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Uscnk/Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)/10ml/MAA040Hu22
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Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
NTN; ABCD3; C3Xkine; CXC3; CXC3C; NTT; SCYD1; ABCD3; FKN; Neurotactin; Fractalkine; Small Inducible Cytokine Subfamily D(Cys-X3-Cys)Member 1
- Product No.MAA040Hu22
- Organism SpeciesHomo sapiens (Human) Same name, Different species.
- All
- Human
- Mouse
- Rat
- Cavia
- Rabbit
- Simian
- Caprine
- Ovine
- Equine
- Bovine
- Porcine
- Gallus
- Canine
- Others
- Multi-species
- Pan-species
- SourceMonoclonal antibody preparation
- HostMouse
- Potency (Clone Number)n/a
- Ig IsotypeIgG
- PurificationAntigen-specific affinity chromatography followed by Protein A affinity chromatography
- LabelNone
- Immunogenn/a
- Buffer FormulationPBS, pH7.4, containing 0.02% NaN3, 50% glycerol.
- TraitsLiquid
- Concentration1mg/mL
- Organism Species Moren/a
- ApplicationsWB; IHC; ICC; IP.If the antibody is used in flow cytometry, please check FCM antibodies.
- Downloadn/a
- UOM20µl100µl200µl1ml10ml
- FOBUS$ 101 For more details, please contact local distributors!US$ 235 For more details, please contact local distributors!US$ 336 For more details, please contact local distributors!US$ 840 For more details, please contact local distributors!US$ 3360 For more details, please contact local distributors!
Packages (Simulation)- Packages (Simulation)
- ISO9001: 2008, ISO13485: 2003 Registered
SPECIFITY of the Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
The antibody isa mouse monoclonal antibody raised against CX3CL1. It has been selected for its ability to recognize CX3CL1 in immunohistochemical staining and western blotting.
USAGE of the Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
Western blotting: 0.2-2µg/mL;1:500-5000 Immunohistochemistry: 5-20µg/mL;1:50-200 Immunocytochemistry: 5-20µg/mL;1:50-200 Optimal working dilutions must be determined by end user.
STORAGE of the of the Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
Store at 4°C for frequent use. Stored at -20°C in a manual defrost freezer for two year without detectable loss of activity. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
STABILITY of the Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)
The thermal stability is described by the loss rate. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37°C for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. The loss rate is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
GIVEAWAYS
INCREMENT SERVICES
Antibody Labeling Customized ServiceProtein A/G Purification ColumnStaining Solution for Cells and TissuePositive Controlfor AntibodyTissue/Sections Customized ServicePhosphorylated Antibody Customized ServiceWestern Blot (WB) Experiment ServiceImmunohistochemistry (IHC) Experiment ServiceImmunocytochemistry (ICC) Experiment ServiceFlow Cytometry (FCM) Experiment ServiceImmunoprecipitation (IP) Experiment ServiceImmunofluorescence (IF) Experiment ServiceBufferDAB Chromogen KitSABC KitLong-arm Biotin Labeling KitReal Time PCR Experimental Service
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| Catalog No. | Organism species: Homo sapiens (Human) | Applications (RESEARCH USE ONLY!) |
