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Clontech/High-throughput, nanoliter-scale, real-time PCR for gene expression or genotyping/Each/640022
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Clontech/High-throughput, nanoliter-scale, real-time PCR for gene expression or genotyping/Each/640022
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Clontech
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SmartChip Real-Time PCR System

The SmartChip Real-Time PCR System is a complete system that enables high-throughput, high-density, real-time PCR for gene expression or single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping analyses. The system includes the SmartChip MultiSample NanoDispenser (MSND) and the SmartChip Real-Time PCR Cycler. Used in conjunction with the SmartChip MyDesign Kit, the system can increase your throughput levels and save reagents and your precious samples without compromising data quality.

The SmartChip Real-Time PCR System is a complete system that enables high-throughput, high-density, real-time PCR for gene expression or single nucleotide polymorphism (SNP) genotyping analyses. The system includes the SmartChip MultiSample NanoDispenser (MSND) and the SmartChip Real-Time PCR Cycler. Used in conjunction with the SmartChip MyDesign Kit, the system can increase your throughput levels and save reagents and your precious samples without compromising data quality.

The SmartChip MSND is a high-precision, nanoliter-volume liquid handling system customized with a chip cooling station and an enclosed humidification environment for delivering multiple samples onto custom target sets. In just over two hours, the SmartChip cycler can process 5,184 reactions in parallel from a single chip. With flexible formats for both gene expression and genotyping, the SmartChip Real-Time PCR System system offers the largest available breadth of sample and assay configurations for nanoscale qPCR platforms.

Gene expression analyses can be performed using dye- or probe-based methods, depending on your research needs. Common SNP genotyping protocols making use of FAM and VIC dyes are optimized to meet your high-throughput needs in a cost-effective manner.

