商品信息
联系客服
郑重提醒：
无质量问题不接受退换货，下单前请仔细核对信息。
下单后请及时联系客服核对商品价格，订单生效后再付款。
Assaypro/Pyruvate Dehydrogenase Complex (PDH Complex) AssayLite Multi-Color Conjugated Antibodies Flow Cytometry Kit/Kit/FACS30022M
免费咨询热线
4000-520-616
| Description: | This kit is optimized for performing Flow Cytometry analysis to the targeting protein. |
| Type: | AssayLite™ FACS Kits |
| Catalog Number: | FACS30022M |
| Species: | Human, Bovine, Pig, Rat |
| Format: | Flow Cytometry Kit |
| Size: | Kit |
| Storage: | 2-8C, Do Not Freeze |
| Immunogen: | Mitochondrial antigen (PDH complex) purified from bovine heart muscle |
| Antibody Type: | Polyclonal |
| Clone: | None |
| Isotype: | None |
| Conjugate Type: | Multi-Color Conjugates |
| Application: | FACS |
| Research Area: | Autoantibody Research, Antimitochondrial Antibodies (AMA), Primary Biliary Cirrhosis (PBC), Sjogren |
| Entrez Gene: | 517402613610. |
| UniProt: | P22439P11966 |
| Unigene: | Bt.19415, Bt.49794, Bt.6683. |
| Synonyms: | PDH Mitochondrial Complexes (E1 alpha Decarboxylase and E1 beta Decarboxylase, E2 Acetyltransferase, E3 Protein X), Mitochondrial Ag, Antimitochondrial Antibody (AMA),Pyruvate Dehydrogenase E1 Component Alpha Subunit, PDHA, Pyruvate Dehydrogenase E1 Component Subunit Beta Mitochondrial, PDHB, PDHE1-B, Dihydrolipoyllysine-residue Acetyltransferase Component of Pyruvate Dehydrogenase Complex, Pyruvate Dehydrogenase Complex Component E2, DLAT, Pyruvate Dehydrogenase Protein X Component, E3-Binding Protein, E3BP, proX, PDHX |
| Note: | For Research Use Only, Not To Be Used For Diagnostic Purposes |
蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
ebiomall.com
公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2017-12-06
IKA lab disc超薄磁力搅拌器IKA磁力搅拌器是由莱贝（上海）科学仪器有限公司代理或销售的IKA品牌的仪器，产品来源于德国。莱贝（上海）科学仪器有限公司是中国最权威的IKA lab disc超薄磁力搅拌器IKA磁力搅拌器销售服务商之一，在上海等地方销售IKA lab disc超薄磁力搅拌器IKA磁力搅拌器已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业IKA lab disc超薄磁力搅拌器IKA磁力搅拌器仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的IKA lab disc超薄磁力搅拌器IKA磁力搅拌器产品 查看更多
>
2021-08-28
【使用手册】磁力搅拌器是用于液体混合的实验室仪器，主要用于搅拌或 查看更多
>
2019-03-01
杭州奥盛仪器有限公司在发布的Bioprep-6生物样品均质仪供应信息，浏览与Bioprep-6生物样品均质仪相关的产品或在搜索更多与Bioprep-6生物样品均质仪相关的内容。 查看更多
>
2021-09-03