| APA040Hu01 | Active Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | Cell culture; Activity Assays. |
| RPA040Hu02 | Recombinant Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
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| MAA040Hu22 | Monoclonal Antibody to Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | WB; IHC; ICC; IP. |
| SEA040Hu | ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection. |
| SCA040Hu | CLIA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | Chemiluminescent immunoassay for Antigen Detection. |
| KSA040Hu01 | ELISA Kit DIY Materials for Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1) | Main materials for "Do It (ELISA Kit) Yourself". |
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酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明，酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作，也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。因此，它在许多的研究领域中有着广泛的应用。 查看更多
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2018-12-26
实验原理:Southern印迹是将DNA片断从电泳凝胶上直接转移至膜支持物（如硝酸纤维素膜、尼龙膜）上，使DNA片断固定的技术。先将DNA经限制性内切酶消化成一系列片段，进行琼脂糖凝胶电泳，各片段因分子量不同而彼此分开，然后经碱处理凝胶，使DNA的片段被变性、中和并通过毛细作用在高盐缓冲液中在原 查看更多
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2021-08-29
杨齐衡 李 林*(中国科学院上海生物化学研究所, 上海 200031)摘要 蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域, 它的主要 查看更多
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2021-07-20
侯云德（1929.7.13~）医学病毒学专家，江苏省常州市人，中国工程院院士。因研究仙台病毒方面的突出成就获苏联医学科学博士学位。研究过干扰素和中药黄芪的抗病毒感染作用，在国内首先研制成功临床级人白细胞干扰素，建立人白细胞干扰素基因无性繁殖系，研制成功人α1型基因工程干扰素，并将其... 查看更多
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2019-08-12
上海善然生物科技有限公司在发布的 Matchmaker Gold酵母双杂交系统供应信息，浏览与 Matchmaker Gold酵母双杂交系统相关的产品或在搜索更多与 Matchmaker Gold酵母双杂交系统相关的内容。 查看更多
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2021-08-01
酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。... 查看更多
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2019-02-10
北京博迈斯科技发展有限公司在发布的酵母双杂交系统供应信息，浏览与酵母双杂交系统相关的产品或在搜索更多与酵母双杂交系统相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
1）取10ul待测DNA，于一定浓度的琼脂糖凝胶上进行电泳。(20mL,1.0%凝胶,)2) 凝胶用溴化乙锭染色，切掉凝胶四周多余部分，并在凝胶的一角作一记号, 拍照记录电泳结果(拍照时, 凝胶旁放一尺子)。3) 杂交用胶的制备 (做以下步骤两组合一)A．将凝胶浸没入30mL 0.25mol/L HCl溶液中15mi 查看更多
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2021-08-03
酵母整合型质粒是不能再染色体外能够进行自主复制的遗传单位，必须整合到酵母染色体上才能进行复制。... 查看更多
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2021-08-30
杨齐衡 李 林*(中国科学院上海生物化学研究所, 上海 200031)摘要 蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域, 它的主要 查看更多
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酵母双杂交系统载体是由深圳市伟通生物公司代理或销售的Stratagene品牌的试剂，产品来源于国外。深圳市伟通生物公司是中国最权威的酵母双杂交系统载体试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售酵母双杂交系统载体试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业酵母双杂交系统载体仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的酵母双杂交系统载体产品 查看更多
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酵母双杂交系统技术介绍 123
111222333a2021-07-25
有谁能介绍一下酵母双杂交系统吗？
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【】可以这样输入，智能ABC，输入“v1”，后翻3页，就可以看见了，或用紫光拼音中文输入法，输入方括号就是粗体的中括号，实在不行请复制本公告中【】
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GSTpulldown技术在蛋白质相互作用中的应用123
叶子5362017-10-02
、酵母双杂交系统：酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobinSPAPansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobinSPAPansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
【求助】求助clontech的酵母双杂交系统中文说明书_问答详情_双...123
蓝天璃2021-08-16
