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제품특징
□ 특징
● 일본 후생노동성에서 공지한 공정법의 염기서열을 이용한 primer, Dual-Labeled Probe를 채용한 Real Time PCR kit
● 사용이 편리한 premix 형태로 제공
● 정량이 가능한 Positive Control을 포함한 all-in-one kit
□ 제품설명
Kudoa septempunctata (18S rRNA) qPCR Detection Kit은 후생노동성 의약식품국 식품안전부 감시안전과에서 공지한 「Kudoa septempunctata의 검사법에 대해(잠정판)」 ( 0711 제1호)(이하「공정법」이라고 기재한다)와 동일한 염기 서열의 primer와Dual-Labeled probe를 사용한 Kudoaseptempunctata 검출 제품이다. Kudoa septempunctata는 물고기의근육에 기생하는 점액 포자충이며, 넙치에 의한 식중독 원인 중의 하나로 생각되고 있다. 본 제품의 증폭 반응에 이용하는 Premix Ex Taq은 anti-Taq 항체를 이용한 hot start PCR용 효소, TaKaRa Ex Taq® HS와Real Time PCR에 최적화된 버퍼를 이용하여, 비특이적 증폭을 억제해, 높은 증폭 효율, 높은 검출 감도로 Real Time PCR를 실시할 수 있다. 또, 반응 시간이 짧은 고속 PCR에도 적용가능하다. 증폭 산물 검출에는 공정법과 같은 FAM (reporter)/TAMRA (quencher)로표지 된 Dual-Labeled probe를 채용하고 있다. Dual-Labeledprobe는 5’말단을 형광 물질 (FAM 등)로, 3’말단을 quencher 물질(TAMRA 등)로 수식한oligonucleotide이다. Annealing 조건하에서 Dual-Labeled probe는 주형 DNA에 특이적으로 결합하지만, 형광은 quencher 에 의해서 억제된다. 신장 (extention) 반응시 Taq DNA polymerase가 가지고 있는 5’→3’ exonuclease 활성에의해, 주형 DNA에 결합한 Dual-Labeled probe를 분해하여, quencher에 의한억제를 없애 형광을 발하게 한다. 이 형광 강도를 측정하여 증폭 산물을 모니터 할 수 있다.
□ 내용
Kudoaseptempunctata (18S rRNA)qPCR Detection Kit (Code RR260, 20㎕ 반응시 50회분량) | |
1.Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)(2×conc.) | 500 ㎕ |
2.Kudoa Primer/Probe Mix (10×conc.)*1 | 100 ㎕ |
3.dH2O | 1 ㎖ |
4.ROX Reference Dye (50×conc.)*2 | 20 ㎕ |
5.ROX Reference Dye II (50×conc.)*2 | 20 ㎕ |
6.Kudoa Positive Control (2.5×107 copies/㎕)*2 | 50 ㎕ |
7.EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ㎖ × 2개 |
*1 형광표지 probe(FAM-TAMRA 표지)를 포함하고 있으므로, 차광에 유의해 주세요. *2 Real Time PCR 반응액(1~5)에 잘못해 혼입되면, 올바른 검출 반응을 실시할 수 없으니, 오염에 특별히 주의한다.
□ 보존
- 20℃ Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)는 융해 후 4℃로 보존하며, 반복적인 동결 융해를 피해주십시오. 4 ℃에서 6개월간 안정합니다. 장기 보존이 필요한 경우에는 최초 융해시 소량씩 분주하여 -20 ℃에 보관하는것을 추천합니다.
□ 본 제품 이외에 필요한 시약, 기기(주된 것)
Real Time PCR용 기기 및 전용 tubeThermal Cycler Dice Real Time System II (Code TP900/TP960)Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code TP700/TP760)Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies) 등탁상용 원심분리기 200 μl, 20 μl, 10 μl 각 micropipetteMicropipette 용 tip(필터 장착 tip)
□ Kudoa Positive Control를 이용하는 정량 해석에 대해
본 제품에 포함되어 있는 KudoaPositive Control은 다카라바이오에서 합성한 Kudoa septempunctata의배열을 가지는 plasmid DNA이다.EASY Dilution(for Real Time PCR)을이용하여 Kudoa Positive Control을 단계 희석하여, 검량선을작성하면 정량 해석이 가능하다. [※ 해석법에 대해서는 공정법을참조해 주세요.]
