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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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2021-08-20
不一样的无缝克隆，仅需三步即可完成基因克隆！，Lucigen提供全新、高效快速的基因克隆方法，无需DNA纯化以及连接酶、重组酶的作用，只需三步即可完成 查看更多
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中美泰和生物技术（北京）有限公司在发布的市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）供应信息，浏览与市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）相关的产品或在搜索更多与市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）相关的内容。 查看更多
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2019-07-23
经双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。置换型载体（如 λ2001、λDASH、EMBL 系列、Charon 3... 查看更多
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2021-08-10
毒品检测试剂盒，即为毒品快速检测试纸（试剂）盒装规格。适用范围：公安部门、禁毒机构对可疑人群的筛查； 征兵、入学体检；戒毒机构治疗监控，医疗卫生防疫部门的普查、筛查、体检等。... 查看更多
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2019-05-16
服务名称：Subclon Vector Construction Services 查看更多
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2021-08-11
克隆载体pUC18是由深圳市宝珠生物科技有限公司代理或销售的Promega品牌的试剂，产品来源于美国。深圳市宝珠生物科技有限公司是中国最权威的克隆载体pUC18试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售克隆载体pUC18试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业克隆载体pUC18仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的克隆载体pUC18产品 查看更多
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2019-04-02
零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Yeasen品牌的试剂，产品来源于Yeasen。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的零背景TOPO-TA克隆试剂盒（ 查看更多
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2021-08-30
货号：M10101-0005-2 查看更多
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2020-08-26
Fasta一步法克隆试剂盒是由北京赛百盛基因技术有限公司代理或销售的sbs品牌的试剂，产品来源于beijing。北京赛百盛基因技术有限公司是中国最权威的Fasta一步法克隆试剂盒试剂销售服务商之一，在北京等地方销售Fasta一步法克隆试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业Fasta一步法克隆试剂盒仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的Fasta一步法克隆试剂盒产品 查看更多
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2021-09-23
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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2018-12-26
Peter Novick Lab, Department of Cell Biology Yale University School of Medicine HOW TO PERFORM AN INTERRUPT OF ANONGOING AUTOCOUNT1). This program interrupts t 查看更多
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2019-04-04
北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)在发布的人 Fractalkine/CX3CL1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)供应信息，浏览与人 Fractalkine/CX3CL1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的产品或在搜索更多与人 Fractalkine/CX3CL1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的内容。 查看更多
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我们班要举行辩论比赛,主题是:克隆人的出现是利大于弊还是弊大于利...123
2021-08-08
我们班举行一个辩论赛、关于“克隆”这一标题来描述、我要的是“利大于弊”。。。请各位帮我找找克隆利大于弊的资料。。。谢谢了
【求助】关于中期染色体FISH探针的长度问题,恳请有相关经验的同行...123
恋南国花锦2021-08-16
我实验当中要用到荧光探针来定位某条中期染色体，这个探针是这个染色体上的特定单拷贝序列，如果我自己要设计探针找公司合成的话，请问下大家这个探针的长度至少要多长？（采用间接标记的方法）望大家不吝赐教，谢谢！
关于克隆技术弊大于利的辩论稿_1123
飞翔百合香2021-09-16
克隆世界先进技术否认克隆能给我带处我觉克隆能带给我处并朝觉自否自自否别取替否相信自身边类技术福祸线差
我认克隆程度促进类科技文化发展同我应该看克隆仍存许弊端克隆能类作贡献能效繁殖高附加值牲畜挽救珍稀物研究癌物研究免疫研究寿命低估作用类欲望并容易满足克隆物功类自想克隆目前看克隆并利于类发展相反克隆所引起诸基变种等问题都应该引起类重视
想要克隆克隆研制没潜未比说克隆否健全安全远看给我整类物种安全没危害我现清楚克隆理意义全部健全社意义健全没传统意义父亲没传统意义母亲异类异类社相处候给理反环境点
类独二事情拼搏克隆世界独二
要良份总统克隆真杀乱克隆类克隆认识够充足所损益东西复制要考虑问题比：原体办克隆品所看待位……
我同意克隆发展讨论位克隆能否诞或残品刻我暂让问题与科脱钩面情与伦理我姑且判定克隆与异或何度自平凡
或父母谁或父母呢谁抚养呢谁谁投注真诚情克隆命比球任何命都要值钱所科家都竭尽全力挽救命理家任何情绪异趋若鹜至于恐惧孤独注定能享谁嫁哪异性发自内整摆布实验品肯定些借机扬名作秀或者由科家做主克隆双配婚姻先具备实验性质于于克隆说情比母更没保证
难发现克隆作除拥掉定语称谓外切与社、伦理、情关享受都与缘
1． 克隆研究风险性
目前物体细胞克隆技术存着难预测消除技术风险已经伦理层面反克隆重要科依据 克隆存着较风险性 论科家普通公众始终都物克隆技术发展现况类比克隆研究发展前景并作进步推论逻辑基础即目前物克隆实验仍处于初始阶段克隆技术熟物克隆实验现高失败率、高风险、使用量重组卵细胞、量畸形代及发排斥现象等问题现克隆研究仅仅通某项物克隆功案判断克隆技术普遍行性错误至少严谨科家认要物（绵羊）克隆实验技术经验应用类体身并非件容易事情种熟技术硬要作用于体克隆程充满各式各危险例英胚胎家威尔莫特认理由考虑由扎沃斯安蒂诺等宣布克隆实验同高失败率试图进行物克隆并且现或者预见未没行技术检查物胚胎所基组发育状态保证植入宫内胚胎否能够发育至于畸形或使代孕母体安全受严重威胁
另外海召2002际类基组科院副院陈竺院士指早站反克隆培育克隆羊英科家专家清楚目前技术离克隆远……克隆羊莉功经历277克隆羊实验失败波折怪胎、畸形层穷幕克隆重演谁277条命夭折负责克隆物发现存早衰现象尚解释顾切匆忙进行克隆能酿错陈竺院士言论看物克隆情况类比未克隆情况外科家反复莉羊情况观照克隆技术发展说明领域没更经验证据说明问题实质技术风险
2．克隆行违背社伦理
于自社克隆行伦理层面指责科界能于衷受影响科家发表类似观点世界医协主席恩克•阿科尔西20018月8发表声明指克隆技术用于类自悖于类价值、伦理道德原则代表世界医协坚决反克隆实验计划〔5〕另外角度威尔莫特媒体说：试想我妻与我复制‘我’三起产极寻关系我三每尤其复制‘我’都十尴尬必须坚决反克隆
科家伦理家、社家家能伦理、社等层面克隆问题展系统、溯根求源式理析作现实社员克隆问题必着与其社员相似觉科界社伦理层面反克隆研究
3．克隆行违背科道德
（1）科道德与科技工作者社职责
道德属于种社意识定社条件调整间行规范准则总恩格斯曾经指：每阶段甚至每行业都各各道德〔7〕我知道古希波克拉底誓言（the Hippocratic Oath）作医师团体职业誓约书要求业者：应尽自知识与能力医治病越医疗行并坚守品性与道德规范科技术研究、发应用程同要求遵守定道德原则
2． 现代科技术社功能越越强社渗透越越广泛越能引起更社、伦理律等问题科技工作者社责任比前显更加突重要科科、科考虑效用或利益 等说已经合宜科技工作者必须应该追求何种知识、所追求知识应置于何种位及何应用些知识等系列问题做理性析判断些问题早引起科界重视19557月15包括玻恩、海森堡居夫内52位诺贝尔奖获者《迈瑙宣言》针科技术社价值反思说：我愉快贡献我切科服务我相信科通向类幸福路我怀着惊恐情看：科向类提供自杀手段
再克隆技术能失败科研究者公认物克隆实验看克隆物种率低利羊克隆实验277胚胎融合仅仅莉功率0.36%许幸降克隆牛快死于脏异、尿毒症或呼吸困难克隆物部体表现理或免疫缺陷血液含氧量浓度低于；胸腺、脾、淋巴腺发育等
现许科研究者已经始克隆类进行克隆技术种失败能性放任失败克隆伤害克隆失败怪婴诞看幕幕让寒类克隆罪证命践踏毫疑问研究犯罪任何理性支持项杀主要代价研究更怕种研究结给类带更犯罪灾难种让类走向灭亡技术进步
1） 克隆减少遗传变异通克隆产体具同遗传基同疾病敏性种疾病毁灭整由克隆产群体
克隆物遗传全等种特定病毒或其疾病染带灾难 设想家牛群都同克隆产物种并严重病毒能毁灭全畜牧业
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体按自规律促进整种群优胜劣汰意义说克隆技术干扰自进化程.
