【求助】询问下膜蛋白放射受体分析和液闪仪的一些问题
2008-04-16
问题描述：
我现在正在做放射受体分析实验：提取大鼠皮层和海马膜蛋白后，用3H标记的放射性配体与之结合，测定放射性计数，做出受体饱和曲线，求KD和BMAX来测量受体功能。
有几个问题想问问大家：
1.我看到相当多文献中，结束反应用的是抽滤，由于条件的限制，我们这里没有该装置，所以就取了少数文献中的方法，用12000G离心10min结束反应，然后沉淀TRIS-HCL洗涤3次。测量时在沉淀所在的EP管中加入闪烁液（该闪烁液的配方适用于样品含水量较少的情况），每管1ML。请问大家，这样结束反应行吗？沉淀是否应该烘干？
2.我用的液闪仪计数不是很稳定，如果进行校正，尤其是读数比较小的时候（如只有数百），以减少误差？
3.加入闪烁液后，是否应该避光放置一段时间后再测量？
谢谢！
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