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经过灭菌锅灭菌的双蒸水能除去DNA吗?
2004-03-08
问题描述:

经过灭菌锅灭菌的双蒸水能除去DNA吗?高温高压后DNA会降解吗?降解是什么原因啊?不能降解为什么做PCR都有用灭菌水的呢?

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wasteam
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我认为高温高压后DNA不会降解,因此灭绝锅灭菌的双蒸水不能除去DNA。做PCR用灭菌水的原因是如果不灭菌的话,混有杂菌可能会有酶,导致PCR失败。一家之言。
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yzm3102001
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那留下的DNA不是也可以做为摸班啊!结果就很难分析了啊!怎么办啊?
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dxyljq
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可以,在这样的高温高压的环境下,象DNA和蛋白质这样的生物大分子结构会被不可逆的破坏,所以灭菌双蒸水可以用作PCR反应。
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wasteam
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灭菌双蒸水经过两次蒸馏,一般不会混有DNA,除非你不小心操作时候把双蒸水弄污染了,而你又不知道,所以一般PCR最好要有阴性对照(模板为双蒸水)和阳性对照(一定能扩增出来的DNA片段),这样才能保证你所用的水有没有被污染,同时又可以证明你的Taq酶是否失效。
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liven
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我个人认为DNA是耐受不了高温高压的。在PCR反应中DNA的污染主要来源为模板制备过程和PCR反应体系的配制过程。讲个笑话,做Y染色体微缺失研究的大多为从事妇产科专业的女同志,原因就是男同志容易污染标本,呵呵!
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atgc
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提取质粒DNA时,过长时间地暴露于碱或热中就会导致不可逆的变性,更何况是最低121度最少15分钟的高压灭菌呢!DNA早已变成了核苷酸了吧!
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