胞，建议使用5：1。五、储存EnoGeneFec™ 2000以1 μg/μl浓度液体形式提供，保存在4℃。常温运输。保存期：一年Price:
330$Research Area:
Stem Cells Cancer Cardiovascular Cell Biology Epigenetics & Nuclear Signaling Developmental Biologys Immunology Drug Discovery Products Metabolism Neuroscience Signal Transduction
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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2021-09-16
靶向新一代测序Panel可研究不同样品中的多个基因靶点的多种变异类型，从而帮助研究者深入了解各种人类遗传疾病。然而，找出所有致病相关基因，开发出稳定高效的用于多重靶标检 查看更多
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2021-08-27
微液滴数字PCR在靶向测序建库中的应用 查看更多
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2021-08-26
上海云序生物科技有限公司在发布的目标序列靶向测序供应信息，浏览与目标序列靶向测序相关的产品或在搜索更多与目标序列靶向测序相关的内容。 查看更多
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2021-09-07
High Efficency Yeast Plasmid Rescue(by Trey Powers, Fields Lab) Grow yeast overnight.Spin down 1.5 ml of culture in microfuge tubes.DecantAdd 250 µl of Q 查看更多
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2021-09-18
北京亘辰科技有限公司在发布的ChIP-Seq 测序试剂盒 供应信息，浏览与ChIP-Seq 测序试剂盒 相关的产品或在搜索更多与ChIP-Seq 测序试剂盒 相关的内容。 查看更多
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2021-09-15
Paragon Genomics是一家位于美国硅谷的生命科技初创公司。我们致力于开发具有突破性且易于使用的超高多重PCR技术, 用于基因组分析和临床诊断市场。我们的核心技术将首先应用于下一代基因测序文库制备市场，从而实现更准确, 更快, 并且更便宜的DNA测序样品制备和个体化医疗 查看更多
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2021-08-25
上海海科生物技术有限公司在发布的ABI BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kits（测序试剂盒）供应信息，浏览与ABI BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kits（测序试剂盒）相关的产品或在搜索更多与ABI BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kits（测序试剂盒）相关的内容。 查看更多
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2021-08-23
【正品直销，售后保障】（可构建适用于Ion Torrent平台的多样品靶向测序DNA文库）VAHTS AmpSeq Adapters 1-12 for Ion Torrent是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂，产品来源于江苏南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销，售后保障】（可构建适用于Ion Torrent平台的多样品靶向测序DNA文库）VAHTS AmpSeq Adapters 1-12 for Ion Torrent试剂销售服务商之一，在南京等地方销售 查看更多
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2021-09-03
Preparation of Yeast Protein Extracts (see Clontech YPH, p12) Cracking buffer stock solution (see p54 Clontech YPH) 8M Urea; 5% w/v SDS; 40mM Tris-HCl pH6.8; 0 查看更多
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2021-09-20
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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2021-09-13
靶向药物是指干扰肿瘤各个过程的特定分子而实现抑制或阻断肿瘤进展的药物，其发挥功能的基础是正常细胞和肿瘤细胞的差异之处，这使得靶向药物的特异性强而副作用小。靶向药物是精准治疗的「先锋」其诠释了「标准化」治疗为基础的「个体化」治疗原则。而「个体化」治疗的前提条件是因为个体差异而进行的分子靶点检测。个体分子靶点检测包括：（1）个体基因突变 查看更多
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2021-09-08
Yeast Miniprepfrom Robzyk and Kassir, Nucleic Acid Res. (1992) 20:3790Materials:• 10 ml overnight culture yeast in drop out media (must be very dense) 查看更多
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商品咨询
质粒小提试剂盒使用说明书 123
a3129859992021-08-01
求助做蓝白斑筛选后小提质粒用于测序试剂盒
基因检测几个常见问题解答11页123
TMMU_NEOSUN2021-07-25
同源染色体纯合等位基因序列是否一致，如果一致的话，那么这对等位基因是否都会转录，而且转录成完全相同的...