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肿瘤基因,人体细胞内有原癌基因和抑癌基因,当这两种基因因为一些条件变异后,会产生癌症。肿瘤是癌症的表现形式之一。基因疗法定点清除癌细胞从本质上来讲,癌症是一种基因病,其发生、发展与复发均与基因的变异、缺失、畸形相关。... 查看更多>
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各位老师:
我做RNA干扰实验,采用方案是shRNA表达质粒,我的问题就是质粒转染细胞后,是否需要将转染的细胞进行单克隆啊,如果说要单克隆化的话只是筛选就得化很长时间啊,望高手帮助啊?急啊
基因突变和基因变异的区别123
兮兮光砐1h2017-10-02
基突变
gene mutation
由于DNA发碱基增添、缺失或改变,引起基结构改变,叫做基突变.
1基内部遗传结构改变 .称点突变,通引起定表型变化 .广义突变包括染色体畸变.狭义突变专指点突变.实际畸变点突变界限并明确,特别微细畸变更.野型基通突变突变型基.突变型词既指突变基,指具突变基体.
基突变通发DNA复制期,即细胞裂间期,包括丝裂间期减数裂间期;同基突变脱氧核糖核酸复制、DNA损伤修复、癌变衰都关系,基突变物进化重要素,所研究基突变除本身理论意义外广泛物意义.基突变遗传研究提供突变型,育种工作提供素材,所科研究产实际意义.
基变异 基变异指基组DNA发突遗传变异.水平看,基变异指基结构发碱基组或排列顺序改变.基虽十稳定,能细胞裂精确复制自,种隐定性相.
定条件基原存形式突改变另种新存形式,位点,突现新基,代替原基,基叫做变异基.于代表现突现祖先未新性状.
克隆英文 clone音译,简单讲种工诱导性繁殖式.克隆与性繁殖同.性繁殖指经雌雄两性殖细胞结合、由物体产代殖式,见孢殖、芽殖裂殖.由植物根、茎、叶等经压条、扦插或嫁接等式产新体叫性繁殖.绵羊、猴牛等物没工操作能进行性繁殖.科家工遗传操作、植物繁殖程叫克隆,门物技术叫克隆技术.
克隆技术设想由德胚胎家于1938首提 ,1952,科家首先用青蛙展克隆实验,断利用各种物进行克隆技术研究.由于该项技术几乎没取进展,研究工作80代初期度进入低谷. ,用哺乳物胚胎细胞进行克隆取功. 19967月5,英科家伊恩·维尔穆特博士用羊体细胞克隆产羊,给克隆技术研究带重突破,突破往能用胚胎细胞进行物克隆技术难 关,首实现用体细胞进行物克隆目标,实现更高意义物复制.研究克隆技术目标找更办改变家畜基构,培育群能够消费者提供能需要更食品或任何化物质物.
克隆基本程先含遗传物质供体细胞核移 植除细胞核卵细胞,利用微电流刺激等使两者融合体,促使新细胞裂繁殖发育胚胎,胚胎发育定程度(罗斯林研究所克隆羊采用间约 6)再植入物宫使物怀孕使产与提供细胞 者基相同物.程供体细胞进行基改造,性繁殖物代基发相同变化.培育功三代克隆鼠火奴鲁鲁技术与克隆利羊技术主要区别于克隆程遗传物质经培养液培养,直接用物理注入卵细胞.程采用化刺激代替电刺激重新卵细胞进行控制.19987月 5,本石川县畜产综合与近畿畜产研究室科家宣布,利用物体细胞克隆两牛犊诞.两克隆牛诞表明克隆物技术重复.
苏格兰罗斯林研究所1996利用克隆技术克隆羊利,立即誉本世纪重争论科技突破.突破带处显易见. 利用技术抢救珍奇濒危物、复制优良家畜体、 扩良种物群体、提高畜群遗传素质产性能、提供足量试验物、推进转基物研究、攻克遗传性疾病、研制 高水平新药、产供移植内脏器官等研究发挥作用.
肯定种技术面作用同,更程度表示种技术担忧,侨衔?绻?褂貌坏保?庵旨际蹩赡芏陨?肪巢?て诘牟涣加跋欤?恍┛蒲Ъ胰衔? 畜牧业量推广种性繁殖技术,能破坏态平衡,导致些疾病规模传播;其应用类自身繁殖,产巨伦理危机.
克隆羊莉身份披露,美俄勒冈科家证实于19968月已经利用克隆胚胎培育猴;传说,比利医已意克隆男孩.尽管比利科家否认克隆报道,各政府克隆技术律 伦理面能造影响非重视,美、德、、英、加 等纷纷立专家组研究问题,科家要求 领域研究加限制.世界卫组织总干事岛宏欧盟委员负责科研委员19973月11别发表声明 谈,表示反进行体克隆试验.目前各项技术较致看制定律加强种技术管理,并严禁用复制类.克隆羊利英科家维尔穆特说, 用克隆利种技术效率极低,功克隆利前该技术曾导致先缺损物.种技术用于类 非道.
政府十重视克隆技术及其提相关问题,家科委农业部等部门已召各面专家参加研讨、 座谈,并关问题达共识.专家认,物克隆技术功科研究重事件,既益面, 利能,必须采取措施加规范,严格控制住害面,使项技术造福于类.
199711月11,联合教科文组织第29届 巴黎通项题《世界类基组与权宣言》文件,明确反用克隆技术繁殖.文件指,应利用物、遗传医类基组研究面,, 咱研究必须维护改善公众健康状况目,违背 尊严作,用克隆技术繁殖作,能允许.
