
【求助】CsCl梯度密度离心纯化病毒的试验分析
2021-07-28
问题描述:
我最近在做CsCl梯度密度离心纯化病毒的试验,超速离心完后确实有乳白色条带,但是这个带不在1.25和1.4密度的CsCl间,将乳白色的带吸出后测的密度才1.11,跟理论值1.33差很多啊。各位高人分析下是什么原因啊?你们说这个带是不是病毒带啊?如果不是那为什么会这样呢?请多多指教,多谢!
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victoh


是否破坏了分层,或者操作时吸了低密度部分的液体?

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songkui2001


有可能不是病毒带,是一些杂蛋白。在吸取条带前用密度仪测一下白色条带所在位置的密度,就可以确定是不是病毒了。或者将吸出的条带做一个PCR或SDS-PAGE胶就可以确定了。多试一下吧,别灰心。相信能做出来的。

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biosun


谢谢songkui2001和victoh的提示,我在继续做。现在的情况是,虽然密度低,但是它们可以从新感染293细胞出现明显的CPE.各位说说这到底说明了什么问题啊?

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biosun


而且紫外吸收测试也表明既有蛋白也有DNA。现在又没电镜。所以不知道该如何确定是不是我们要的病毒了。各位同仁有什么好办法吗?
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