克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利
3) 克隆技术种昂贵技术需要量金钱物专业士参与失败率非高莉277实验唯虽现发展更先进技术功率能达2-3%
失败率高达95%至98%其途夭折胚胎畸形导致短命事实世界各牛、羊、猪鼠克隆实验平均功率2%,2%解决克隆物早衰现象
克隆源物细胞必定带已经化基些基影响克隆物寿命呢种担已经证实论克隆羊利培育克隆物都同程度表现早衰特征说明物细胞遗传物质同殖细胞遗传物质毕竟存质量差别
4) 转基物提高疾病传染风险例产药物牛奶牛染病毒种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作伦理家所能接受
6) 克隆技术用创造超或拥健壮体格却智力低且克隆技术能够类效运用男性失遗传意义
我认克隆程度促进类科技文化发展同我应该看克隆仍存许弊端克隆能类作贡献能效繁殖高附加值牲畜挽救珍稀物研究癌物研究免疫研究寿命低估作用类欲望并容易满足克隆物功类自想克隆目前看克隆并利于类发展相反克隆所引起诸基变种等问题都应该引起类重视
想要克隆克隆研制没潜未比说克隆否健全安全远看给我整类物种安全没危害我现清楚克隆理意义全部健全社意义健全没传统意义父亲没传统意义母亲异类异类社相处候给理反环境点
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我同意克隆发展讨论位克隆能否诞或残品刻我暂让问题与科脱钩面情与伦理我姑且判定克隆与异或何度自平凡
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难发现克隆作除拥掉定语称谓外切与社、伦理、情关享受都与缘
1． 克隆研究风险性
目前物体细胞克隆技术存着难预测消除技术风险已经伦理层面反克隆重要科依据 克隆存着较风险性 论科家普通公众始终都物克隆技术发展现况类比克隆研究发展前景并作进步推论逻辑基础即目前物克隆实验仍处于初始阶段克隆技术熟物克隆实验现高失败率、高风险、使用量重组卵细胞、量畸形代及发排斥现象等问题现克隆研究仅仅通某项物克隆功案判断克隆技术普遍行性错误至少严谨科家认要物（绵羊）克隆实验技术经验应用类体身并非件容易事情种熟技术硬要作用于体克隆程充满各式各危险例英胚胎家威尔莫特认理由考虑由扎沃斯安蒂诺等宣布克隆实验同高失败率试图进行物克隆并且现或者预见未没行技术检查物胚胎所基组发育状态保证植入宫内胚胎否能够发育至于畸形或使代孕母体安全受严重威胁
另外海召2002际类基组科院副院陈竺院士指早站反克隆培育克隆羊英科家专家清楚目前技术离克隆远……克隆羊莉功经历277克隆羊实验失败波折怪胎、畸形层穷幕克隆重演谁277条命夭折负责克隆物发现存早衰现象尚解释顾切匆忙进行克隆能酿错陈竺院士言论看物克隆情况类比未克隆情况外科家反复莉羊情况观照克隆技术发展说明领域没更经验证据说明问题实质技术风险
2．克隆行违背社伦理
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科家伦理家、社家家能伦理、社等层面克隆问题展系统、溯根求源式理析作现实社员克隆问题必着与其社员相似觉科界社伦理层面反克隆研究
3．克隆行违背科道德
（1）科道德与科技工作者社职责
道德属于种社意识定社条件调整间行规范准则总恩格斯曾经指：每阶段甚至每行业都各各道德〔7〕我知道古希波克拉底誓言（the Hippocratic Oath）作医师团体职业誓约书要求业者：应尽自知识与能力医治病越医疗行并坚守品性与道德规范科技术研究、发应用程同要求遵守定道德原则
2． 现代科技术社功能越越强社渗透越越广泛越能引起更社、伦理律等问题科技工作者社责任比前显更加突重要科科、科考虑效用或利益 等说已经合宜科技工作者必须应该追求何种知识、所追求知识应置于何种位及何应用些知识等系列问题做理性析判断些问题早引起科界重视19557月15包括玻恩、海森堡居夫内52位诺贝尔奖获者《迈瑙宣言》针科技术社价值反思说：我愉快贡献我切科服务我相信科通向类幸福路我怀着惊恐情看：科向类提供自杀手段
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1） 克隆减少遗传变异通克隆产体具同遗传基同疾病敏性种疾病毁灭整由克隆产群体
克隆物遗传全等种特定病毒或其疾病染带灾难 设想家牛群都同克隆产物种并严重病毒能毁灭全畜牧业
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体按自规律促进整种群优胜劣汰意义说克隆技术干扰自进化程.