19981月12,欧洲19家巴黎签署项严格禁止克隆协议(european protocol on banning human cloning).际第禁止克隆 律文件,《欧洲物医条约》补充.项禁止克 隆协议规定,禁止各签约研究机构或使用任何技术创造与或死基相似,否则予重罚.违反协议研究员医禁止事研究行医,关研究 所或医院执照吊销.签约研究机构或欧洲外区进行类追究律责任.协议签字家、丹麦、立陶宛、芬兰、希腊、尔兰、意 利、拉脱维亚、卢森堡、摩尔瓦、挪威、葡萄牙、罗马尼 亚、斯洛文尼亚、西班牙、瑞典、马其顿、土耳其圣马力诺.
克隆技术发展
克隆,Clone译音,意性繁殖,克隆技术即性繁殖技术.前久报道英罗斯林研究所试验功克隆羊利,首利用体细胞克隆功,物工程史揭新页.
克隆技术已经历三发展期:
第期微物克隆,即由细菌复制千万模细菌变细菌群.
第二期物技术克隆,DNA克隆.
第三期物克隆,即由细胞克隆物.
自界,少植物具先克隆本能,番薯、马铃薯、玫瑰等插枝繁殖植物.物克隆技术,则经历由胚胎细胞体细胞发展程.早本世纪50代,美科家两栖物鱼类作研究象,首创细胞核移植技术,研究细胞发育化潜能问题,细胞质细胞核相互作用问题.1986英科家魏拉德森首胚胎细胞利用细胞核移植克隆羊,相继克隆牛、羊、鼠、兔、猴等物.我克隆技术颇,80代末,我克隆兔,1991西北农业发育研究所与江苏农院克隆羊功,1993科院发育物研究所与扬州农院共同克隆批山羊,1995华南师广西农合作克隆牛,接着农科院畜牧研究所于1996克隆牛获功.美近克隆猴取功,本科家声称繁殖200克隆牛.所述克隆物,都用胚胎细胞作供体细胞进行细胞核移植获功.
19972月英罗斯林研究所宣布克隆功羊利,用乳腺皮细胞作供体细胞进行细胞核移植,翻物克隆史崭新页,突破利用胚胎细胞进行核移植传统式,使克隆技术足进展.整克隆程:科家选取三母羊,先母羊卵细胞所遗传物质吸,另6岁母羊乳腺细胞与融合,形含新遗传物质卵细胞,并促使裂发育胚胎,胚胎定程度再植入第三母羊宫,由孕育并产克隆羊利.利酷像提供乳腺细胞6岁母羊. 羊利世界第利用体细胞克隆功物.克隆利功,理论说明高度化细胞,经定手段处理,复受精卵期合功能;说明发育程,细胞质异源细胞核发育调控作用.物遗传疾病治疗、优良品种培育扩群等提供重要途径,物种优化、濒危物种质保存,转基物扩群均定作用. 自克隆羊利功,世界各引起强烈反响,看作福音,则视祸水,笔者新技术应采取支持态度,物克隆取突破,处培养量品质优良家畜,丰富物质,使畜牧业本降低,效率提高,提供某些药物原料提高类免疫功能等等.羊利前,罗斯林研究所曾培育奶含治疗血友病药物原料转基羊,家公司50万英镑高价买.利用体细胞批复制羊,挽救更患者命.另外,利用克隆技术量复制珍稀物,挽救濒危物种,调节自态平衡,类造福,何忧患呢?,克隆技术能带负面影响,些克隆物遗传全等,种特定病毒或其疾病染,带灾难,计划克隆物,扰乱物种进化规律,干扰性别比例,种物界控制带许意想危害.要采取相应研究策,制订科克隆计划,种负效应避免.
至于克隆,没意义研究课题,代物史证明,克隆技术能复制外貌特征相同物,能克隆复制者原才能.思想才能受制约.所,即使能克隆酷似历史伟领袖、伟科家物,仅外貌相同,却缺乏伟领袖、伟科家思想、气质、才能,试问克隆具意义?至于主张克隆取体器官,用于医体器官移植,行.克隆首先公民,享权,克隆肯捐赠器官,发明者能侵犯权. 至于克隆,现实,克隆要存,首先要吃饭,要思维,没颅能,我总能培植植物吧?且,重要克隆符合世情情,今世界口急剧膨胀,少家已实行计划育,控制口增,种情况拆巨资做违背社发展规律事呢?德研究技术部吕特格斯所说:复制类允许,定发. 目前,克隆技术英新进展,技术应用于类造血事业.英PPL公司克隆技术经济台,主管罗思詹姆斯博士说:研究利我知道,我用细胞制造转基物.我现利用技术产类血液重要组部,血浆.与罗斯林研究所合作研究种带类基牛羊.先物体内血浆取,再取代类血浆,种改变基牛羊体内含类血浆重要,通些物饲养、再克隆或繁殖,稳定靠且相便宜血资源,据统计英每价值达150英镑.谓效益匪浅. 克隆技术前景估量.
1) 克隆减少遗传变异通克隆产体具同遗传基同疾病敏性种疾病毁灭整由克隆产群体 设想家牛群都同克隆产物种并严重病毒能毁灭全畜牧业
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体按自规律促进整种群优胜劣汰意义说克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术需要量金钱物专业士参与失败率非高莉277实验唯虽现发展更先进技术功率能达2-3%
4) 转基物提高疾病传染风险例产药物牛奶牛染病毒种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作伦理家所能接受
6) 克隆技术用创造超或拥健壮体格却智力低且克隆技术能够类效运用男性失遗传意义
7) 克隆技术家庭关系带影响巨由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟延迟几十已难设想发现自另外完全复制品(或)受