加热恒温混匀仪是混匀速度最快的一款恒温混匀产品，整合混匀、振荡、孵育加热三种功能，融入智能操作的设计理念，它不但能混匀各种微量管、PCR板、深孔板和微孔板等实验室常用耗材，还具备对各种模块进行加热孵育 查看更多
>
78HW-1 恒温磁力搅拌器 查看更多
>
2021-09-09
北京奥创兴业科技发展有限公司在发布的恒温混匀仪--MS-100(加热型)干浴器，振荡型金属浴，温育器杭州奥盛仪器北京办事处供应信息，浏览与恒温混匀仪--MS-100(加热型)干浴器，振荡型金属浴，温育器杭州奥盛仪器北京办事处相关的产品或在搜索更多与恒温混匀仪--MS-100(加热型)干浴器，振荡型金属浴，温育器杭州奥盛仪器北京办事处相关的内容。 查看更多
>
2021-08-23
DF-I集热式磁力搅拌器详细介绍 DF-I集热式恒温磁力加热搅拌器 一、 简介 DF-I型集热式... 查看更多
>
香港伯齐科技有限公司在发布的OMNI Bead Ruptor 4 珠式样品研磨器/均质器/细胞破碎 供应信息，浏览与OMNI Bead Ruptor 4 珠式样品研磨器/均质器/细胞破碎 相关的产品或在搜索更多与OMNI Bead Ruptor 4 珠式样品研磨器/均质器/细胞破碎 相关的内容。 查看更多
>
2021-09-07
上海赛弗生物科技有限公司在发布的MPT-48型多功能研磨仪供应信息，浏览与MPT-48型多功能研磨仪相关的产品或在搜索更多与MPT-48型多功能研磨仪相关的内容。 查看更多
>
2021-07-23
打开电源开关(机箱后面板左下角)，此时屏幕显示“新芝商标”。按( )键，到换能器选择界面,即图4所示(如果不按( )键，屏幕将停留在启动界面) 从启动界面进入换能器选择界面，首先必须选择变幅杆的型号，即图4中“变幅杆：ΦX”中的X会不停的跳动，请选择与您安装上去 查看更多
>
2021-09-20
北京乾明基因技术有限公司在发布的其林贝尔 四维旋转混合仪BE-1100供应信息，浏览与其林贝尔 四维旋转混合仪BE-1100相关的产品或在搜索更多与其林贝尔 四维旋转混合仪BE-1100相关的内容。 查看更多
>
常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗？
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
Ebiomall是跨境直采平台，我们直接从厂家采购，自己的团队负责国际物流和清关，中间没有第三方，蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品，假一罚十。
下单后可以修改订单吗？
未确认状态的订单可以修改，打开“订单详情”页面，点击右上角的“修改订单”即可，若已审核确定，则订单无法修改。
商品几天可以发货？
现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。
订单如何取消？
如订单处于未确定状态，进入“我的订单"页面，找到要取消的订单，点击“取消订单”按钮。
可以开发票吗？
本网站所售商品都是正规清关，均开具13%正规发票，发票金额含配送费金额，另有说明的除外。
如何联系商家？
蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能，点击“联系客服”、“咨询”或“在线咨询”按钮，均可咨询蚂蚁淘在线客服人员，
或拨打4000-520-616，除此之外客户可在 联系我们页面找到更多的联系方式。
收到的商品少了/发错了怎么办？
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出，可能不会同时送达，建议查看订单详情是否是部分发货状态；如未收到，可联系在线客服或者致电4000-520-616。
退换货/维修需要多长时间？
一般情况下，退货处理周期为客户收到产品一个月内（以快递公司显示签收时间为准），包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在收到货24小时内申请退换货；特殊商品以合同条款为准。
商品咨询
关于细菌超声破碎的一些经验总结123
陡变吧GEK2021-07-23
一是看破碎后菌液的浑浊程度，较清澈的是破碎比较完全的
二是镜检染色观察计数，破碎完全的基本看不到完整的菌体，都是细胞碎片
三是测菌液的电导率，根据电导率大小来判断。
二是镜检染色观察计数，破碎完全的基本看不到完整的菌体，都是细胞碎片
三是测菌液的电导率，根据电导率大小来判断。
肝脏B超显示实质回声欠均匀,要紧吗_百姓问医生123
woxhfly2021-07-28
相关疾病：乙型肝炎肝纤维化血管瘤于十二年前检查出乙肝大三阳，未处理，自行转化成小三阳，时间未知，(家族性乙肝)2013年发现乙肝相关...
【求助】提组织总RNA不用匀浆器只用液氮研磨行吗_问答详情_蚂蚁...123
rainman09242021-07-20
同学都说提组织总RNA，不用匀浆器只用液氮研磨足够了，但为什么我的总是降解呢？
【求助】组织RNA提取时用液氮研磨了可以不用匀浆器了么?_问答...123
roadeer2021-07-31
各位高手,我在做肌肉组织RNA提取时如果组织块用液氮研磨得很充分后
加trizol,之后,还需要用玻璃匀浆器磨么?