克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利
3) 克隆技术种昂贵技术需要量金钱物专业士参与失败率非高莉277实验唯虽现发展更先进技术功率能达2-3%
失败率高达95%至98%其途夭折胚胎畸形导致短命事实世界各牛、羊、猪鼠克隆实验平均功率2%,2%解决克隆物早衰现象
克隆源物细胞必定带已经化基些基影响克隆物寿命呢种担已经证实论克隆羊利培育克隆物都同程度表现早衰特征说明物细胞遗传物质同殖细胞遗传物质毕竟存质量差别
4) 转基物提高疾病传染风险例产药物牛奶牛染病毒种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作伦理家所能接受
6) 克隆技术用创造超或拥健壮体格却智力低且克隆技术能够类效运用男性失遗传意义
逆转录病毒的作用和特点是什么？_问答详情_克隆试剂盒_克隆和表达_...123
2017-12-02
逆转录病毒的作用：逆转录病毒有三个基因：gag-编码病毒的核心蛋白；pol-编码逆转录酶；env-编码病毒的被膜糖蛋白。有的逆转录病毒还带有癌基因（vonc），即有的逆转录病毒有致癌作用。近年来，已设计构建成一些缺陷型病毒（defective virus）使逆转录病毒成为有用的基因载体，成功地把抗药性基因转入了人体造血前体细胞，并在细胞中表达。Hock等选用了缺失编码病毒外壳蛋白基因的逆转录病毒，因此不能合成自身的外壳，但它有识别外壳蛋白进行包装的信号（一段尚未鉴定的DNA顺序）。用这种缺陷的逆转录病毒去感染某种细胞株，这种细胞株包含有辅助病毒（helper virus）。辅助病毒能合成蛋白外壳，但缺失了识别蛋白外壳进行包装的信号，因此它不能包装成病毒颗粒。当用逆转录病毒感染细胞株后，逆转录病毒的RNA进入辅助病毒的外壳蛋白，成为病毒颗粒。这时把受感染的细胞同骨髓细胞一起培养，包装在辅助病毒外壳蛋白中的逆转录病毒RNA，进入骨髓细胞，病毒DNA插入宿主细胞基因组，基因的活性得到表达。这时，由于骨髓细胞里面没有辅助病毒，所以整合进宿主基因组的逆转录病毒，不再有外壳蛋白可供包装，因此也就无法增殖，而只能被“陷”在宿主基因组中，通过细胞分裂而传给下一代子细胞。2.逆转录病毒的特点：逆转录病毒需在逆转录酶的作用下首先将RNA转变为cDNA，再在DNA复制、转录、翻译等蛋白酶作用下扩增。
启动子(Promoters)克隆方法研究进展123
骗精算了2602021-08-03
启没cDNA文库,genomic DNA,用DNA模板才能扩
【求助】最近用stratagene点突变试剂盒作定点突变,老是长不出克隆,...123
wangxiaoguang2021-08-24
病毒复制循环可分为哪几个阶段?各个阶段的主要过程是什么? 123
岩情89jS2017-12-02
（一）吸附(adsorption):病毒表面接触蛋白 ---- 细胞表面受体
吸附（Adsorption）是指病毒附着于敏感细胞的表面，它是感染的起始期。细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用，这是可逆的联结。随后的特异性吸附是非常重要的，根据这一点可确定许多病毒的宿主范围，不吸附就不能引起感染。
脊髓灰质炎病毒的细胞表面受体是免疫球蛋白超家族，在非灵长类细胞上没有发现此受体，而猴肾细胞、 Hela细胞和人二倍体纤维母细胞上有它的受体，故脊髓来质炎病毒能感染人体鼻、咽、肠和脊髓前角细胞，引起脊髓灰质炎（小儿麻痹）。
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸（N-乙酰神经氨酸）的糖蛋白，它与流感病毒表面的血凝素剌突（受体连结蛋白）有特殊的亲和力，如用神经氨酸酶破坏该受体，则流感病毒不再吸附这种细胞。
此外，HIV受体为CD4；鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1（1CAM-1）；EB病毒的受体为补体受体-2（CR-2）。病毒吸附也受离子强度、pH、温度等环境条件的影响。研究病毒的吸附过程对了解受体组成、功能、致病机理以及探讨抗病毒治疗有重要意义。
（二）穿入(penetration):膜融合；病毒胞饮等
穿入（Penetration）是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆，开始病毒感染的细胞内期。
主要有三种方式：（1）融合 (Fusion)，在细胞膜表面病毒囊膜与细胞膜融合，病毒的核衣壳进入胞浆。副粘病毒以融合方式进入，如麻疹病毒、腮腺炎病毒囊膜上有融合蛋白，带有一段疏水氨基酸，介导细胞膜与病毒囊膜的融合。（2）胞饮 (Viropexis)，由于细胞膜内陷整个病毒被吞饮入胞内形成囊泡。胞饮是病毒穿入的常见方式，也是哺乳动物细胞本身具有一种摄取各种营养物质和激素的方式。当病毒与受体结合后，在细胞膜的特殊区域与病毒病毒一起内陷形成膜性囊泡，此时病毒在胞浆中仍被胞膜覆盖。某些囊膜病毒，如流感病毒借助病毒的血凝素（HA）完成脂膜间的融合，囊泡内低Ph环境使HA蛋白的三维结构发生变化，从而介导病毒囊膜与囊泡膜的融合，病毒核衣壳进入胞浆。（3）直接进入，某些无囊膜病毒，如脊髓灰质炎病毒与受体接角后，衣壳蛋白的多肽构形发生变化并对蛋白水解酶敏感，病毒核酸可直接穿越细胞膜到细胞浆中，而大部分蛋白衣壳仍留在胞膜外，这种进入的方式较为少见。
（三）脱壳(uncoating):细胞溶酶体酶； 病毒脱壳酶
穿入和脱壳是边续的过程，失去病毒体的完整性被称为“脱壳 (Uncoating)”。脱壳到出现新的感染病毒之间叫“隐蔽期”。经胞饮进入细胞的病毒，衣壳可被吞噬体中的溶酶体酶降解而去除。有的病毒，如脊髓灰质炎病毒，在吸附穿入细胞的过程中病毒的RNA释放到胞浆中。而痘苗病毒当其复杂的核心结构进入胞浆中后，随之病毒体多聚酶活化，合成病毒脱壳所需要的酶，完成脱壳。
（四）生物合成(biosynthesis):病毒核酸复制； 病毒蛋白质合成
DNA病毒和RNA病毒在复制机理有区别，但复制的结果都是合成核酸分子和蛋白质衣壳，然后装配成新的有感染性的病毒。一个复制周期大约需6～8小时。
1. 双股DNA病毒的复制----多数DNA病毒为双股DNA。
双股DNA病毒，如单纯疹病毒和腺病毒在宿主细胞核内的RNA聚合酶作用下，从病毒DNA上转录病毒mRNA，然后转移到胞浆核糖体上，指导合成蛋白质。
1) 病毒基因的mRNA转录（早期转录）: 病毒本身含有RNA聚合酶，可在胞浆中转录mRNA。mRNA有二种：早期m RNA，主要合成复制病毒DNA所需的酶及调控蛋白等，如依赖DNA的DNA聚合酶，脱氧胸腺嘧啶激酶等，称为早期蛋白；
2）病毒核酸复制：子代病毒DNA的合成是以亲代DNA为模板，按核酸半保留形式复制子代双股DNA。DNA复制出现在结构蛋白合成之前。
3）晚期转录: 晚期mRNA和晚期翻译:晚期蛋白 --- 衣壳蛋白, 包膜蛋白
晚期mRNA ，在病毒DNA复制之后出现，主要指导合成病毒的结构蛋白，称为晚期蛋白。
2. 单股RNA病毒的复制----RNA病毒核酸多为单股，病毒全部遗传信息均含在RNA中。
又可分为：
病毒RNA的碱基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒。
病毒RNA碱基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒。
逆转录病毒又称RNA肿瘤病毒 (Oncornavirus) ，病毒体含有单股正链RNA、依赖RNA的DNA多聚酶（逆转录酶）和 tRNA。