针对白血病靶向治疗的25种分子_123
killer-dong2021-08-06
相关疾病：急性淋巴细胞白血病白血病癌症肿瘤由圣犹达儿童研究医院领导的一个国际研究小组发现了一种新的高风险急性淋巴细胞白血病（ALL）亚型的细节...
NGS建库捕获试剂盒操作手册 123
lxm19879112021-07-27
核酸纯化 一氪就够
NextSeq 500仪器特点_NextSeq 500的功能_NextSeq 500介绍仪器共...123
坐在阳光的角落2017-10-12
如题
晚期肺腺癌_靶向治疗前做的基因检测一般多久出结果123
2017-10-12
肺癌靶向药基因测序需要多长时间
【求助】Stratagene公司的Quickchange试剂盒的中文说明书 免疫学...123
三个土2021-08-03
【专题讨论】二代测序文库构建试剂盒大家用的都是啥牌子的? ...123
心灵迷雾2015-03-27
NextSeq CN500基因测序仪_设备/试剂_贝瑞基因 | 北京贝瑞和康生物...123
茜茜000832021-07-30
1．bigdye测序反应试剂盒 主要试剂是bigdye mix，内含pe专利四色荧光标记的ddntp和普通dntp，amplitaq dna polymerase fs，反应缓冲液等。
2．pgem-3zf (+) 双链dna对照模板 0.2g/l，试剂盒配套试剂。
3．m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt，3.2μmol/l，即3.2pmol/μl，试剂盒配套试剂。
4．dna测序模板 可以是pcr产物、单链dna和质粒dna等。模板浓度应调整在pcr反应时取量1μl为宜。本实验测定的质粒dna，浓度为0.2g/l，即200ng/μl。
5．引物 需根据所要测定的dna片段设计正向或反向引物，配制成3.2μmol/l，即3.2pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物，如m13(-21)引物，t7引物等。
6．灭菌去离子水或三蒸水。
7．0.2ml或和0.5ml的pcr管 盖体分离，pe公司产品。
8．3mol/l 醋酸钠(ph5.2) 称取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸馏水中，冰醋酸调ph至5.2，定容至100ml，高压灭菌后分装。
9．70%乙醇和无水乙醇。
10．naac/乙醇混合液 取37.5ml无水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混匀，室温可保存1年。
11．pop 6测序胶 abi产品。
12．模板抑制试剂(tsr) abi产品。
13．10×电泳缓冲液 abi产品。
14．abi prism 310型全自动dna测序仪。
15．2400型或9600型pcr仪。
16．台式冷冻高速离心机。
17．台式高速离心机或袖珍离心机。向左转|向右转
2．pgem-3zf (+) 双链dna对照模板 0.2g/l，试剂盒配套试剂。
3．m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt，3.2μmol/l，即3.2pmol/μl，试剂盒配套试剂。
4．dna测序模板 可以是pcr产物、单链dna和质粒dna等。模板浓度应调整在pcr反应时取量1μl为宜。本实验测定的质粒dna，浓度为0.2g/l，即200ng/μl。
5．引物 需根据所要测定的dna片段设计正向或反向引物，配制成3.2μmol/l，即3.2pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物，如m13(-21)引物，t7引物等。
6．灭菌去离子水或三蒸水。
7．0.2ml或和0.5ml的pcr管 盖体分离，pe公司产品。
8．3mol/l 醋酸钠(ph5.2) 称取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸馏水中，冰醋酸调ph至5.2，定容至100ml，高压灭菌后分装。
9．70%乙醇和无水乙醇。
10．naac/乙醇混合液 取37.5ml无水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混匀，室温可保存1年。
11．pop 6测序胶 abi产品。
12．模板抑制试剂(tsr) abi产品。