个人觉得没有必要,如果需要的话是为什么呢?是怕组织没有完全破碎么?
谢谢大家了!
加trizol,之后,还需要用玻璃匀浆器磨么?
个人觉得没有必要,如果需要的话是为什么呢?是怕组织没有完全破碎么?
谢谢大家了!
影响均质的因素有哪几点 123
baby辉骑士2021-07-31
高压均质机脉冲的影响？
88880018 赛默飞世尔Thermo LP涡旋振荡器123
ballance1﹟d弼2017-11-04
（一）辣根过氧化物酶标抗体制备技术编辑本段 辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）广泛分布于植物中，因辣根中含量最高而得名，由无色酶蛋白和深棕色铁卟啉（辅基）构成一种糖蛋白（含糖18%）。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。
HRP分子量较小（40kDa），标记物容易穿透入细胞内部；作用底物为H2O2，以二氨基联苯胺（DAB）为供氢体的反应产物为不溶性的棕色吩嗪衍生物，可用普通光镜观察；在pH3.5～12范围内稳定，对热及有机溶剂的作用亦较稳定，能耐受63℃加热15min；用甲苯与石腊包埋切片处理或用纯乙醇及10%甲醛水溶液固定作冰切片均不影响其活性；溶解性好，100mL缓冲盐溶液中可溶解5gHRP，并可溶解于62%饱和度以下的硫酸铵溶液中，故常用硫酸铵分级沉淀法分离纯化；氰化物、硫化物、氟化物、及叠氮化物等对HRP的活性有抑制作用，应避免使用NaN3作为酶标试剂的防腐剂，以防止失活。
凡能在HRP和H2O2存在时被酶催化H2O2反应而和成有色产物的化合物（供氢体）都可以用显色剂。供氢体的产物分不溶性和可溶性两类。前者最常用的为3，3‘二氨基联苯胺(3,3’diaminobenzidine,DAB)，适用于免疫组化法；反应后的氧化型中间体迅速聚合，形成不溶性棕色吩嗪衍生物；这种多聚物还能还原和螯合四氧化饿，形成具有电子密度的产物，适用电镜检查；此外还有饱和联苯胺溶液，氧化后产物呈黄褐色，多用于酶免疫扩散的深沉线显色。后者最常用的为邻苯二胺(O-phenylene diamine,OPD)，产物橙色，可溶性、敏感性高，最大吸收值为490nm，可用肉眼判别；易被浓酸终止反应，颜色可数小时不变，是ELISA中最常用的一种；但对光敏感，使用时要避光，并发现有致癌作用。
用HRP标记抗体需借助交联剂的作用，将酶连接在抗体分子上。常用的交联剂为过碘酸钠和戊二醛(glutaraldehyde,CHO-(CH2)3-CHO)。1、改良过碘酸钠法 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基，再与抗体蛋白的氨基形成schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基反应发生自身偶联，在标记前先用2，4-二硝基氟苯（DNFB）封闭酶蛋白中残存的α-和ε-氨基。酶与抗体的结合反应后，再加入硼氢化钠(NaHB4）还原成稳定的结合物。
[标记步骤]
（1）取5mg HRP溶于0.5mL蒸馏水，加入1%2，4而二硝基氟苯（DNFB）无水乙醇溶液0.1mL，室温（20℃±）下轻微搅拌作用1h。
（2）加入1mL 0.06mol/L NaIO4，室温下避光轻搅30min，溶液呈黄绿色。
（3）加入1mL0.16mol/L乙二醇，室温（20℃±）下轻搅作用1 h，终止氧化反应。
（4）加入5mg抗体（Ig），装入透析袋，置0.05mol/L，pH9.6碳酸盐缓冲液（无水碳酸钠1.5g，碳酸氢钠2.93g,蒸馏水加至1 000 mL）1 000 mL中，4℃透析过夜，更换3次。
（5）取出透析袋中液体（约3 mL），加入5mg/mLNaHB4 0.2 mL 4℃ 2h或过夜。
（6）加50%饱和硫酸铵（NH4）2SO4溶液（硫酸铵850g，蒸馏水加至1 000 mL，以30%氨水调pH7.2）6 mL沉淀结合物，置4℃30min后，3 000r/min离心30min，取深沉（SPA不需要进行此步）。