(1) 正链RNA病毒的复制 以脊髓灰质炎病毒为例，侵入的RNA直接附着于宿主细胞核糖体上，翻译出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解为结构蛋白和非结构蛋白，如依赖RNA的RNA聚合酶。在这种酶的作用下，以亲代RNA为模板形成一双链结构，称“复制型（Replicative form）”。再从互补的负链复制出多股子代正链RNA，这种由一条完整的负链和正在生长中的多股正链组成的结构，秒“复制中间体(Replicative intermediate) ”。新的子代RNA分子在复制环中有三种功能：为进一步合成复制型起模板作用；继续起mRNA作用；构成感染性病毒RNA。
(2) 负链RNA病毒的复制 流感病毒、副流感病毒、狂犬病毒和腮腺炎病毒等有囊膜病毒属于这一范畴。病毒体中含有RNA的RNA聚合酶，从侵入链转录出mRNA，翻译出病毒结构蛋白和酶，同时又可做为模板，在依赖RNA的RNA聚合酶作用下合成子代负链RNA。
(3) 逆转录病毒（Retrovirus）复制过程 分二个阶段：第一阶段，病毒核时进入胞浆后，以RNA为模板，在依赖RNA的DNA多聚酶和tRNA引物的作用下，合成负链DNA（即RNA：DNA），正链RNA被降解，进而以负链DNA为模板形成双股DNA（即DNA：DNA），转入细胞核内，整合成宿主DNA中，成为前病毒。第二阶段，前病毒DNA转录出病毒mRNA，翻译出病毒蛋白质。同样从前病毒DNA转录出病毒RNA，在胞浆内装配，以出芽方式释放。被感染的细胞仍持续分裂将前病毒传递至子代细胞。
(五) 装配与释放:
DNA病毒 (多数核内装配)；RNA病毒(多数胞浆内装配)
包膜病毒 (出芽释放)；无包膜病毒(破胞释放)
新合成的病毒核酸和病毒结构蛋白在感染细胞内组合成病毒颗粒的过程称为装配（Assembly），而从细胞内转移到细胞外的过程为释放(Release)。大多数DNA病毒，在核内复制DNA，在胞浆内合成蛋白质，转入核内装配成熟。而痘苗病毒其全部成份及装配均在胞浆内完成。RNA病毒多在胞浆内复制核酸及合成蛋白。感染后6个小时，一个细胞可产生多达10，000个病毒颗粒。
病毒装配成熟后释放的方式有：（1）宿主细胞裂解，病毒释放到周围环境中，见于无囊膜病毒，如腺病毒、脊髓灰质炎病毒等；（2）以出芽的方式释放，见于有囊膜病毒，如疱疹病毒在核膜上获得囊膜，流感病毒在细胞膜上获得囊膜而成熟，然后以出芽方式释放出成熟病毒。也可通过细胞间桥或细胞融合邻近的细胞。
吸附（Adsorption）是指病毒附着于敏感细胞的表面，它是感染的起始期。细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用，这是可逆的联结。随后的特异性吸附是非常重要的，根据这一点可确定许多病毒的宿主范围，不吸附就不能引起感染。
脊髓灰质炎病毒的细胞表面受体是免疫球蛋白超家族，在非灵长类细胞上没有发现此受体，而猴肾细胞、 Hela细胞和人二倍体纤维母细胞上有它的受体，故脊髓来质炎病毒能感染人体鼻、咽、肠和脊髓前角细胞，引起脊髓灰质炎（小儿麻痹）。
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸（N-乙酰神经氨酸）的糖蛋白，它与流感病毒表面的血凝素剌突（受体连结蛋白）有特殊的亲和力，如用神经氨酸酶破坏该受体，则流感病毒不再吸附这种细胞。
此外，HIV受体为CD4；鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1（1CAM-1）；EB病毒的受体为补体受体-2（CR-2）。病毒吸附也受离子强度、pH、温度等环境条件的影响。研究病毒的吸附过程对了解受体组成、功能、致病机理以及探讨抗病毒治疗有重要意义。
（二）穿入(penetration):膜融合；病毒胞饮等
穿入（Penetration）是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆，开始病毒感染的细胞内期。
主要有三种方式：（1）融合 (Fusion)，在细胞膜表面病毒囊膜与细胞膜融合，病毒的核衣壳进入胞浆。副粘病毒以融合方式进入，如麻疹病毒、腮腺炎病毒囊膜上有融合蛋白，带有一段疏水氨基酸，介导细胞膜与病毒囊膜的融合。（2）胞饮 (Viropexis)，由于细胞膜内陷整个病毒被吞饮入胞内形成囊泡。胞饮是病毒穿入的常见方式，也是哺乳动物细胞本身具有一种摄取各种营养物质和激素的方式。当病毒与受体结合后，在细胞膜的特殊区域与病毒病毒一起内陷形成膜性囊泡，此时病毒在胞浆中仍被胞膜覆盖。某些囊膜病毒，如流感病毒借助病毒的血凝素（HA）完成脂膜间的融合，囊泡内低Ph环境使HA蛋白的三维结构发生变化，从而介导病毒囊膜与囊泡膜的融合，病毒核衣壳进入胞浆。（3）直接进入，某些无囊膜病毒，如脊髓灰质炎病毒与受体接角后，衣壳蛋白的多肽构形发生变化并对蛋白水解酶敏感，病毒核酸可直接穿越细胞膜到细胞浆中，而大部分蛋白衣壳仍留在胞膜外，这种进入的方式较为少见。
（三）脱壳(uncoating):细胞溶酶体酶； 病毒脱壳酶
穿入和脱壳是边续的过程，失去病毒体的完整性被称为“脱壳 (Uncoating)”。脱壳到出现新的感染病毒之间叫“隐蔽期”。经胞饮进入细胞的病毒，衣壳可被吞噬体中的溶酶体酶降解而去除。有的病毒，如脊髓灰质炎病毒，在吸附穿入细胞的过程中病毒的RNA释放到胞浆中。而痘苗病毒当其复杂的核心结构进入胞浆中后，随之病毒体多聚酶活化，合成病毒脱壳所需要的酶，完成脱壳。
（四）生物合成(biosynthesis):病毒核酸复制； 病毒蛋白质合成
DNA病毒和RNA病毒在复制机理有区别，但复制的结果都是合成核酸分子和蛋白质衣壳，然后装配成新的有感染性的病毒。一个复制周期大约需6～8小时。
1. 双股DNA病毒的复制----多数DNA病毒为双股DNA。
双股DNA病毒，如单纯疹病毒和腺病毒在宿主细胞核内的RNA聚合酶作用下，从病毒DNA上转录病毒mRNA，然后转移到胞浆核糖体上，指导合成蛋白质。
1) 病毒基因的mRNA转录（早期转录）: 病毒本身含有RNA聚合酶，可在胞浆中转录mRNA。mRNA有二种：早期m RNA，主要合成复制病毒DNA所需的酶及调控蛋白等，如依赖DNA的DNA聚合酶，脱氧胸腺嘧啶激酶等，称为早期蛋白；
2）病毒核酸复制：子代病毒DNA的合成是以亲代DNA为模板，按核酸半保留形式复制子代双股DNA。DNA复制出现在结构蛋白合成之前。
3）晚期转录: 晚期mRNA和晚期翻译:晚期蛋白 --- 衣壳蛋白, 包膜蛋白
晚期mRNA ，在病毒DNA复制之后出现，主要指导合成病毒的结构蛋白，称为晚期蛋白。
2. 单股RNA病毒的复制----RNA病毒核酸多为单股，病毒全部遗传信息均含在RNA中。
又可分为：
病毒RNA的碱基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒。
病毒RNA碱基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒。
逆转录病毒又称RNA肿瘤病毒 (Oncornavirus) ，病毒体含有单股正链RNA、依赖RNA的DNA多聚酶（逆转录酶）和 tRNA。
(1) 正链RNA病毒的复制 以脊髓灰质炎病毒为例，侵入的RNA直接附着于宿主细胞核糖体上，翻译出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解为结构蛋白和非结构蛋白，如依赖RNA的RNA聚合酶。在这种酶的作用下，以亲代RNA为模板形成一双链结构，称“复制型（Replicative form）”。再从互补的负链复制出多股子代正链RNA，这种由一条完整的负链和正在生长中的多股正链组成的结构，秒“复制中间体(Replicative intermediate) ”。新的子代RNA分子在复制环中有三种功能：为进一步合成复制型起模板作用；继续起mRNA作用；构成感染性病毒RNA。
