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제품특징
□ 제품 설명
Human Mitochondrial DNA (mtDNA) Monitoring Primer Set은 인간의 미토콘드리아DNA (mtDNA) copy number를 핵 DNA (nDNA)를 기준으로 상대적으로측정하기 위한 Real Time PCR용 primer set이다.본 제품에는 mtDNA와 nDNA을 검출하기 위한 primer set가 각각 2종류씩 총 4종류가 포함되고 있다.각 primer는 pseudogenes과 마우스 유래의 DNA는 증폭하지 않도록 설계되어 있으므로, iPS세포처럼 마우스유래의 feeder 세포를 이용할 경우에서도 문제 없이 사용할 수 있다.본 제품은 1샘플에 대해서 4 set의primer를 사용하여 Real Time PCR로 얻은 mtDNA와 nDNA의 Ct값의 차이 대비mtDNA의 copy number를 상대 정량으로 산출한다. 본 제품을 사용함으로써 mtDNA copy number 변동을 쉽게 모니터링할 수 있어 iPS세포등의 다능성 세포에서 줄기 세포 방향으로 분화·유도하는 과정에 증가하는 것으로 알려진 mtDNA copy number 모니터링 등에 유용하다.본 제품에 포함되는 각 primer set는 MightyAmp™ for Real Time (TB Green™ Plus) (Code R075A/B) 및 TB Green™ Premix Ex Taq™ II (TliRNaseH Plus)(Code RR820A/B)와 함께 사용하는 것을 추천한다. 해석에는 Microsoft Office Excel에서 작성된 mtDNA copynumber 산출용 파일을 이용할 수 있습니다.
□ 내용 (각 primer 50 반응분)
1. ND1 Primer Mix (10 μM each)*1 50 ㎕
2. SLCO2B1 Primer Mix (10 μM each)*250 ㎕
3. ND5 Primer Mix (10 μM each)*1 50 ㎕
4. SERPINA1 Primer Mix (10 μM each)*250 ㎕
*1 미토콘드리아 DNA (mtDNA)용프라이머*2 핵 DNA (nDNA)용 프라이머
□ 보존
-20 ℃ ※ 권장하는 방법으로 보관하며, 수령 후 1년이내에 사용할 것※ 단기간 (1개월이내)에 반복해서 사용하는 경우 4 ℃에서 보관하고, 방부제가 들어있지 않으므로 오염에 주의할 것
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mye-mail:pjlitao@tom.com
碳14试剂检测方法
(1) 静坐25分钟后,受试者直接向集气瓶内呼气,患者呼气后集气瓶中的液体由粉红色变成无色为止,或者患者持续呼气时间已经达到3分钟后即可停止呼气。
(2) 向集气瓶中加入4.5ml稀释闪烁液后,加盖旋紧,置于液闪仪中进行检测。
(3) 检查过程中患者应当保持安静,剧烈运动后血中的酸碱度变化可能影响同位素标记CO2的呼出,另外在患者呼气时应当嘱咐患者注意不要将集气瓶中的液体误吸入口腔。
安全性
碳14尿素呼气试验应用于临床十几年,未见到明显的不良反应的报道。专业性评估报告证实碳14呼气试验对患者和操作人员的辐射危险可忽略不计,临床上可以安全使用。
有几个问题想问问大家:
1.我看到相当多文献中,结束反应用的是抽滤,由于条件的限制,我们这里没有该装置,所以就取了少数文献中的方法,用12000G离心10min结束反应,然后沉淀TRIS-HCL洗涤3次。测量时在沉淀所在的EP管中加入闪烁液(该闪烁液的配方适用于样品含水量较少的情况),每管1ML。请问大家,这样结束反应行吗?沉淀是否应该烘干?
2.我用的液闪仪计数不是很稳定,如果进行校正,尤其是读数比较小的时候(如只有数百),以减少误差?
3.加入闪烁液后,是否应该避光放置一段时间后再测量?
谢谢!
mye-mail:pjlitao@tom.com
十分感谢!!!
有几个问题想问问大家:
1.我看到相当多文献中,结束反应用的是抽滤,由于条件的限制,我们这里没有该装置,所以就取了少数文献中的方法,用12000G离心10min结束反应,然后沉淀TRIS-HCL洗涤3次。测量时在沉淀所在的EP管中加入闪烁液(该闪烁液的配方适用于样品含水量较少的情况),每管1ML。请问大家,这样结束反应行吗?沉淀是否应该烘干?
2.我用的液闪仪计数不是很稳定,如果进行校正,尤其是读数比较小的时候(如只有数百),以减少误差?
3.加入闪烁液后,是否应该避光放置一段时间后再测量?
谢谢!