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基本参数
外形尺寸(L×W×H):490×360×430mm
反射紫外光源波长:254nm、365nm
透射紫外光源波长:300nm
紫外光透射面积:150×200mm
可见光透射面积:230×190mm
特点:
暗箱式,无需暗室,可全天候使用;
*抽屉式灯箱互换,使用方便,防止污染;
*具有实时预览、自动对焦功能;
*紫外滤光镜:兼容EB、Sybr 、GoldView等大部分荧光染料;
兼容tif、jpg、bmp、gif、pcx等诸多图像格式。
系统配置:
进口高分辨率数码相机;
进口专业分析软件;
奔4级高配置品牌计算机;
高分辨率彩色喷墨打印机。
技术指标:
*CCD分辨率:3072×2304像素;
像素密度:8位(256级灰度);
像素大小:4.7×6.1µm;
*数码变焦:约4.1倍(结合光学变焦时,数码变焦最高约为16倍);
检测信噪比:≥66 dB ;
*检测灵敏度:>1 pg EB染色的双链DNA;
连续曝光时间:0.0005~900s;
微距自动调焦:5-50mm微距调焦;
*可进行1D、2D、AFLP等实验结果的专业分析。
功能强大的分析软件:
1.图象处理功能:
调整图像大小、调整亮度、调整灰度、调整对比度;
图像旋转、图像反色、图象裁切、图象缩放。
2.1D分析功能:
*分子量、浓度计算(可按连接点、线性衰减、指数衰减等三种方法得出结果);
*可计算出每根条带的迁移率(Pix),强度(Int),净面积值,最大面积值和百分比;
条带标注、文字与图形标注;
泳道的自动识别;
*弯曲泳道的手动识别;
可在同一屏幕显示出所有泳道所有条带的灰度值、分子量、浓度、面积 、迁移率;
*可显示分子量的标准曲线图;
可添加各种文字、箭头、图形符号的注解。
3.*AFLP,RFLP,PCR聚类等同源性遗传树分析:
多肽性分析;
差异显示分析;
自动给出遗传树状图。
4.*2D分析功能:
可计算出每个点的迁移率(Pix),强度(Int)和百分比;
根据标准蛋白点自动计算分子量和等电点PH值;
可求双向电泳某点的面积、直径、灰度值;
自动统计点的总数,计算面积、灰度值;
可分析双向电泳三个重复样品的平均数、差异位置,根据平均数生成新的图形。
5.克隆计数(蓝白斑筛选)
6.菌落、斑点杂交
7.*数据结果与MS Excel无缝联接
8.软件支持win98/Me/2000/xp
据说是见光分解,不过能分解到啥地步就不知道了,至少实验室里的EB都是避光保存了,没听说过那个实验室里把EB放到阳光下晒着。
不过一般接触到皮肤的话如果没有伤口应该没问题(话说我一同学上次一不小心弄了一脸的EB擦干净后就出去晒太阳了.......不过现在貌似没啥事,不知道以后会不会有事...)
但是LZ接触的时候最好还是带上手套,觉得不保险的话就带两层,毕竟那东西是强致癌的。
哈哈不过也不用太害怕,一般实验室在跑电泳的地方都会弄出个EB的污染区,操作时注意下自我的防护,没啥大问题的(话说做实验的有那个是没毒的)。
3,预热30分钟
3:获取并处理图像
测定图像光密度
操作步骤,电脑电源
2,获得图像并保存
4:
1,30s后按autoexpose or manualexpose
5. 观察并调整曝光时间. 打开Quality One软件:核酸琼脂糖凝胶电泳
X光胶片
软件功能.调iris. 开启成像系统.打开开关,之后按freeze拍照.xr
4。
BIO-RAD 凝胶成像系统 Universal Hood Ⅱ
仪器性能,保存,focus调节图像清晰度BIO-RAD凝胶电泳成像系统的操作方法
1.按live#47.接通电源和照相机电源
2,文件菜单中gel-doc,并对图像进行光密度分析
5;focus,zoom .打开软件
今天看DNA胶时位置放偏了,重新放胶后,,那个紫外穿透键transUV就一直闪,成不了像了。。。。什么原因呢。。