(2) 负链RNA病毒的复制 流感病毒、副流感病毒、狂犬病毒和腮腺炎病毒等有囊膜病毒属于这一范畴。病毒体中含有RNA的RNA聚合酶，从侵入链转录出mRNA，翻译出病毒结构蛋白和酶，同时又可做为模板，在依赖RNA的RNA聚合酶作用下合成子代负链RNA。
(3) 逆转录病毒（Retrovirus）复制过程 分二个阶段：第一阶段，病毒核时进入胞浆后，以RNA为模板，在依赖RNA的DNA多聚酶和tRNA引物的作用下，合成负链DNA（即RNA：DNA），正链RNA被降解，进而以负链DNA为模板形成双股DNA（即DNA：DNA），转入细胞核内，整合成宿主DNA中，成为前病毒。第二阶段，前病毒DNA转录出病毒mRNA，翻译出病毒蛋白质。同样从前病毒DNA转录出病毒RNA，在胞浆内装配，以出芽方式释放。被感染的细胞仍持续分裂将前病毒传递至子代细胞。
(五) 装配与释放:
DNA病毒 (多数核内装配)；RNA病毒(多数胞浆内装配)
包膜病毒 (出芽释放)；无包膜病毒(破胞释放)
新合成的病毒核酸和病毒结构蛋白在感染细胞内组合成病毒颗粒的过程称为装配（Assembly），而从细胞内转移到细胞外的过程为释放(Release)。大多数DNA病毒，在核内复制DNA，在胞浆内合成蛋白质，转入核内装配成熟。而痘苗病毒其全部成份及装配均在胞浆内完成。RNA病毒多在胞浆内复制核酸及合成蛋白。感染后6个小时，一个细胞可产生多达10，000个病毒颗粒。
病毒装配成熟后释放的方式有：（1）宿主细胞裂解，病毒释放到周围环境中，见于无囊膜病毒，如腺病毒、脊髓灰质炎病毒等；（2）以出芽的方式释放，见于有囊膜病毒，如疱疹病毒在核膜上获得囊膜，流感病毒在细胞膜上获得囊膜而成熟，然后以出芽方式释放出成熟病毒。也可通过细胞间桥或细胞融合邻近的细胞。
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forever_情未断2021-08-27
克隆技术：
Ⅰ. 克隆技术利 ：
①克隆技术与遗传育种
农业面利用克隆技术培育量具抗旱、抗倒伏、抗病虫害优质高产品种提高粮食产量面我已迈入世界先进前列
②克隆技术与濒危物保护
克隆技术保护物种特别珍稀、濒危物种讲福音具应用前景物角度看克隆技术价值
③克隆技术与医
代医几乎能所类器官组织施行移植手术科技术言器官移植排斥反应仍痛事排斥反应原组织配型导致相容性差克隆器官提供给原版作器官移植用则绝没排斥反应虑二者基相配组织相配问题利用克隆作器官供体合合乎道否合经济否合算 克隆技术用量繁殖价值基例医面通克隆技术产治疗糖尿病胰岛素、使侏儒症患者重新高激素能抗种病毒染干挠素等等
Ⅱ. 克隆技术弊
理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
关于： 目前克隆技术发展十迅速各政府关士、民间克隆技术评价褒贬克隆技术已展示广阔应用前景包括四面：（1）培育优良畜种产实验物；（2）产转基物；（3）产胚胎干细胞用于细胞组织替代疗；（4）复制濒危物物种保存传播物物种资源久克隆技术技术用治疗糖尿病、风、癌症、滋病、脏病及诸帕金森综合症等精神疾病并极改变现器官移植理论治疗手段给类带福音克隆技术存着些弊端理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
态层面克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利二文化层面克隆自殖替代否定打破物演进自律性带典型反自性质与今兴起祟尚合、归自基本文化趋向相悖三哲层面通克隆技术实现自我复制自我再现能导致身关系紊乱重复性替代性性规定量复制丧失唯性丧失自我及其性特征自基础物前提
血缘育构社结构社关系同家、同种族几乎都反克隆原另种育模式现单亲家庭教育问题备受关注关注情培育问题两性繁殖、双亲抚育状态完几千直克隆现社该何应克隆与克隆关系底该呢?二身份社权利难辨假突20财产指纹、基都该咋办?要像汽车挂牌照额刻克隆川A0001、克隆川A0002类标记才能识别第三支持克隆观点：解决育问题没育能力克隆代没育能力自认优秀克隆除血型、相貌、指纹、基外其性格、行能完全同能保证克隆优秀误入歧途?克隆研究现异缺陷克隆能像克隆物随意处理掉麻烦目前环境仅观念、制度包括整社结构都知道接纳克隆
克隆技术短期内造福类终给类带灾难造福体现器官培养救治肢残或患其疾病者；并且复制世亲体现哀思克隆技术用于复制类精神物质双重灾难精神类伦理道德破坏身体克隆技术具未知问题能引起几代基变异更严重基受律保护自由婚恋权力必受宪保护代混入群若干代社角度克隆基传至全世界旦发未知变化类面临灭亡 处：治病救 ；坏处：容易别用利用造极坏影响悖于伦理道德
克隆器官医给类带希望 造福于
关于克隆利与弊
目前克隆技术发展十迅速各政府关士、民间克隆技术评价褒贬克隆技术已展示广阔应用前景包括四面：（1）培育优良畜种产实验物；（2）产转基物；（3）产胚胎干细胞用于细胞组织替代疗；（4）复制濒危物物种保存传播物物种资源久克隆技术技术用治疗糖尿病、风、癌症、滋病、脏病及诸帕金森综合症等精神疾病并极改变现器官移植理论治疗手段给类带福音克隆技术存着些弊端理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
克隆像每件事物利弊且两极化
说起克隆利真少呢克隆延寿命；培养高附加值牲畜；挽救濒临灭绝珍稀物；提高农业面产量……代科技术言器官移植种排斥反应仍令痛事克隆器官提供给原版任何顾虑所克隆医帮助
克隆弊仍于利层面说例举三层面态层面克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利二文化层面克隆自殖替代否定打破物演进自律性带典型反自性质三哲层面通克隆技术实现自我复制自我再现能导致身关系紊乱重复性替代性性规定量复制丧失唯性丧失自我及其性特征自基础物前提
我所说物技术利弊主要指克隆其利弊
利:1) 克隆技术解除些能母亲性痛苦
2) 克隆实验实施促进遗传发展制造能移植于体物器官辟前景
3) 克隆技术用于检测胎遗传缺陷受精卵克隆用于检测各种遗传疾病克隆胚胎与宫发育胎遗传特征完全相同
4) 克隆技术用于治疗神经系统损伤神经组织没再能力干细胞修复神经系统损伤
5) 体外受精手术医需要受精卵植入宫筛选进入妊娠阶段许性能提供卵用于受精通克隆解决问题卵细胞克隆用于受精提高妊娠功率
弊:1) 克隆减少遗传变异通克隆产体具同遗传基同疾病敏性种疾病毁灭整由克隆产群体 设想家牛群都同克隆产物种并严重病毒能毁灭全畜牧业
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体按自规律促进整种群优胜劣汰意义说克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术需要量金钱物专业士参与失败率非高莉277实验唯虽现发展更先进技术功率能达2-3%
4) 转基物提高疾病传染风险例产药物牛奶牛染病毒种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作伦理家所能接受
6) 克隆技术用创造超或拥健壮体格却智力低且克隆技术能够类效运用男性失遗传意义
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所说,科技术双刃剑,利没弊,没标准答案!看利用!
