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enogene/EnoGeneFec™ 2000 Transfection Reagent/1500μl/EGF2000-1500
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EnoGeneFec™ 2000 Transfection ReagentPDF
Catalog Number:
EGF2000-1500Amount:
1500μlStorage/Stability:
and stabilityEnoGeneFec™ 2000 Transfection Reagent is provided in 1μg/μL concentration. It is shipped at room temperature and is stabilized for extended storage at +4°C for one year when very tightly closed.产品介绍EnoGene新推出的EnoGeneFec™ 转染试剂以最高的转染效率、使用方便、细胞毒性小、生物可降解为设计宗旨，EnoGene的新型配方克服了常见的阳离子或脂质体转染试剂带来的细胞毒性作用，更适合做长效和瞬时转染。使用这种新的转染试剂操作方便，可用于转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等，在实际使用中获得了非常理想的效果。EnoGeneFec™ 2000是针对贴壁细胞设计的转染试剂，可用于体外转染质粒、线性双链DNA、反义寡核苷酸及RNAi等。对常用的贴壁细胞转染效率可达80%以上。EnoGeneFec™ 2000可以形成微小的（平均大小约100-400nm）单层脂质体，靠静电作用结合到DNA的磷酸骨架上以及带负电的细胞膜表面，并与寡核苷酸等能形成稳定的较小的纳米胶体颗粒，通过细胞"内吞作用"进入细胞，能吸收溶酶体的H+，在复合体中形成酸性环境使核酸酶失活，保护DNA免受核酸酶的降解。进入细胞后，复合体囊泡肿胀破裂，将DNA释放到细胞质中，实现基因转染。EnoGeneFec™ 2000与其他转染试剂相比无论在转染效果和实验操作上都有明显的优势，主要表现为：●转染效率很高，对大多数贴壁细胞使用效果综合评价明显高于其它常用转染试剂●细胞毒性低，需要转染较大剂量的DNA时，毒性明显低于其它常用转染试剂●操作简单，以最短的时间完成转染，转染试剂-DNA复合物的形成时间只需20min试剂盒组分组分EnoGeneFec™ 2000 Transfection ReagentEGF2000-5000.5mlEGF2000-10001mlEGF2000-15001.5ml操作步骤（以6孔板为例）转染前18-24小时使用完全培养基在6孔细胞培养板，每孔接种2ml 细胞培液（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），约为1-3×105个细胞，转染前细胞密度应达到70－90%。若使用其他的培养板或培养皿，可以参照下表中提供的孔（或皿）表面积和体积相应的调整细胞接种数、EnoGeneFec™ 2000加量。培养板表面积(cm2/孔or皿)可容纳培养基体积（ml/孔or皿）DNA（或其他核苷酸类成分）用量（µg）EnoGeneFec™ 2000用量待加的无血清、无抗生素的培养基体积96孔0.30.1-0.20.2μg溶于 20 μl 培养基0.4-1.0 μl 溶于 20 μl培养基50μl24孔20.5(0.2-)1 μg溶于 25 μl 培养基2-5 μl 溶于 25 μl培养基0.4ml12孔41.0(0.5-)2.0 μg溶于 100 μl培养基4-10 μl 溶于 100 μl培养基0.6ml6孔102.0(1.0-)5.0 μg溶于 100 μl培养基10-25 μl 溶于 100 μl培养基0.8ml35 mm102.0(1.0-)5.0 μg溶于 100 μl培养基10-25μl 溶于 100 μl培养基0.8ml60mm205ml(3.0-)10.0μg 溶于 500 μl培养基20-50μl 溶于 500 μl培养基2.4ml10-cm6010ml(8.0-)20.0 μg 溶于 1.5ml培养基40-100μl 溶于 800μl培养基6.4ml2. 转染复合物的制备：溶液A：将5µg 质粒DNA（或其他核苷酸类成分）加入到100μl无血清、无抗生素的培养基，在1.5ml无菌EP管中混匀后，室温放置5分钟。溶液B：EnoGeneFec™ 2000在使用前请震荡混匀。将10-25µl EnoGeneFec™ 2000加入到100μl 无血清、无抗生素的培养基中，在1.5ml无菌EP管中混匀，室温放置5分钟。将溶液A加入到溶液B中，轻轻混匀，室温放置20分钟，获得约200μl转染复合物 （注：该转染复合物在室温下5小时内是稳定的）。3. 将800μl 无血清、无抗生素的培养基加入到上述的200μl转染复合物中，轻轻混匀，获得约1.0ml转染复合物溶液。4. 将培养板中的培养基弃去，将第3步获得的1.0ml转染复合物溶液加入到培养孔中覆盖细胞。5. 于5-8小时后，弃去每孔中的转染复合物溶液，加入2.0ml完全培养基（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），37℃孵育转染细胞18-24小时6. 收集细胞用于分析。