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ASCO2013:利用循环肿瘤细胞可检测Etirinotecan pegol治疗转移性...
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背景:Etirinotecanpegol(EP)为一种独特的拓扑异构酶1抑制剂,可促进对SN38的持续接触。转移性乳腺癌(mBC)患者通过EP可获得29%的总缓解率,在此基础上又针对mBC患者进行了一项全球性临床III期BEACON试验。借助于患者血样中的循环肿瘤细胞(CTC)这一最低侵袭性的方式,可实现对与药物活性相关的药效学(PD)标记物进行检测。本研究针对在治疗前后分离到的CTC建立了多元定量免疫荧光分析方法,从而实现了对与EP相关的靶点特异性PD标记物进行检测。

方法:通过对照组(0.1%DMSO)及给药组(SN38,10uM)肿瘤细胞系(HCT116、MCF7、A549、SKBr3)及健康供体的PBMC,本研究建立了针对Top1、Top2、g-H2Ax、Rad51、ABCG2及Ki-67的分析方法。随后,在针对细胞角蛋白、CD45及DAPI抗体标记的孔板上,对各生物标记物的最适抗体进行了多元分析,从而对CTC进行表型鉴定。在针对BEACON患者进行的分析中,抽取到的7.5mL系列全血样本按Apocell(德克萨斯州,休斯顿市)条件进行运输,以进行进一步处理。按ApoStream技术,对PBMC和CTC进行分离处理。CTC进行PD标记物染色处理,并借助配备有图像分析软件的iCys激光扫描血细胞计数仪进行了分析。

结果:结合至肿瘤细胞的抗体表明,染色仅局限于细胞核区(Top1、Top2、g-H2AX、Ki-67)或细胞膜区(ABCG2),根据峰距可实现对其同型对照物进行区分,相关信号强度与细胞标记物表达水平的高低情况有关。目前,约80%的BEACON患者同意参加CTC子研究。截至2012年12月,已获取到了167份BEACON患者给药前血样数据。99%的血样已得到成功处理。93%的样本可检测到CTC,中位CTC数目为216个(范围:7.5-14816个)。Top1、Top2、g-H2Ax、Rad51、ABCG2及Ki-67染色结果呈阳性的比例分别为82%、89%、16%、53%、31%及52%。

结论:对于从参与BEACON试验的患者分离到的CTC,可实现对EP靶点特异性药效生物标记物的有效测定。治疗前后样本的收集与分析工作仍在进行中。本研究临床试验信息:NCT01492101

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