酵母双杂实验原理及技术 123
奈落004602021-08-10
双杂交系统建立力于真核物调控转录起始程认识细胞起始基转录需要反式转录激参与80代工作表明转录激结构组件式（modular）, 即些往往由两或两相互独立结构域构, 其DNA结合结构域（DNA binding domain简称BD）转录激结构域（activation domain简称AD）转录激发挥功能所必需前者识别DNA特异序列并使转录激结构域定位于所调节基游转录激结构域同转录复合体其作用启所调节基转录两结构域其连接区适部位打 仍具各自功能且同两结构域重建发挥转录激作用酵母双杂交系统利用杂交基通激报道基表达探测蛋白－蛋白相互作用单独BD虽能启结合能激转录同转录激BDAD形杂合蛋白仍具激转录功能酵母细胞Gal4蛋白BD与肠杆菌酸性激结构域B42融合杂合蛋白仍结合Gal4结合位点并激转录主要二类载体： a 含DNA -binding domain载体； b 含DNA-activating domain载体般编码蛋白基融合明确转录调控DNA－结合结构域(GAL4-bd LexA-bd）； 另蛋白基融合转录激结构域（GAL4-ad VP16）述二类载体构建融合基 测试蛋白基与结构域基必须阅读框内融合融合基报告株表达 其表达产物定位于核内才能驱报告基转录例GAL4-bd具核定位序列（nuclear-localization sequence） GAL4-ad没 GAL4-ad氨基端或羧基端应克隆自SV40T-抗原段序列作核定位序列目前研究用binding-domain基：GAL4（1-147）; LexA (E coli转录抑制）DNA-bd编码序列用activating-domain基：GAL4（768-881）疱疹病毒VP16编码序列等
双杂交系统另重要元件报道株报道株指经改造、含报道基（reporter gene）重组质粒宿主细胞用酵母细胞 酵母细胞作报道株酵母双杂交系统具许优点： 〈1〉 易于转化、便于收扩增质粒〈2〉具直接进行选择标记基特征性报道基〈3〉酵母内源性蛋白易同源于哺乳物蛋白结合激结构域融合基转入表达结合结构域融合基酵母细胞系 蛋白间作用使转录重建导致相邻报道基表达（lacZ） 析蛋白间结合作用
酵母双杂交系统能体内测定蛋白质结合作用 具高度敏性主要由于：①采用高拷贝强启表达载体使杂合蛋白量表达②信号测定自平衡浓度条件进行 免疫共沉淀等物理达条件需进行洗涤降低信号强度③杂交蛋白间稳定度激结构域结合结构域结合形转录起始复合物增强 者与启DNA结合 三元复合体使其各组结合趋于稳定④通mRNA产种稳定酶使信号放同 酵母表型 X-Gal及HIS3蛋白表达等检测均敏图" class="ikqb_img_alink">
双杂交系统另重要元件报道株报道株指经改造、含报道基（reporter gene）重组质粒宿主细胞用酵母细胞 酵母细胞作报道株酵母双杂交系统具许优点： 〈1〉 易于转化、便于收扩增质粒〈2〉具直接进行选择标记基特征性报道基〈3〉酵母内源性蛋白易同源于哺乳物蛋白结合激结构域融合基转入表达结合结构域融合基酵母细胞系 蛋白间作用使转录重建导致相邻报道基表达（lacZ） 析蛋白间结合作用
酵母双杂交系统能体内测定蛋白质结合作用 具高度敏性主要由于：①采用高拷贝强启表达载体使杂合蛋白量表达②信号测定自平衡浓度条件进行 免疫共沉淀等物理达条件需进行洗涤降低信号强度③杂交蛋白间稳定度激结构域结合结构域结合形转录起始复合物增强 者与启DNA结合 三元复合体使其各组结合趋于稳定④通mRNA产种稳定酶使信号放同 酵母表型 X-Gal及HIS3蛋白表达等检测均敏图" class="ikqb_img_alink">
...Biotech”为您提供“全能型酵母双杂交系统和蛋白表达系统123
djyuanm2021-08-15
大家做膜蛋白双杂交用那家公司的系统？很急
用酵母双杂交或是细菌双杂交？
用酵母双杂交或是细菌双杂交？
求助分裂泛素酵母双杂载体SplitUbiquitin Based Membrane Yeast...123
夏忻好萌48732017-10-02
酵母双杂交系统应用遇问题假阳性较二转化效率偏低所谓假阳性：待研究两蛋白间没发相互作用情况报告基激主要原由于BD融合诱饵蛋白单独激作用或者种融合蛋白激作用外蛋白激另外AD融合靶蛋白DNA特异性结合则单独激报告基表达排除假阳性需要作严格照试验应诱饵靶蛋白别作单独激报告基鉴定目前几公司推酵母双杂系统都采用报告基且每报告基游调控区各相同减少量假阳性另外报告基通整合染色体使基表达水平稳定消除由于质粒拷贝数变化引起基表达水平波造假阳性
酵母双杂交系统的原理及123
终极至尊粉7362021-07-30
酵母双杂交系统利用杂交基通激报道基表达探测蛋白－蛋白相互作用主要二类载体: a 含DNA -binding domain载体; b 含DNA-activating domain载体述二类载体构建融合基 测试蛋白基与结构域基必须阅读框内融合融合基报告株表达其表达产物定位于核内才能驱报告基转录例GAL4-bd具核定位序列(nuclear-localization sequence) GAL4-ad没GAL4-ad氨基端或羧基端应克隆自SV40T-抗原段序列作核定位序列图" class="ikqb_img_alink">
酵母双杂交常见问题解析Coolaber敬献_培养基123
猴延岛12021-07-20
酵母双杂交x gal培养基加入aba
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
【图文】酵母双杂交系统技术介绍123
bitebo2021-08-07
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THEGFPTWO--HHYBRIDYBRIDSYSTEM.pdf(126.79k)
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什么是DNA结合域和转录激活域？_123
老衲3212021-08-17
双杂交系统体内检测蛋白-蛋白相互作用极强力 双杂交系统基础些转录发现模域(modular domains): DNA结合域结合段特异DNA序列转录激域转录激域与基础转录机制相作用(1)转录激域联合DNA结合域能TATA盒启RNA聚合酶II复合体装配同增强转录CheckMateTM 哺乳物双杂交系统DNA结合域转录激域别由同质粒产融合于DNA结合域蛋白质 (X")与融合于转录激域第二蛋白质(Y)相互作用DNA结合域与转录激域紧密关联系统蛋白X与Y相互作用导致报告基转录
http://tong.dxy.cn/info/infoSupplyView.htm?id=50c35b041b977f34011b97c6bb94325e
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clontech公司酵母双杂交试剂盒说明手册123
为爱痴狂74112021-07-29
主要利用两特点：（1）转录具DNA结合结构域即BD；（2）转录具转录激结构域即AD
检测两种蛋白质之间相互作用123
苹果系列h192017-10-02
蛋白质与蛋白质间相互作用构细胞化反应网络主要组部蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络调控细胞及其信号重要意义<ul>、酵母双杂交系统：酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobinSPAPansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系</ul>
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