（7）将沉淀物溶于PBS（0.02M pH7.4）中，装入透析袋，并以此缓冲液透析平衡6-12h，换液3次。
（8）在结合物内加入BSA至蛋白浓度为10mg/ mL，或加等量60%甘油，测定工作效价后，小量分装（或冻干，不需加甘油），低温保存备用。2、戊二醛交联法 戊二醛是一种常用的同型双功能交联剂，通过它的两个醛基分别与HRP和抗体蛋白的氨基结合，形成HRP-戊二醛-Ab蛋白结合物。反应可在4-40℃温度范围，pH6.0～8.0 的缓冲溶液中进行，分为一步法和二步法，戊二醛一步法是将酶和待标记抗体混合，同时加入戊二醛进行交联反应。戊二醛二步法是将酶先与戊二醛作用，形成酶-戊二醛结合物，结过透析或层析除去未结合的戊二醛，然后再与抗体结合。
[标记步骤]
（1）取10mgHRP溶于0.2 mL1.25%戊二醛(用0.01mol/L、pH6.8PB将25%戊二醛稀释为1.25%)，室温（20℃左右）反应结合18h。
（2）用0.15mol/LNaCl平衡过的Sephadex G-50凝胶柱洗脱，除去游离的戊二醛，或用0.01mol/L，pH7.2PBS，4℃透析过夜。
（3）将5mg抗体IgG溶于1mL0.15mol/L NaCl，再与醛化HRP溶液（10mg/mL）混合。
（4）加入0.1mL 1mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液（调节pH至9.0～9.6），4℃，电磁搅拌下结合24h。
（5）加入0.1mL0.2mol/L赖氨酸（0.29g溶于10mL蒸馏水），4℃放置2h，以封闭残留的醛基，终止反应。
（6）装入透析袋，以0.01mol/L、pH7.2 PBS，4℃透析过夜，或通过Sephadex G-200凝胶柱层析，用PBS洗脱，收集第1峰洗脱液，加入等量60%甘油，测工作效价后，小量分装，4℃或-20℃保存。（二）过氧化物酶编辑本段简介 抗过氧化物复合物制备技术
Stemberger(1970)等，首先报道了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物（peroxidase-antiperoxidase,PAP）法，此法也称为非标记抗体酶法（unlabelled antibody enzymemethod）。PAP法不需用任何化学交联剂处理酶和抗体，二者活性不受化学反应的影响，可大大提高免疫酶法的灵敏度。标记步骤 （1）取5mL抗HRP血清，16 000r/min 4℃离心20min，取上清液。
（2）加入1mL HRP(2mg/mL)溶液混匀，室温（20℃±）静置1h，16 000r/min，4℃离心20min，取沉淀物。
（3）加冷生理盐水反复洗涤-离心（16 000r/min，4℃离心20min）3次，弃上清，取沉淀物。
（4）加入过量HRP溶液4mL（2mg/mL）混匀后，移至小烧杯内。
（5）在pH计监控下，边搅拌边加入0.1及0.01mol/L HCl调至pH2.4左右，使沉淀完全溶解。
（6）立即加入0.01mol/LnaOH,调pH7.4，16 000r/min，4℃离心20min，取上清液。
（7）加入1/10体积的0.075mol/L醋酸钠和0.15mol/L醋酸铵的等量混合液后混匀。
（8）电磁搅拌下逐滴加入等量饱和硫酸铵溶液，并继续搅拌10min，4℃放置20min，16 000r/min，4℃离心20min，去上清，取深沉物。
（9）以50%饱和硫酸铵洗涤，4℃、16 000r/min×20min，离心2次，取深沉物。
（10）加5mL蒸馏水将深沉物溶解后装入透析袋，用Ph6.75醋酸盐缓冲液（13.5L生理盐水、1.5L蒸馏水、75mL 1.5mol/L醋酸钠及75mL粉酶3moL/L醋酸铵）4℃透析3d，每天换液2次。
（11）17 000r/min，4℃离心20min，取上清液进行工作效价鉴定。
