药用植物中乙酰胆碱酯酶和单胺氧化酶抑制剂的筛选
酵母双杂交服务目前天津赛尔生物可提供适用于浆蛋白、核蛋白及膜蛋白酵母双杂交实验服务的两套系统，可以为客户免费提供配套的人胚脑和人胚肺文库，省去了文库构建的巨大费用，全程服务都会由本公司的酵母双杂交技术专家操作，每位技术专家均有着丰富的酵母双杂交技术服务的经验，可以很好的帮助客户分析并解决在实验过程中遇到的各种问题。1.技术原理及背景介绍随着分子生物学研究尤其是人类基因组计划的迅速发展，为适应对众多基因或蛋白进行功能研究的发展趋势，已出现了很多新技术。其中酵母双杂交技术以其简便，灵敏，高效以及能反映不同蛋白质之间在活细胞内的相互作用等特点在基因功能的研究中得到了广泛的应用。酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。酵母转录因子GAL4含两个结构域：DNA结合功能域和转录激活结构域，前者可识别DNA上的特异序列，并使转录激活结构域定位于所调节基因的上游，后者同转录复合体的其他成分作用，启动相应基因的转录。将编码DNA结合功能域的基因与已知诱饵蛋白质基因构建在同一个表达载体上，在酵母中表达两者的融合蛋白，将编码DNA转录激活域的基因和cDNA文库的基因构建在AD—LIBRARY表达载体上，同时将上述两种载体转化改造后的酵母。当两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时，功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因，从而通过功能互补和显色反应筛选到阳性菌落。将阳性反应的酵母菌株中的AD—LIBRARY载体提取分离出来，从而对载体中插入的文库基因进行测序和分析工作。基于酵母双杂交技术平台的特点，它已经被应用在许多研究工作中，包括：①用已知功能的蛋白基因筛选双杂交cDNA文库，以研究蛋白质之间相互作用的传递途径；②分析新基因的生物学功能。即以功能未知的新基因去筛选文库。然后根据钓到的已知基因的功能推测该新基因的功能；③筛选药物的作用位点以及药物对蛋白质之间相互作用的影响；④检验一对功能已知蛋白间的相互作用；⑤在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用等等。2.服务内容目前我们可提供适用于浆蛋白、核蛋白及膜蛋白酵母双杂交实验服务的两套系统，包括：ClontechGAL4-basedtwo-hybridsystem适用于诱饵蛋白为浆蛋白、核蛋白StratageneCytotrapPsossystem适用于诱饵蛋白为膜蛋白具体服务内容包括：①蛋白质两两之间相互作用的实验内容包括：1).基因克隆的获得及DNA测序检验；2).基因的酵母双杂交载体构建及其DNA测序检验；；3).每个基因克隆的酵母双杂交自激活检验；4).酵母细胞内的相互作用验证提供：技术服务报告（实验操作流程，实验数据、图表、照片）。②蛋白质与文库相互作用的实验内容包括：1).诱饵基因克隆的获得及DNA测序检验；2).诱饵基因的酵母双杂交载体构建及其DNA测序检验；3).诱饵基因的酵母双杂交自激活检验；4).酵母双杂交文库筛选；5).酵母细胞内的相互作用验证（酵母回转验证）；6).阳性克隆DNA序列测定；提供：1).技术服务报告（实验操作流程，实验数据、图表、照片）。2).筛到的相互作用阳性克隆DNA和菌株实物。下面是公司为客户一实例 我们可以为客户提供配套的人胚脑和人胚肺文库，但是对于一些特殊组织的文库，需要客户自己提供，或者可以委托赛尔公司帮助制备。全程服务都会由本公司的酵母双杂交技术专家操作，每位技术专家均有着丰富的酵母双杂交技术服务的经验，可以很好的帮助客户分析并解决在实验过程中遇到的各种问题。赛尔生物相关服务：MicroRNA相关服务siRNA干扰课题整体外包服务基因克隆服务慢病毒包装服务腺病毒服务稳定细胞株筛选服务蛋白表达服务酵母双杂交服务抗体制备服务DNA与蛋白相互作用研究噬菌体展示技术服务cDNA文库构建干细胞研究基金申请，标书撰写，专利申请，课题设计等联系咨询我们官网：www.saierbio.cnQQ:2774964243邮箱：info@saierbio.com电话：022-66211462-8001手机：18622120547
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发布于 ： 2021-07-16
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