如要建立稳定转染，于转染24小时后将细胞按1:10传代至新鲜培养基中（根据细胞培养条件，可含血清及抗生素），传代次日可以换用选择培养基。注意事项1.质粒DNA的质量使用高纯度的质粒DNA也是转染试验中的关键因素。为了保证试验的结果，建议对提取的质粒DNA的量和纯度进行检测。DNA含量(μg/mL)=50×(260 nm的读数)×稀释倍数，另外通过检测质粒DNA在260nm和280nm的OD值的比值（OD260/OD280）估计核酸的纯度，OD260/OD280=1.8说明DNA样本纯度较高。2. 转染细胞的要求细胞的传代次数是影响转染效果的重要因素，推荐使用在50代以内的细胞进行转染试验。要求在转染前24小时对细胞再次传代。3. 血清的影响。在EnoGeneFec™ 2000和DNA形成转染复合物的过程中不能添加血清。4. EnoGeneFec™ 2000的用量为了达到更高的转染效率，对于接种细胞密度在70%-90%之间的样本，可通过预试验在EnoGeneFec™ 2000（μl ）∶DNA（μg ）=1∶1 - 5∶1之间选择最佳的比例。EnoGeneFec™ 2000（μl）∶DNA（μg）的推荐比例为2∶1或5：1。对于一般细胞，2：1即可获得理想转染效果；对于较难转染的细胞，建议使用5：1。五、储存EnoGeneFec™ 2000以1 μg/μl浓度液体形式提供，保存在4℃。常温运输。保存期：一年Price:
330$Research Area:
Stem Cells Cancer Cardiovascular Cell Biology Epigenetics & Nuclear Signaling Developmental Biologys Immunology Drug Discovery Products Metabolism Neuroscience Signal Transduction
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2021-08-30
Yeast Protein Isolation "Yaffe-Schatz"David AmbergAdapted from Yaffe, M.P. and Schatz, G., PNAS, 1984, 81, 4819-4823.Grow 25mls yeast cells to 5x10E6. Sequenti 查看更多
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2021-09-10
默瑞（上海）生物科技有限公司，Leica显微系统，Merk Millipore实验室纯水超纯水仪，Roche实时定量PCR仪，Partec流式细胞仪，RPA，TwistDx 代理商，Echelon代理商，Jackson代理商,KAPA，enzymatics经销商等,莫纳生物集团企业。 查看更多
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Steve HahnLast modified Fri, Oct 16, 1998Before trying this method, try rapid protein prep which involves boiling yeast in SDS PAGE buffer1. Grow 100 ml yeast 查看更多
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2021-09-09
红荣微再（上海）生物工程技术有限公司在发布的Illumina 基因测序试剂盒，Miniseq Kit，FC-420供应信息，浏览与Illumina 基因测序试剂盒，Miniseq Kit，FC-420相关的产品或在搜索更多与Illumina 基因测序试剂盒，Miniseq Kit，FC-420相关的内容。 查看更多
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2021-09-01
Yeast Nuclear Extract (Small Scale) Hahn Lab (adapted from J. Leatherwood, Ptashne lab)last modified Mon, Aug 27, 2001Cell Growth3 liters of cells are grown in 查看更多
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2021-09-06
Pick a medium size yeast colony (~3 mm dia) and transfer to 200 ul of lysis buffer. Add an equal volume of glass beads (0.45 mm dia). Mix on vortex at top spee 查看更多
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For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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VariantPro技术是一个基于多重PCR技术，一步法实现从特异性靶向序列（区域）捕获到高均一性测序文库制备的全过程。这项迄今最简便的靶向文库制备方案，是基于两大革命性的创新技术：OmegaPrimer和RelayPCR。详情请在联川生物微信公众号上查询。... 查看更多
