方案6用溴化氰切割MetX键实验资讯
三磷酸腺苷检测法(ATP法) 1.ATP反应液(Bio-Orbit)是粉末状混合物,含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mgBSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/LEDTA的0.1mol/LpH7.75Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在-20℃长期保存。 2.在已经完成促增殖或抑生长试验后的96孔细胞培养板中(每孔含100μl细胞培养液),每孔加0.1mlATP释放因子,室温中反应5分钟。取另一块96孔细胞培养板,从第一块板的各孔中吸0.1ml细胞溶解物到第二块板的相应各孔。 3.在低于25℃中,将第二块板置自动多孔荧光检测仪中。用自动加样器,每孔加入20μlATP反应液,立即检测10秒钟的荧光强度。温度升高,检测敏感性就下降。
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发布于 : 2021-09-15
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