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网络与间距离拉近
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网络给我带种种利益同带少弊端
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网络给带估量便利、机遇、财富给带预期许潜危机网络真让恨
始油灯蜡烛现白炽灯、霓虹灯等；原始采集狩猎现街采购；原先野外群居现高楼厦……类发展社发展类步步控制世界类步步统治自类拥字典社进步其实发展科技水平高（暗含其物水平差层含义）意思.站今,我要思考问题:科技发展今说已初露端倪,科技发展给我带利于弊呢,弊于利,类底该该发展?让我每都放自思维,想想.我现列举二:
利：1.表面看,民水平提高,质量提高,(面包括像交通发面提高与进步,交通工具进步使与间距离断缩,使与外星距离断缩;速度提升使相同间内,做事情越.知识传播面进步,使越越能看书,精神便进步,质量提高),具体点: 科发展使古至今梦想变现实远古社能茹毛饮血现看看我衣食住行何等进步没科发展我舒服原点冒发烧都要命现医都已经起死步原七十古稀现百岁稀奇难道科技发展功劳汽车与飞机火车与轮船远古期简单想像几公路远征现球同村庄随转遍
2.由(1)进步科技发展另利处:思想观念进步,间观念,情观念;并且再封建迷信,发展完全现实主义观,每字每句都追求真理等.家都独立思考,家都反思,我思想彻底胜原我.带坏处,: 每家都流传着自神何等美丽；每家都自名著流传至今仍朽；每家都遗留着经典名画何等珍贵科发展切都变历史,永远再美丽传说;现实永远名著没浪漫永远名画城市风景古候着月亮想嫦娥想玉兔想远亲现着同皎洁月亮想满身洞石球何利用起像我早已盖层冷冷膜,早已没情,填满利益,其实,家都知道我并完全,想,情嘛!社进步让我慢慢变.确, 科发展带入理智代再盲目迷信追求真理没科发展我认圆；没科发展我认堂狱科使我更解我所处让我丢失我份纯真,算弊?所面列举弊:
1.面所讲思想观进步同退步
2.我现除提"平发展"外,经提,,环境污染.社发展,特别资本主义社发展主要弊端. 环境污染指由于态系统害物质进入环境态系统造干扰损害现象简称污染具体说害物质或害进入环境并环境发扩散、迁移、转化并跟态体统诸要素发作用使态系统结构与功能发变化类及其物存发展产利影响板块三:气污染,水体污染,土壤污染.现环境污染情况已理想,打比: 杯清水滴入几滴污水整杯水饮用环境污染同道理指由于素使害毒物质气、水体、土壤、植物造损害使构状态发变化破坏干扰类且,前面所讲,环境污染扩散其各物领域,造态系统结构与功能发变化,导致些物球消失,使越越物冠濒临灭绝称号.仅其物种威胁,类本省:气颗粒物废气含量增加,使及呼吸清新空气,危及自身健康,腐蚀材料,给类社造损失等,环境污染给我带利实太,说完.单家提供几篇新闻报道: 自本世纪20代世界性环境污染威胁着类安全类解决环境污染问题经历工业污染治理、城市环境污染综合防治、态环境综合防治、区域污染防治等四历程相段间着眼点局限工厂、行业、条河流、区自80代逐渐认识威胁类存仅仅局部区更 范围甚至全球环境污染烟其污染物全球环境污染问题现注意力集温室效应、臭氧层破坏酸雨三问题除外存着系列令安环境问题现注意力集温室效应、臭氧层破坏酸雨三问题除外存着系列令安环境问题仍表现气、水体、食物、土壤等几面据世界卫组织联合环境规划署关空气、水食物污染报告称：全世界城市居民五四受污染气环境饮用符合卫要求水另据报道全世界18亿饮用受污染水每30％环境污染患病倾注于河流液体废物严重环境污染破坏建筑物威胁社产危害体健康具两千历史雅典古城堡理石建筑雕塑艺术层层剥落；纽约自由岛自由神铜像已披层厚厚铜绿；我重庆江桥锈钢底座已锈迹斑斑环境污染体危害十复杂般急性、慢性积累性三种积累性危害叫远期危害主要致癌、致畸、致突变作用致癌作用例全世界每500万死于癌症世界卫组织认类癌症极部由环境素引起环境素由化物质引起癌症占90％环境污染问题界需要众家甚至全球共同努力才能解决我球保护全球环境全类责任
3.说概括点,第三点概括:战争问题.战争主要目通武力手段"说服"其家,所战争主要比军事力量,军事力量强弱根据家科技发展水平评定,所随着科技发展,越越让闻风丧胆高科技武器发明,:原弹,氢弹,物武器等.由于威力实太猛,由类辛辛苦苦构建世界连同类推悬崖边
总结文：利与弊相利便弊利于弊比较没终点展开
Ⅰ. 克隆技术利 ：
①克隆技术与遗传育种
农业面利用克隆技术培育量具抗旱、抗倒伏、抗病虫害优质高产品种提高粮食产量面我已迈入世界先进前列
②克隆技术与濒危物保护
克隆技术保护物种特别珍稀、濒危物种讲福音具应用前景物角度看克隆技术价值
③克隆技术与医
代医几乎能所类器官组织施行移植手术科技术言器官移植排斥反应仍痛事排斥反应原组织配型导致相容性差克隆器官提供给原版作器官移植用则绝没排斥反应虑二者基相配组织相配问题利用克隆作器官供体合合乎道否合经济否合算 克隆技术用量繁殖价值基例医面通克隆技术产治疗糖尿病胰岛素、使侏儒症患者重新高激素能抗种病毒染干挠素等等
Ⅱ. 克隆技术弊
理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
关于： 目前克隆技术发展十迅速各政府关士、民间克隆技术评价褒贬克隆技术已展示广阔应用前景包括四面：（1）培育优良畜种产实验物；（2）产转基物；（3）产胚胎干细胞用于细胞组织替代疗；（4）复制濒危物物种保存传播物物种资源久克隆技术技术用治疗糖尿病、风、癌症、滋病、脏病及诸帕金森综合症等精神疾病并极改变现器官移植理论治疗手段给类带福音克隆技术存着些弊端理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
态层面克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利二文化层面克隆自殖替代否定打破物演进自律性带典型反自性质与今兴起祟尚合、归自基本文化趋向相悖三哲层面通克隆技术实现自我复制自我再现能导致身关系紊乱重复性替代性性规定量复制丧失唯性丧失自我及其性特征自基础物前提
血缘育构社结构社关系同家、同种族几乎都反克隆原另种育模式现单亲家庭教育问题备受关注关注情培育问题两性繁殖、双亲抚育状态完几千直克隆现社该何应克隆与克隆关系底该呢?二身份社权利难辨假突20财产指纹、基都该咋办?要像汽车挂牌照额刻克隆川A0001、克隆川A0002类标记才能识别第三支持克隆观点：解决育问题没育能力克隆代没育能力自认优秀克隆除血型、相貌、指纹、基外其性格、行能完全同能保证克隆优秀误入歧途?克隆研究现异缺陷克隆能像克隆物随意处理掉麻烦目前环境仅观念、制度包括整社结构都知道接纳克隆
克隆技术短期内造福类终给类带灾难造福体现器官培养救治肢残或患其疾病者；并且复制世亲体现哀思克隆技术用于复制类精神物质双重灾难精神类伦理道德破坏身体克隆技术具未知问题能引起几代基变异更严重基受律保护自由婚恋权力必受宪保护代混入群若干代社角度克隆基传至全世界旦发未知变化类面临灭亡 处：治病救 ；坏处：容易别用利用造极坏影响悖于伦理道德
