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牙髓细胞的培养 1、培养用液： PBSA； 胶原酶：I型，用D－Hank’s液配制，625U/ml； 培养液：DMEM＋10％FBS； 2、Protocol： u取拔除的正畸牙或阻生牙（年龄小者较佳），尽量完整的取出牙髓，置于培养皿中，用PBS冲洗； u将牙髓放入离心管，加入胶原酶2－3ml/牙， u加入等量培养液，吹打至单细胞，离心，重悬，接种，牙/6well； 牙周细胞的培养 1、培养用液： PBSA； 胶原酶：I型，用D－Hank’s液配制，625U/ml； 培养液：DMEM＋10％FBS； 2、Protocol： u取拔除的正畸牙或阻生牙（年龄小者较佳），置于培养皿中，用手术刀仔细刮除附着在牙根上的牙龈组织，然后用PBS反复冲洗，以去除残余组织以及牙根表面的血细胞； u将牙放入离心管，加入胶原酶2－3ml/牙， u加入等量培养液，仔细吹打牙根表面，收集细胞，离心，重悬，接种，牙/6well； *培养获得的细胞是牙周膜细胞和成牙骨质细胞的混合体! PS： u年龄对细胞产量以及活力影响较大，最好选用年龄在10－14岁之间的正畸牙或阻生牙； u如果选用大鼠牙齿作为培养目标，培养液应稍作调整，基本原则是抑制细胞的衰老，具体做法是：适当降低血清浓度（选用进口血清最佳），如果降低血清浓度后，细胞增殖减慢，可加入促进细胞增殖的因子（例如BPE25ug/ml等）。
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发布于 ： 2018-12-26
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