13．10×电泳缓冲液 abi产品。
14．abi prism 310型全自动dna测序仪。
15．2400型或9600型pcr仪。
16．台式冷冻高速离心机。
17．台式高速离心机或袖珍离心机。向左转|向右转
HSP60缺失线粒体(mitochondria)控制干细胞命运:HSP60抗体、线粒...123
安乐风流_02021-07-21
Sanger 测序试剂盒和试剂支持感兴趣区的 PCR 扩增、循环测序和反应纯化。 下一代测序试剂盒和试剂可用于靶选择、文库构建和模板制备。 请浏览下面的章节，了解我们每个测序平台进行样本制备的测序所需要的试剂盒及试剂的更多信息。
可以用质粒DNA抽提试剂来提取基因组DNA吗？ 纽普生物123
战神KOg02017-10-01
DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性，将植物样品冻结融解后，再使用Pipet Tip的尖端将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比，省去了液氮研磨等烦琐步骤，有利于一次性处理大量样品。而且，本制品经过了改良，热处理时间只需15分钟，使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
卵巢癌靶向新药奥拉帕利纳入CFDA优先审批公示123
dachong992021-07-31
时间：2016-7-1518:51 来源：测序中国
新药研发是场艰难、昂贵的持久战。以美国的流程为例，3-6年的时间从约5,000-10,000个化合物中海选出250个选手进入临床前研究：基于细胞水平的体外实验检测化合物的毒性、致癌性和致突变的作用，经过筛选的化合物化学改性，以提高靶向特异性、效力、化学和代谢稳定性、水溶性等药理学参数；此外，先导化合物还需在实验室内开展动物实验，对化合物在动物体内的吸收、分布、代谢和排泄进行药代动力学试验。层层筛选后，需获得监管机构的新药临床研究申请批复方可开展人体试验。
通常会有5个种子选手进入临床研究，在20-100名不等的健康志愿者和患者小样本人群中确定最大耐受剂量、药代动力学和药效学的1期，约50-60%的试验药物可进入100-500人的2期研究。接下来，约30-35%的试验药物进入1,000-5,000的大规模3期证明疗效。顺利的话，整个临床研究将耗时6-7年。临床研究完成之后需将相关数据材料交给政府部门予以审核，最终只有1个幸运儿跨过独木桥获得国家级别的批准，进入规模生产。
利用BRCA1或BRCA2作为靶点的研究也毫无疑问地经历了上述过程。FarmerH等在05年使用BRCA1或BRCA2缺陷的胚胎干细胞研究细胞的生存情况，首次证实BRCA1或BRCA2功能异常的胚胎干细胞对PARP酶抑制剂非常敏感，导致染色体不稳定、细胞周期停滞和凋亡；证实BRCA和PARP两条不同的通路合作修复DNA损伤。这意味着靶向抑制特定的DNA修复通路可能可以设计特定的肿瘤治疗靶点。同年，BryantHE等利用PARP1-/-小鼠和BRCA2缺陷的细胞株，得出与FarmerH类似的结论，一个新概念的肿瘤治疗方案由此产生。
08年，EversB等首次在BRCA2缺陷的小鼠乳腺肿瘤细胞系评估AZD2281、顺铂单药以及联合使用的协同效果，发现无论AZD2281单药还是两种药物的组合，对BRCA2缺陷型细胞显示出增效的细胞毒性。
正是在这些强烈的临床前证据下，利用DNA修复的合成致死机制，第一款靶向药物AZD2281启动了一系列临床研究，逐步夯实了奥拉帕利作为卵巢癌领域第一个口服靶向药的基石地位。
奥拉帕利临床研究一览表
多篇高影响因子文献反复验证了奥拉帕利作为第一个使用合成致死机制的口服靶向药，逐步摸索锁定有效人群、最佳治疗阶段、用药方式。2014年12月奥拉帕利迎来美国适应症，紧接着2015年2月获得欧盟适应症，亚洲地区澳门2015年9月获批。
美国适应症：奥拉帕利可单药治疗携带致病或疑似致病的胚系BRCA突变（根据FDA批准的检测方法）、经三线或更多化疗的晚期卵巢癌患者。
欧盟/澳门适应症：对含铂化疗敏感（完全缓解或部分缓解），铂敏感复发、BRCA突变的（胚系和/或体细胞）高级别上皮性卵巢癌、输卵管癌或原发性腹膜癌的成年患者，奥拉帕利可作为其维持治疗阶段的单药治疗。
其它PARP抑制剂的研发进度在今年也不断刷屏，希望为癌症患者带来新曙光。
时间：2016-7-1518:51 来源：测序中国
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