克隆器官医给类带希望 造福于
关于克隆利与弊
目前克隆技术发展十迅速各政府关士、民间克隆技术评价褒贬克隆技术已展示广阔应用前景包括四面：（1）培育优良畜种产实验物；（2）产转基物；（3）产胚胎干细胞用于细胞组织替代疗；（4）复制濒危物物种保存传播物物种资源久克隆技术技术用治疗糖尿病、风、癌症、滋病、脏病及诸帕金森综合症等精神疾病并极改变现器官移植理论治疗手段给类带福音克隆技术存着些弊端理论克隆技术熟；实践克隆物功率低部体表现理或免疫缺陷且物残废率相高并伴早衰现象等外克隆技术（尤其胚胎面应用）伦理道德冲击公众词强烈反应限制克隆技术应用几克隆技术发展表明世界各科技都甘落谁没放弃克隆技术研究我认克隆技术巨理论意义实用价值于促使科家加快研究步伐使克隆技术研究与发进入高潮更类造福
克隆像每件事物利弊且两极化
说起克隆利真少呢克隆延寿命；培养高附加值牲畜；挽救濒临灭绝珍稀物；提高农业面产量……代科技术言器官移植种排斥反应仍令痛事克隆器官提供给原版任何顾虑所克隆医帮助
克隆弊仍于利层面说例举三层面态层面克隆技术导致基复制威胁基性保持物演化现逆向颠倒程即由复杂走向简单物存极利二文化层面克隆自殖替代否定打破物演进自律性带典型反自性质三哲层面通克隆技术实现自我复制自我再现能导致身关系紊乱重复性替代性性规定量复制丧失唯性丧失自我及其性特征自基础物前提
我所说物技术利弊主要指克隆其利弊
利:1) 克隆技术解除些能母亲性痛苦
2) 克隆实验实施促进遗传发展制造能移植于体物器官辟前景
3) 克隆技术用于检测胎遗传缺陷受精卵克隆用于检测各种遗传疾病克隆胚胎与宫发育胎遗传特征完全相同
4) 克隆技术用于治疗神经系统损伤神经组织没再能力干细胞修复神经系统损伤
5) 体外受精手术医需要受精卵植入宫筛选进入妊娠阶段许性能提供卵用于受精通克隆解决问题卵细胞克隆用于受精提高妊娠功率
弊:1) 克隆减少遗传变异通克隆产体具同遗传基同疾病敏性种疾病毁灭整由克隆产群体 设想家牛群都同克隆产物种并严重病毒能毁灭全畜牧业
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体按自规律促进整种群优胜劣汰意义说克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术需要量金钱物专业士参与失败率非高莉277实验唯虽现发展更先进技术功率能达2-3%
4) 转基物提高疾病传染风险例产药物牛奶牛染病毒种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作伦理家所能接受
6) 克隆技术用创造超或拥健壮体格却智力低且克隆技术能够类效运用男性失遗传意义
7) 克隆技术家庭关系带影响巨由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟延迟几十已难设想发现自另外完全复制品（或）受
所说,科技术双刃剑,利没弊,没标准答案!看利用!
我所说物技术利弊主要指克隆其利弊
利:1自网络始慢慢普及各公司纷纷网建立自网页网站介绍公司情况、宣传公司产品更公司已经网公征集订单更推销自产品类似网站越越许同种类网商城业并且标榜自产品比平市场购买更便宜更合算顷刻间信息网族间广泛传播致使供给需求信息充交流要网输入自想要商品搜索篇幅供应商资料呈现眼前供应商籍着网络资料查询哪些消费者于自商品消费能力统计数据便更针性宣传足户网达交易促进市场供求两旺局面
信息产业高度发展并且于信息需求越越今网络传播媒体于说许型考试报名数查询都网进行用再像前打永远繁忙且昂贵声讯电查询近两家统公务员考试网络公布详情考要打所区招考网页招聘部门、招考数、职位、要求等系列详细情况目连同报考需要带备资料报名点明确网显示使考能非便、非容易解情况于发布信息单位说再需要 逐点逐点派遣员宣传；于想知道情况考说必千迢迢、奔波劳碌指定点索取招简章、解招情况两面都网络信息传播获益匪浅
网络与间距离拉近
众所周知网络游戏断发展壮游戏类别越越拿我接触OICQ例许朋友间间空间距离没办现实联系QQ处于些情况朋友提供良联络途径QQ朋友联络认识许新朋友短短聊沟通使与间灵距离拉近其同网络游戏通游戏相互合作、相互帮助相识相知肝胆相照朋友通E-mail网进行书信往互相告知安
SARS横行近两月各区疫情疫情严重香港北京数繁停课停课期间教育部门利用网络网办空教室提供基本术问题解答习题演练使家能习并且习式新颖更加吸引注意、更提高习兴趣
类似远程教育许其教应用像我现四习部同已经参加工作能校参加剩余课程习论校课外工作都必须进行毕业考试师便缺课同笔记放网让同易于自
教育习贸易议等网进行net meeting 词网络广泛流行起同家、同区间商家、公司通网络进行网络议协调讨论商业重要问题省却召集与员、商定议间、点系列繁琐程序步骤节省量力物力
网络给我带种种利益同带少弊端
首先网络迅速发展给商带钻空少色情、暴力、赌博等良网站应运些商牟取暴利顾网站信息于青少思想健康危害性断网站传播色情暴利信息更甚者制造同色情电影要求浏览者先付款浏览除色情暴利网站些网站面设置电收费系统旦浏览者打其网页浏览收取及其昂贵合理途电费用令浏览者蒙受巨经济损失网络许介绍工作、征友、征婚介网站其乏骗钱财、没履行义务网站网民踩进些精布置陷阱
其网络带与间许纷争于网络政府台政策够完善所许关于知识产权问题源源断产例些文章网发布复制、修改纳重新发布严重侵犯原创作者版权由于网络繁复、确定性找抄袭改编源我网络游戏所拥帐户非盗用其实种刑事责任我却找偷窃者使事情游戏帐号事盗重要商业资料相关商业机密泄露盗窃公司企业损失严重盗窃家机密更堪设想整家军事、防御系统能遭极破坏甚至要花难估量力物力重新建立关于军事面数据
网络带给仅思想形伤害于许网民健康造忽视伤害电视我曾经看报道：某某青少由于网玩游戏间造身忽瘫痪、能弹严重休克昏迷例由于电脑于体辐射间坐电脑前极容易造种种难预期身体伤害显著于视力损害经数据统计事间电脑工作总体视力比少接触电脑视力差
网络给带估量便利、机遇、财富给带预期许潜危机网络真让恨
始油灯蜡烛现白炽灯、霓虹灯等；原始采集狩猎现街采购；原先野外群居现高楼厦……类发展社发展类步步控制世界类步步统治自类拥字典社进步其实发展科技水平高（暗含其物水平差层含义）意思.站今,我要思考问题:科技发展今说已初露端倪,科技发展给我带利于弊呢,弊于利,类底该该发展?让我每都放自思维,想想.我现列举二:
利：1.表面看,民水平提高,质量提高,(面包括像交通发面提高与进步,交通工具进步使与间距离断缩,使与外星距离断缩;速度提升使相同间内,做事情越.知识传播面进步,使越越能看书,精神便进步,质量提高),具体点: 科发展使古至今梦想变现实远古社能茹毛饮血现看看我衣食住行何等进步没科发展我舒服原点冒发烧都要命现医都已经起死步原七十古稀现百岁稀奇难道科技发展功劳汽车与飞机火车与轮船远古期简单想像几公路远征现球同村庄随转遍