（12）加等量60%甘油，小量分装，-20℃保存。（三）McAb-PAP制备技术编辑本段 用抗HRP McAb制备PAP复合物的工艺条件较为简便，而且不需严格的条件限制。用小鼠抗HRP McAb制备的腹水，按一定的HRP/IgG克分子比混和，置37℃水浴反应2h，即成鼠PAP复合物。以按HRP/IgG克分子比为4︰1制备为宜。（四）碱性磷酸酶标抗体制备技术编辑本段简介 碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP），系小牛肠粘膜和大肠杆菌中提炼出来的一种磷酸酯的水解酶，由多个同功酶组成。从小牛肠粘膜提取的AP分子量为100kDa，酶作用的最适pH为9.6；从大肠杆菌中提取酶分子量为80kDa，最适pH为8.0。它的作用底物较多，常用的酶底物有对硝基本磷酸盐（PNP）、β-甘油磷酸钠、磷酸萘酯等。AP主要用作双标记染色，研究递质共存及酶名疫测定。AP标记抗体，一般采用戊二醛作交联剂一步法，使酶和抗体蛋白的氨基分别与戊二醛的两个醛基结合。标记步骤 （1）取抗体（2～5mg/mL）1mL，加入AP 5mg溶解。
（2）装入透析袋，用0.01mol/L、Ph7.2PBS4℃透析18h，换液3次。
（3）加入2.5%戊二醛20uL，室温（20℃±）放置2h。4℃0.01mol/L、pH7.2PBS透析过夜，换液3次。
（4）移入0.05mol/L、pH8.0Tris-HCl缓冲液中，4℃透析过夜，换液3次。
（5）取出标记抗体，用含%BSA和0.02%NaN3的Tris-HCl缓冲液稀释至4mL，即为酶标记物原液。
（6）加入1/3量纯甘油，测定工作效价后，小量（0.1mL）分装，4℃保存（使用前以pH7.4PBS-吐温溶液将结合物适当稀释）。（五）碱性磷酸酶编辑本段 -抗碱性磷酸酶复合物制备技术
Mason等（1978），用碱性磷酸酶代替过氧化物酶，建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物（APAAP）桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清，很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求，在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等（1989）利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合，4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是：用羊抗鼠Ig包被微量滴定板；加入一定量的抗APMcAb；分别加入不同量的AP作用后经过洗涤；加底物显色，测定光密度值（OD）。在一定范围内，APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时，相应的OD值也随之增大；当AP增加到一定量时（约6～8mg/mL）、OD值保持稳定。展开
HRP分子量较小（40kDa），标记物容易穿透入细胞内部；作用底物为H2O2，以二氨基联苯胺（DAB）为供氢体的反应产物为不溶性的棕色吩嗪衍生物，可用普通光镜观察；在pH3.5～12范围内稳定，对热及有机溶剂的作用亦较稳定，能耐受63℃加热15min；用甲苯与石腊包埋切片处理或用纯乙醇及10%甲醛水溶液固定作冰切片均不影响其活性；溶解性好，100mL缓冲盐溶液中可溶解5gHRP，并可溶解于62%饱和度以下的硫酸铵溶液中，故常用硫酸铵分级沉淀法分离纯化；氰化物、硫化物、氟化物、及叠氮化物等对HRP的活性有抑制作用，应避免使用NaN3作为酶标试剂的防腐剂，以防止失活。