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2021-09-22
V3.1用于大部分应用 De novo测序 ： De Novo 测序也叫从头测序，不需要任何基因序列信息即可对某个物种进行测序。用生物信息学的分析方法对序列进行拼接、组装，从而获得该物种的基因 查看更多
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2021-08-29
Yeast RNA Miniprepgrow cells to mid-log phase (10-20 ml) (or take samples from time courses, 5-25 ml) spin cells, discard supernatant wash cells once with 1 ml 查看更多
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2021-09-12
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商品咨询
外贸企业出口防疫物资要不要经营资质?今天海关给出了明确答复! ...123
第109名2017-11-26
基因测序试点单位资格，仪器规范，试剂(盒)规范，试验流程和管理规范(也就是做检测的单位和机构要有资质)。这三方面都达成了才能保障检测的安全规范。
【专题讨论】二代测序文库构建试剂盒大家用的都是啥牌子的? ...123
心灵迷雾2015-03-27
自制试剂盒在基因突变检测中的应用123
2017-10-02
基于靶向药指征的肿瘤基因检测、二代和三代基因测序的应用。
你说的Arms法基因检测和EGFR,Kras基因检测有什么区别啊?是测序方法不...123
32167_lj2021-07-26
肺癌患者，想做一下基因检测，好知道用什么靶向治疗药物。另求告知一稳妥可信检测机构。谢谢
求助16S rDNA测序结果分析 分子生物 PCR相关 论坛...123
crystalsmile2021-08-04
【测序中hidi的作用是什么?试剂的化学本质是什么?】123
诅咒哥2452021-07-22
BigDye Terminator v3.1简称BDT，是ABI公司的测序专用kit，成分包含了taq酶，标记了大荧光染料的ddNTP等，是类似PCR扩增试剂的Mix，进行的是线性扩增得到碱基的排序。
可以用质粒DNA抽提试剂来提取基因组DNA吗？ 纽普生物123
战神KOg02017-10-01
DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性，将植物样品冻结融解后，再使用Pipet Tip的尖端将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比，省去了液氮研磨等烦琐步骤，有利于一次性处理大量样品。而且，本制品经过了改良，热处理时间只需15分钟，使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
针对白血病靶向治疗的25种分子_123
killer-dong2021-08-06
相关疾病：急性淋巴细胞白血病白血病癌症肿瘤由圣犹达儿童研究医院领导的一个国际研究小组发现了一种新的高风险急性淋巴细胞白血病（ALL）亚型的细节...
【求助】基因测序试剂盒哪个好用 核酸基因技术讨论版论坛123
13vs42021-07-29
各位师兄师姐，可否介绍一下国内做基因测序和分析的哪些学校和老师比较牛。还有想问一下基因测序结束后需要和可以做哪些工作。哪些公司试剂盒比较好用…………
NextSeq 500仪器特点_NextSeq 500的功能_NextSeq 500介绍仪器共...123
坐在阳光的角落2017-10-12
如题
【求助】Stratagene公司的Quickchange试剂盒的中文说明书 免疫学...123
三个土2021-08-03
试剂盒提DNA的原理123
孙叔▲豆司312021-07-24
碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法，其原理为：染色体DNA比质粒DNA分子大得多，且染色体DNA为线状分子，而质粒DNA为共价闭合环状分子；当用碱处理DNA溶液时，线状染色体DNA容易发生变性，共价闭环的质粒DNA在回到中性时即恢复其天然构象；变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀，而复性的超螺旋质粒DNA分子则以溶解状态存在液相中，离心去除沉淀后，就可从上清中回收质粒DNA。
目前，市面上质粒提取试剂盒大多数都是采取上述的碱裂解方法，不同之处在于纯化方式。目前比较常用的纯化系统是硅基质吸附材料，其原理为在高盐环境下质粒DNA能够结合到硅基质上，然后用低盐缓冲液或水将质粒DNA从硅基质上洗脱下来。得到的质粒可以用于酶切、PCR、测序、细菌转化、转染等分子生物学实验。
目前，市面上质粒提取试剂盒大多数都是采取上述的碱裂解方法，不同之处在于纯化方式。目前比较常用的纯化系统是硅基质吸附材料，其原理为在高盐环境下质粒DNA能够结合到硅基质上，然后用低盐缓冲液或水将质粒DNA从硅基质上洗脱下来。得到的质粒可以用于酶切、PCR、测序、细菌转化、转染等分子生物学实验。
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