2.由(1)进步科技发展另利处:思想观念进步,间观念,情观念;并且再封建迷信,发展完全现实主义观,每字每句都追求真理等.家都独立思考,家都反思,我思想彻底胜原我.带坏处,: 每家都流传着自神何等美丽；每家都自名著流传至今仍朽；每家都遗留着经典名画何等珍贵科发展切都变历史,永远再美丽传说;现实永远名著没浪漫永远名画城市风景古候着月亮想嫦娥想玉兔想远亲现着同皎洁月亮想满身洞石球何利用起像我早已盖层冷冷膜,早已没情,填满利益,其实,家都知道我并完全,想,情嘛!社进步让我慢慢变.确, 科发展带入理智代再盲目迷信追求真理没科发展我认圆；没科发展我认堂狱科使我更解我所处让我丢失我份纯真,算弊?所面列举弊:
1.面所讲思想观进步同退步
2.我现除提"平发展"外,经提,,环境污染.社发展,特别资本主义社发展主要弊端. 环境污染指由于态系统害物质进入环境态系统造干扰损害现象简称污染具体说害物质或害进入环境并环境发扩散、迁移、转化并跟态体统诸要素发作用使态系统结构与功能发变化类及其物存发展产利影响板块三:气污染,水体污染,土壤污染.现环境污染情况已理想,打比: 杯清水滴入几滴污水整杯水饮用环境污染同道理指由于素使害毒物质气、水体、土壤、植物造损害使构状态发变化破坏干扰类且,前面所讲,环境污染扩散其各物领域,造态系统结构与功能发变化,导致些物球消失,使越越物冠濒临灭绝称号.仅其物种威胁,类本省:气颗粒物废气含量增加,使及呼吸清新空气,危及自身健康,腐蚀材料,给类社造损失等,环境污染给我带利实太,说完.单家提供几篇新闻报道: 自本世纪20代世界性环境污染威胁着类安全类解决环境污染问题经历工业污染治理、城市环境污染综合防治、态环境综合防治、区域污染防治等四历程相段间着眼点局限工厂、行业、条河流、区自80代逐渐认识威胁类存仅仅局部区更 范围甚至全球环境污染烟其污染物全球环境污染问题现注意力集温室效应、臭氧层破坏酸雨三问题除外存着系列令安环境问题现注意力集温室效应、臭氧层破坏酸雨三问题除外存着系列令安环境问题仍表现气、水体、食物、土壤等几面据世界卫组织联合环境规划署关空气、水食物污染报告称：全世界城市居民五四受污染气环境饮用符合卫要求水另据报道全世界18亿饮用受污染水每30％环境污染患病倾注于河流液体废物严重环境污染破坏建筑物威胁社产危害体健康具两千历史雅典古城堡理石建筑雕塑艺术层层剥落；纽约自由岛自由神铜像已披层厚厚铜绿；我重庆江桥锈钢底座已锈迹斑斑环境污染体危害十复杂般急性、慢性积累性三种积累性危害叫远期危害主要致癌、致畸、致突变作用致癌作用例全世界每500万死于癌症世界卫组织认类癌症极部由环境素引起环境素由化物质引起癌症占90％环境污染问题界需要众家甚至全球共同努力才能解决我球保护全球环境全类责任
3.说概括点,第三点概括:战争问题.战争主要目通武力手段"说服"其家,所战争主要比军事力量,军事力量强弱根据家科技发展水平评定,所随着科技发展,越越让闻风丧胆高科技武器发明,:原弹,氢弹,物武器等.由于威力实太猛,由类辛辛苦苦构建世界连同类推悬崖边
总结文：利与弊相利便弊利于弊比较没终点展开
全长ORF克隆常见问题解答123
快乐分享2021-09-07
武汉生物制品研究所 研究院 湖北省人民政府门户网站123
幽灵军团小姻2021-08-13
用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞) （2002）
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
人白细胞介素10(hIL10)cDNA克隆与表达的研究123
安诺瑞康2021-09-13
白细胞介素10（IL-10）是一种由多种细胞亚群产生的重要免疫调节因子。
早期研究显示，其主要生物功能为限制炎症反应及调节多种免疫细胞的分化和增殖，例如：T细胞、B细胞、NK细胞、
抗原呈递细胞、肥大细胞、粒细胞等。近来研究结果提示，IL-10也可以介导免疫反应的激活，有助于清除感染及非感染
颗粒且只产生轻微的炎症反应。大量的研究，包括患者IL-10的表达分析、体外实验及动物实验表明，IL-10与自身免疫
性疾病、炎症、肿瘤等疾病的发生、发展关系密切。临床试验主要集中于RA、炎症性肠病、银屑病、器官移植和丙型肝
炎等。虽然试验结果各不相同，但是使我们对IL-10在免疫反应中的作用的认识更加深入，同时也预示IL-10可以成为一
种治疗药物。目前，我国还没有重组基因工程IL-10药物上市，而且在探索如何高效表达具有生物活性rhIL-10的研究尚
处于起步阶段。本研究建立在国内外IL-10重组基因工程研究基础上，拟克隆人IL-10基因，通过原核、真核两种表达系
统表达IL-10蛋白，奠定重组基因工程研制人IL-10的基础。主要研究结果如下：一、依据Genbank中人类IL-10序列设计
一对特异性引物，应用RT-PCR技术，从LPS刺激的外周血单个核细胞中成功地克隆出hIL-10成熟肽编码序列，并将之克
隆入pGEM-T载体，构建出中间载体<WP=91>pGEM-T-hIL-10，转化入大肠杆菌JM109中，经酶切鉴定及序列测定与
分析，与GenBank中发表的（NM000572.2）hIL-10成熟肽编码序列完全一致。为hIL-10基因的表达研究奠定了基
础。二、从中间载体pGEM-T-hIL-10中将hIL-10成熟肽编码序列酶切回收，定向克隆至原核表达载体pET-28a(+)的T7
启动子下游，成功地构建了原核表达载体pET-28a(+)-hIL-10，将表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLyss中获得表达
菌株，经IPTG的诱导获得较高表达，表达蛋白以包涵体形式存在。经薄层扫描确定目的蛋白表达量占菌体总蛋白的
28.7%。Westernblotting分析结果显示，表达产物与抗hIL-10单克隆抗体呈特异性阳性反应。产物经固相金属离子亲
和层析方法初步纯化，并在柱上应用浓度递减的尿素缓冲液对产物进行复性。活性研究结果表明，复性产物具有抑制
LPS刺激的外周血单核细胞表达MHCⅡ分子的活性。三、为了进一步获得高活性、高表达、适用于产业化生产的rhIL-
10，本研究选择应用酵母表达系统对hIL-10进行表达。应用PCR方法从pGEM-T-hIL-10扩增出hIL-10成熟肽编码序
列，并在其上下游分别引入EcoRI和BaxⅠ两个酶切位点，通过定向克隆成功地构建出分泌型酵母表达载体pPICZαA-
rhIL-10。采用电穿孔技术将表达单位转化入酵母菌P.pastorisX-33中，通过提取酵母基因组进行PCR鉴定以及
MD/MM营养表型筛选，初步筛选出10株可表达具有hIL-10活性的酵母菌。小量发酵培养表达菌株，以0.5%甲醇诱导
96小时，培养上清中蛋白经硫酸铵沉淀后，经SDS-PAGE、薄层扫描显示rhIL-10约占样品蛋白总量的10%。产物经固
相金属离子亲和层析方法初步纯化，纯度达94%。活性研究结果显示酵母表达的分泌型rhIL-10具有较原核表达产物更高
的活性。
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