凡能在HRP和H2O2存在时被酶催化H2O2反应而和成有色产物的化合物（供氢体）都可以用显色剂。供氢体的产物分不溶性和可溶性两类。前者最常用的为3，3‘二氨基联苯胺(3,3’diaminobenzidine,DAB)，适用于免疫组化法；反应后的氧化型中间体迅速聚合，形成不溶性棕色吩嗪衍生物；这种多聚物还能还原和螯合四氧化饿，形成具有电子密度的产物，适用电镜检查；此外还有饱和联苯胺溶液，氧化后产物呈黄褐色，多用于酶免疫扩散的深沉线显色。后者最常用的为邻苯二胺(O-phenylene diamine,OPD)，产物橙色，可溶性、敏感性高，最大吸收值为490nm，可用肉眼判别；易被浓酸终止反应，颜色可数小时不变，是ELISA中最常用的一种；但对光敏感，使用时要避光，并发现有致癌作用。
用HRP标记抗体需借助交联剂的作用，将酶连接在抗体分子上。常用的交联剂为过碘酸钠和戊二醛(glutaraldehyde,CHO-(CH2)3-CHO)。1、改良过碘酸钠法 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基，再与抗体蛋白的氨基形成schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基反应发生自身偶联，在标记前先用2，4-二硝基氟苯（DNFB）封闭酶蛋白中残存的α-和ε-氨基。酶与抗体的结合反应后，再加入硼氢化钠(NaHB4）还原成稳定的结合物。
[标记步骤]
（1）取5mg HRP溶于0.5mL蒸馏水，加入1%2，4而二硝基氟苯（DNFB）无水乙醇溶液0.1mL，室温（20℃±）下轻微搅拌作用1h。
（2）加入1mL 0.06mol/L NaIO4，室温下避光轻搅30min，溶液呈黄绿色。
（3）加入1mL0.16mol/L乙二醇，室温（20℃±）下轻搅作用1 h，终止氧化反应。
（4）加入5mg抗体（Ig），装入透析袋，置0.05mol/L，pH9.6碳酸盐缓冲液（无水碳酸钠1.5g，碳酸氢钠2.93g,蒸馏水加至1 000 mL）1 000 mL中，4℃透析过夜，更换3次。
（5）取出透析袋中液体（约3 mL），加入5mg/mLNaHB4 0.2 mL 4℃ 2h或过夜。
（6）加50%饱和硫酸铵（NH4）2SO4溶液（硫酸铵850g，蒸馏水加至1 000 mL，以30%氨水调pH7.2）6 mL沉淀结合物，置4℃30min后，3 000r/min离心30min，取深沉（SPA不需要进行此步）。
（7）将沉淀物溶于PBS（0.02M pH7.4）中，装入透析袋，并以此缓冲液透析平衡6-12h，换液3次。
（8）在结合物内加入BSA至蛋白浓度为10mg/ mL，或加等量60%甘油，测定工作效价后，小量分装（或冻干，不需加甘油），低温保存备用。2、戊二醛交联法 戊二醛是一种常用的同型双功能交联剂，通过它的两个醛基分别与HRP和抗体蛋白的氨基结合，形成HRP-戊二醛-Ab蛋白结合物。反应可在4-40℃温度范围，pH6.0～8.0 的缓冲溶液中进行，分为一步法和二步法，戊二醛一步法是将酶和待标记抗体混合，同时加入戊二醛进行交联反应。戊二醛二步法是将酶先与戊二醛作用，形成酶-戊二醛结合物，结过透析或层析除去未结合的戊二醛，然后再与抗体结合。
[标记步骤]
（1）取10mgHRP溶于0.2 mL1.25%戊二醛(用0.01mol/L、pH6.8PB将25%戊二醛稀释为1.25%)，室温（20℃左右）反应结合18h。
（2）用0.15mol/LNaCl平衡过的Sephadex G-50凝胶柱洗脱，除去游离的戊二醛，或用0.01mol/L，pH7.2PBS，4℃透析过夜。
（3）将5mg抗体IgG溶于1mL0.15mol/L NaCl，再与醛化HRP溶液（10mg/mL）混合。
（4）加入0.1mL 1mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液（调节pH至9.0～9.6），4℃，电磁搅拌下结合24h。
（5）加入0.1mL0.2mol/L赖氨酸（0.29g溶于10mL蒸馏水），4℃放置2h，以封闭残留的醛基，终止反应。
