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Modulus? Microplate Multimode Reader（Turner检测仪） 医科院基础所中心实验室 发光检测模式图 发光检测基本原理 化学发光是由化学反应而产生的光。 如：试剂A和B在酶E的作用下进行反应，生成激活态[X]， [X]衰减到一个低能量水平，同时产生光。 [A]+[B]→ [X] →[产物]+ 光 生物发光 仪器应用 发光检测 萤光素酶报告基因检测：启动子分析 细胞活性检测，通过ATP的定量定义细胞数目。 细胞凋亡检测：caspase3、7、8、9活性检测 激酶活性、细胞色素P450检测等 下载tuner modulus相关教程： 41/ 操作流程 打开电脑，进入程序 设定程序，打开仪器，预热PMT 进行管路冲洗（Flush），预充（Prime） 进行检测，生成结果文件 回抽（ Reverse Purge ）及管路冲洗（Flush） 关仪器，并考走结果，关电脑 注意事项 1. 检测之前先对进样针进行Flush，然后进行Prime 测量之后先进行Reverse Purge，然后进行Flush 2. Flush和Prime之前一定要将废液板放于检测室托盘 3. Flush要用到双蒸水和75％乙醇 4.进样器十分昂贵，轻柔操作，不可弯折，不可置于腐蚀性溶液中 5. 一定要用软件上的Door按钮开关检测室门，不可直接用手按压遮光罩盖板。 6. 检测用96孔板为白色，可反复使用，但需严格清洗，并检测本底 7. PMT预热后，打开仓门超过两分钟将自动关闭PMT的工作。及时点击Close关上仓门可以终止PMT关闭过程。 8. 托盘右上角为A1孔所对应方向。若此处档块弹出，请不要放入孔板，重新关开一次舱门，见挡块收回方可。 9. 完成整个实验后，必须将废液板取出，不可留在检测室中。 第三步，双蒸水洗 第四步，排干管路中液体 打开舱门，取出废液板 打开舱门，取出废液板 放入检测板 本页面为结果 点击Read回到检测界面 退出检测板，放入废液板 一定不要忘记检测之后 再一次冲洗管路 并且在冲洗后，要将废液板退出 1，仪器关闭 2，软件退出 3，拷走结果 * Turner Modulus 系统 内建WinCE系统 触摸式操作面板 USB插槽，USB盘 自动进样器， 进样针 检测室， 96孔板托盘 A1 触屏已经封闭 开关在仪器正后方 高性能 PMT PMT 遮光罩 96孔板 PMT ——光电倍增管 萤光素＋ATP ＋ O2 氧化萤光素＋AMP＋光 萤光素酶 Mg 2＋ 以双萤光报告基因检测为例 载体A： 待侧启动子＋萤火虫萤光素酶基因 载体B： 内参启动子＋海肾萤光素酶 将A，B两种载体同时转染入细胞，检测虫萤光素酶/海肾萤光素酶 可以校正细胞数量及转染差异带来的误差。 Dual-Luciferase?Reporter Assay System 选择一个已有Protocol 选择Protocol时的欢迎界面 左侧列表栏显示当前的编辑步骤 选择发光检测 选择双荧光素酶检测 （25-200ul，5ul步进） 打开位于仪器后方的开关 进样器动作说明 预充 冲洗 回抽 1，打开舱门，放入废液板 2，将两侧进样针放入双蒸水中 （15ml or 50ml） 第一步，双蒸水洗 第二步，75%酒精清洗 *