据统计,每年大约有600万人死于吸烟。多年来的研究也证实吸烟至少会增强17种癌症的风险。但是,科学界至今仍不清楚吸烟引发癌症的机制。

近日,《Science》的一篇文章显示,吸烟会使得直接和间接接触烟草的细胞发生突变,并提高发生癌变的风险。

研究人员调查分析了多个国家的17种癌症患者共约5243人的资料(2490位吸烟患者和1063位不抽烟患者)。发现有些基因的DNA会因为直接接触烟草烟雾而受到损伤。例如,烟草中致癌物——苯并芘化合物会诱导DNA的损伤和复制错误。还有一些基因会像时钟一样有规律的触发突变,而吸烟会加速这个“时钟”从而加速细胞内的突变。此外,研究人员通过计算显示,每天抽一盒烟的人,一年内会引起与肺癌、喉头癌、口腔癌相关基因的突变数量平均分别为150个、97个、23个。

基因突变常会被机体自然修复,使得突变不会大量累积,如果基因突变累积过多,则可能导致细胞癌变。由于吸烟容易引发大量基因的突变,因此,其致癌机制极其复杂。该研究结果再次证明戒烟对于预防各种癌症的重要性。

【文章来源】微信号:MedicalResearch

本人最近在对家族性遗传性高钙血症(FHH)的家族进行了多个可疑致病基因进行测序,测序公司已经给出了DNA的测序峰图及突变位点,但不知道这个突变是否是致病突变?还有如何才能知道该突变是否影响了氨基酸序列呢?本人在这方面零基础,麻烦稍微讲详细点,在这里先谢谢各位哥哥姐姐了,不胜感激!!!

用带GFP的干扰质粒转染细胞,转染后24小时看荧光,转染效约30%左右,然后消化铺板,铺板后30小时的样子加G418筛选,筛选到第5天看,可看到散在发荧光的细胞,但等到14天筛选完毕,克隆已形成,细胞看不到一点荧光,是怎么回事啊?我筛选出来的是不是真正的阳性克隆啊?请有经验的高手解答,多谢!
基因组DNA分子发生的突然的、可遗传的变异现象(gene mutation)。从分子水平上看,基因突变是指基因在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变。基因虽然十分稳定,能在细胞分裂时精确地复制自己,但这种稳定性是相对的。在一定的条件下基因也可以从原来的存在形式突然改变成另一种新的存在形式,就是在一个位点上,突然出现了一个新基因,代替了原有基因,这个基因叫做突变基因。于是后代的表现中也就突然地出现祖先从未有的新性状。
基因突变是生物进化的重要因素之一,所以研究基因突变除了本身的理论意义以外还有广泛的生物学意义。基因突变为遗传学研究提供突变型,为育种工作提供素材,所以它还有科学研究和生产上的实际意义。
但是一般基因突变会产生不利的影响,被淘汰或是死亡,但有极少数会使物种增强适应性。有害的多,有利的少。
对人来说,基因突变可能导致癌症。
肺癌见肺原发性恶性肿瘤
靶向药物目前先进用于治疗癌症药物靶向药物针肿瘤细胞特基发能够高度特异性识别杀灭肿瘤细胞具效、副作用较特点尤其适合体质较差肺癌患者
靶向治疗肺癌治疗前需要做基突变检查根据基情况决定否适合该种治疗肺癌基突变检查目前主要针
EGFR、KRASALK等靶标明确肿瘤药物敏性检查结助于相应靶向治疗药物选择药效异
基突变检查结阴性患者适合采用靶向治疗说明肺癌由基突变造能外界原所致辐射、防腐剂、免疫力低等等
基突变检查阴性肺癌患者没服用易瑞沙特罗凯必要且易瑞沙特罗凯目前际公认针非细胞性肺癌靶向药物没同类药物替代种情况应酌情考虑化疗
【求助】关于RNAi的载体问题123
天籁无声602021-07-23
看了好多国内的文章,发现构建小干扰RNA载体时首先需要将特异性干扰RNA片断克隆入T载体,然后再亚克隆入表达载体。这样做的目的是什么呢?
大家好,最近做实验遇到了很棘手的问题:
克隆一个基因,构建好过表达质粒载体,稳定转染细胞,g418筛选稳定克隆,让其在细胞系中过表达,但westernblot显示大部分克隆基因的表达量下降,没有挑出稳定过表达的克隆;
接着做shRNA干扰,交给公司合成了四种shrna质粒,也是打算进行稳定转染,g418筛选,但先做了个瞬时转染预实验,转染换液后48小时收蛋白,westernblot鉴定,发现实验组都比对照高。
请问,有没有大神遇到过这种情况,如果有,可能的原因是什么,有没有解决的方法,有没有相关的文献支持?
谢谢,不胜感激!
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