（6）装入透析袋，以0.01mol/L、pH7.2 PBS，4℃透析过夜，或通过Sephadex G-200凝胶柱层析，用PBS洗脱，收集第1峰洗脱液，加入等量60%甘油，测工作效价后，小量分装，4℃或-20℃保存。（二）过氧化物酶编辑本段简介 抗过氧化物复合物制备技术
Stemberger(1970)等，首先报道了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物（peroxidase-antiperoxidase,PAP）法，此法也称为非标记抗体酶法（unlabelled antibody enzymemethod）。PAP法不需用任何化学交联剂处理酶和抗体，二者活性不受化学反应的影响，可大大提高免疫酶法的灵敏度。标记步骤 （1）取5mL抗HRP血清，16 000r/min 4℃离心20min，取上清液。
（2）加入1mL HRP(2mg/mL)溶液混匀，室温（20℃±）静置1h，16 000r/min，4℃离心20min，取沉淀物。
（3）加冷生理盐水反复洗涤-离心（16 000r/min，4℃离心20min）3次，弃上清，取沉淀物。
（4）加入过量HRP溶液4mL（2mg/mL）混匀后，移至小烧杯内。
（5）在pH计监控下，边搅拌边加入0.1及0.01mol/L HCl调至pH2.4左右，使沉淀完全溶解。
（6）立即加入0.01mol/LnaOH,调pH7.4，16 000r/min，4℃离心20min，取上清液。
（7）加入1/10体积的0.075mol/L醋酸钠和0.15mol/L醋酸铵的等量混合液后混匀。
（8）电磁搅拌下逐滴加入等量饱和硫酸铵溶液，并继续搅拌10min，4℃放置20min，16 000r/min，4℃离心20min，去上清，取深沉物。
（9）以50%饱和硫酸铵洗涤，4℃、16 000r/min×20min，离心2次，取深沉物。
（10）加5mL蒸馏水将深沉物溶解后装入透析袋，用Ph6.75醋酸盐缓冲液（13.5L生理盐水、1.5L蒸馏水、75mL 1.5mol/L醋酸钠及75mL粉酶3moL/L醋酸铵）4℃透析3d，每天换液2次。
（11）17 000r/min，4℃离心20min，取上清液进行工作效价鉴定。
（12）加等量60%甘油，小量分装，-20℃保存。（三）McAb-PAP制备技术编辑本段 用抗HRP McAb制备PAP复合物的工艺条件较为简便，而且不需严格的条件限制。用小鼠抗HRP McAb制备的腹水，按一定的HRP/IgG克分子比混和，置37℃水浴反应2h，即成鼠PAP复合物。以按HRP/IgG克分子比为4︰1制备为宜。（四）碱性磷酸酶标抗体制备技术编辑本段简介 碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP），系小牛肠粘膜和大肠杆菌中提炼出来的一种磷酸酯的水解酶，由多个同功酶组成。从小牛肠粘膜提取的AP分子量为100kDa，酶作用的最适pH为9.6；从大肠杆菌中提取酶分子量为80kDa，最适pH为8.0。它的作用底物较多，常用的酶底物有对硝基本磷酸盐（PNP）、β-甘油磷酸钠、磷酸萘酯等。AP主要用作双标记染色，研究递质共存及酶名疫测定。AP标记抗体，一般采用戊二醛作交联剂一步法，使酶和抗体蛋白的氨基分别与戊二醛的两个醛基结合。标记步骤 （1）取抗体（2～5mg/mL）1mL，加入AP 5mg溶解。
（2）装入透析袋，用0.01mol/L、Ph7.2PBS4℃透析18h，换液3次。
（3）加入2.5%戊二醛20uL，室温（20℃±）放置2h。4℃0.01mol/L、pH7.2PBS透析过夜，换液3次。
（4）移入0.05mol/L、pH8.0Tris-HCl缓冲液中，4℃透析过夜，换液3次。
（5）取出标记抗体，用含%BSA和0.02%NaN3的Tris-HCl缓冲液稀释至4mL，即为酶标记物原液。
（6）加入1/3量纯甘油，测定工作效价后，小量（0.1mL）分装，4℃保存（使用前以pH7.4PBS-吐温溶液将结合物适当稀释）。（五）碱性磷酸酶编辑本段 -抗碱性磷酸酶复合物制备技术
