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Clontech/ApoPrimer Set (Bcl-2 family) for RT-PCR/20 Rxns/6623
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Clontech/ApoPrimer Set (Bcl-2 family) for RT-PCR/20 Rxns/6623
品牌 / 
Clontech
货号 / 
6623
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The Bcl-2 gene family encodes a set of proteins involved in apoptotic inhibition, which are commonly analyzed during the performance of a Bcl-2 apoptosis assay. The ApoPrimer Set (Bcl-2 family) for RT-PCRis composed of a set of primers used toamplify cDNA derived from the mRNA of seven Bcl-2 family members (mcl-1, bfl-1, bax-alpha, bcl-2, bak, bik, bcl-x), as well as a beta-actin control. A positive control RNA is also included. The beta-actin primer is a useful internal control for sample quantification and for comparison between samples. PCR products generated from the positive control RNA can be distinguished from target mRNA due to size differences of the amplified products.

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PCR有二类的也有三类的,根据其预期目的,结构特征、使用方法来进行风险管理,比如:.PCR扩增仪(产品供临床相关诊断的聚合酶链式反应用)为2类,实时荧光定量PCR仪(该产品基于荧光聚合酶链反应,在医学临床上可对来源于人体的核酸样本(RNA/DNA)进行分析。)为三类。看你具体是什么类型的PCR.
1.常规程序将PCR反应所需的成分配置完后,在PCR仪上于94-96℃预加热几十秒至几分钟,使模板DNA充分变性,然后进入扩增循环。在每一个循环中,先于94℃保持30秒钟使模板变性,然后将温度降到复性温度(一般50-60℃之间),一般保持30秒钟,使引物与模板充分退火;在72℃保持1分钟(扩增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一个循环。重复这样的循环25~35次,使扩增的DNA片段大量累积。最后,在72℃保持3-7min,使产物延伸完整,4℃保存。2.复性(退火)和延伸温度复性的温度是PCR扩增是否顺利的关键因素,通常在50-60℃之间。具体的温度主要由引物的Tm值决定。延伸温度绝大多数设定为72℃。如果复性的温度很高,可以将延伸温度和复性温度设置成同一温度,变成二步法PCR。3.反应时间变性步骤一般使用30秒钟,如果模板的G+C含量较高,或直接用细胞做模板,变性时间可适当延长。复性时间有30秒种一般是足够的。延伸时间由扩增产物的大小决定,一般采用1kb用1分钟来保证充足的时间。4.循环次数循环次数主要与模板的起始数量有关,在模板拷贝数为104~105数量级时,循环数通常为25~35次。平台效应(plateaueffect):PCR扩增过程后期会出现的产物的积累按减弱的指数速率增长的现象。原因:底物和引物的浓度已经降低,dNTP和DNA聚合酶的稳定性或活性降低,产生的焦磷酸会出现末端产物抑制作用,非特异性产物或引物的二聚体出现非特异性竞争作用,扩增产物自身复性,高浓度扩增产物变性不彻底。5.PCR反应液的配制PCR反应体系的配置方式有时也会影响反应的正常进行。常规方法与其它酶学反应一样,在最后加入DNA聚合酶。早期的PCR仪没有带加热的盖子,要求在反应液上覆盖一层矿物油,防止水分蒸发。对于使用具3’-5’外切活性的高温DNA聚合酶时,有时会扩增不出产物。在遇到这个问题时,如果将反应成分分开配制,A管含模板、引物和dNTP,以及调整体积的H2O,B管含缓冲液、DNA聚合酶和水,然后再将两管溶液混合起来,可较好地克服这个问题。按照常规的方法配制反应体系,有时会出现非特异性扩增的问题。热启动(hotstart)PCR操作方式可较好解决这一问题。将dNTP、缓冲液,Mg2+和primer先配制好,然后加入一粒蜡珠(如AmpliWaxPCRQam100),加热熔化,再冷却,使蜡将溶液封住,最后加入模板和DNA聚合酶等剩余成分。只有当PCR反应进入高温阶段后,蜡层熔化,所有反应成分才会混合在一起。
PCR_PCR仪器论坛社区123
一壶泊酒2018-01-22
各位站友,我需要采购一台PCR仪,techne和ABI或者伯乐的比怎么样,哪一个好点?谁的便宜?
预热主要是预热上盖和光源,使得机器到达一个最佳的运作状态。
最近要做DGGE,想买一台PCR仪。我主要做土壤微生物生态,想用PCR仪P16SrDNA,请大家根据自己的经验帮忙推荐一下,最好是主流品牌,性价比高一点的,国产进口都行;也请推荐一下凝胶成像系统。
谢谢!

做完实验之后放8联排的卡槽怎么按都弹不出来了。求助各位可能的原因有哪些?原因越详细越多越好,避免下次再出现这种状况,有没有其他战友遇到过这种情况?谢谢!

pcr仪的用途是啥子 123
明日櫻法2017-10-25
polymerase chain reaction (PCR)
PCR技术类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成
1、按 PCR 仪正面左下角电源开关,启动 PCR 仪。
2、放 PCR 离心管,先把顶盖向上扳,再往前推,露出放样孔,PCR 管
放入前应加好反应体系各组分,再放入 PCR 离心管。
3、反向重复第二步骤将顶盖板向后拉,盖好顶盖。
4、按 F2“Create”新建一个扩增的 PCR 程序。
5、按控制台面右方上下左右方向键,可随意移动编辑位置,输入需要
的温度、时间、循环数等。
6、据 PCR 离心管中加入的反应体积总量,在“Reaction volume”后输入
相应数值,有 Std“1~100ul”和 9600“1~50ul”两档可供选择。
7、按 F1“Start”启动
8、按“INFO”对应键查看 PCR 结束键。
9、扩增完成后按台面左方“Stop”键退出。
10、按“Hist”,可查看上次扩增的历史记录。11、完全退出后,按台面左下方电源开关,拔出插销,切断电源。
1、仪器性能:进口PCR以,和国产的PCR仪,在技术和使用性能上基本上没有多大的差别,比如:升降温速率,孔间温差,温度均一性,梯度温度范围,热盖温度等性能指标,国内外仪器基本达到了相同水平。而其差别主要是在功能上的差别,价格确实相差几倍。

2、仪器功能:进口和国产仪器主要功能:如保存,过温保护,断电保护,热盖功能等基本上是一样的,只是附带功能上有所差别,比如:进口的显示屏是大型的触摸式荧屏操作,国产的大多是触摸键,荧屏显示操作,进口仪器有的可以升级为荧光定量PCR仪,而国产的目前主要是专用机。而这些仪器附带功能的差别大多都是最近两年新推出来的,价格确是相差几倍。有的进口仪器没有这些附带的特殊功能,从性能和功能上比有的等于或低于国产的。
国内实验室用的最多的有Thermo的和Biorad的,属于国外品牌,有很多个型号可供选择。国产最多的是博日的,还有一些其他牌子的。
做连接,说明书上说16℃过夜,我想用PCR仪做,但不知道要不要热盖?
冰箱 制冰机 灭菌锅 摇床 移液枪 pcr仪 离心机 分光光度计 纯水系统 水浴锅等
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