Mason等（1978），用碱性磷酸酶代替过氧化物酶，建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物（APAAP）桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清，很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求，在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等（1989）利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合，4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是：用羊抗鼠Ig包被微量滴定板；加入一定量的抗APMcAb；分别加入不同量的AP作用后经过洗涤；加底物显色，测定光密度值（OD）。在一定范围内，APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时，相应的OD值也随之增大；当AP增加到一定量时（约6～8mg/mL）、OD值保持稳定。展开
QPCR常见问题及解决方法 123
一一笑而过2021-08-06
实验室要买一台组织研磨器，老板让打听哪个牌子好，据小弟这两天的查询结果，主要有两个牌子一个是美国的MP一个是德国的QIANGEN，各位作分子生物学的大哥大姐们，有谁用过吗，能否浪费一点点时间，简短的评上两句，不胜感激！！！！
实验室用磁力搅拌器磁子规格都有哪些123
yfnucsygn2017-10-20
磁子的规格是根据自身具体的长度来分类的,譬如：50mm 100mm 150mm 250mm等,但是你在用的时候,一般25mL的瓶子用50mm大小的,50mL的瓶子用100mL大小的比较合适,100mL的瓶子用150mm大小的比较合适 250mL的瓶子用250mm大小的合适.
高压均质机与胶体磨的区别123
群群我爱你0媧2021-08-02
没有本质性的区别，只是厂家起的名字不一样。样品前处理的过程中用来分解样品的。
紫外可见分光光度计价格翱艺仪器(上海)有限公司123
学生艺苑2021-07-31
小弟想请问下诸位大神，超声破碎仪能够破坏肺组织匀浆中细胞的胞核么？如果可以，请提供转速及时间
【求助】旋转蒸发仪的使用疑问,急求!!!! 分析技术讨论版论坛123
otaku2012-07-03
各位高手好，我想请教一下关于旋转蒸发仪的问题：
1.我利用氯仿萃取生物碱，需要将氯仿蒸干，我做的样品有非常多份，但是每份样品很少，用的氯仿也很少，每份只用十几毫升左右，但是旋转蒸发仪的蒸发瓶好大，而且一次只能蒸发一个样，太慢了，就算蒸发完了，取出生物碱的时候也不好取，由于我做的是定量试验，所以如果取出生物碱时有残留会影响实验结果，到底怎么办啊？有没有特制的小的蒸发瓶？或者特制的可以一次接好几个蒸发容器的接口？
2.请问恒温水浴锅可不可以用来做蒸发？由于是蒸发氯仿，担心没有回收装置会导致泄露中毒的问题，但是我的量比较少，又想冒险试试，真是焦头烂额了现在，大家把那个我出出主意吧！！！！
1.我利用氯仿萃取生物碱，需要将氯仿蒸干，我做的样品有非常多份，但是每份样品很少，用的氯仿也很少，每份只用十几毫升左右，但是旋转蒸发仪的蒸发瓶好大，而且一次只能蒸发一个样，太慢了，就算蒸发完了，取出生物碱的时候也不好取，由于我做的是定量试验，所以如果取出生物碱时有残留会影响实验结果，到底怎么办啊？有没有特制的小的蒸发瓶？或者特制的可以一次接好几个蒸发容器的接口？
2.请问恒温水浴锅可不可以用来做蒸发？由于是蒸发氯仿，担心没有回收装置会导致泄露中毒的问题，但是我的量比较少，又想冒险试试，真是焦头烂额了现在，大家把那个我出出主意吧！！！！
细胞破碎后为什么不可进行细胞呼吸？ 123
陈星宇baby2021-08-20
超声波细胞破碎仪在前几分钟内工作，后面就不工作了，这是什么原因啊？
▍
品牌分类
▍
官网分类
▍
品牌问答
