DESCRIPTION:
Convenient,costeffectivesamplerpackcontainingfourDPc10peptidederivatives(200µgeach)asfollows:
- DPc10Peptide(Cat.A010-514)
- DPc10InactivePeptide(Cat.A010-515)
- FluoresceinDPc10Peptide(Cat.A010-516)
- FluoresceinDPc10InactivePeptide(Cat.A010-517)
DPc10peptideisa36-residuepeptidecorrespondingtotheGly2460-Pro2495regionofrabbitRyR2.ItinteractswithRyR2andprovokesabnormalchannelactivityusuallyseeninmutantRYR2channelsassociatedwithCPVT.ThispeptidecanbeusedtoprovokepathologicalRyR2behaviourinwild-typeRyR2channels.ThepeptidebindsataninterfacebetweendomainsofRYR2,“unzipping”thesedomainsandalteringchannelfunction.TheDPc10bindingsiteispreservedinRyR2fromallmammalianspecies.DPc10(0.5-5µM)elevatesCa2+-leak,increasesCa2+-sparkactivity,ispro-arrhythmic,andprovokeshypertrophyincardiacmyocytes.
DPc10inactivepeptideisa36-residuepeptidethatdiffersfromDPc10(Gly2460-Pro2495,rabbit)atoneposition(R2475S)andrepresentsthesequenceofaknownCPVTmutantRyR2domain.ThispeptidebindsweaklyorfailstobindtotheDPc10interfaceanddoesNOTaffectchannelfunction.ItservesasanegativecontrolforresearchprojectsusingDPc10peptide.
DPc10peptidesinthecurrentformarenotcellpermeable.TheproductsareusefulinapplicationsthatpermitaccesstoRyR2directly(viawholecellpatch,skinnedcells,blacklipidmembrane,vesicles,orupondeliverytocytoplasm).
ReadDPc10Publications
DATASHEET:
| Solubilisation | DMSO |
| Storage | Storeassuppliedat-20°Cforupto1year.Storedesiccated.Makefreshsolutionspriortouse. |
| Datasheet | A010-518ReadDPc10Publications |
| MSDS | A010-518 |
| Notes | Theproductswerepurifiedinacetonitrileandwatercontaining0.1%trifluoroaceticacid(TFA)priortolyophilisation.Theproductswillthereforebepresentasitstrifluoroaceticacidsalts. *Peptidesaresuppliedbynetpeptideweight.Whilstthepurityofthematerialhasbeenshowntobe>95%,thenetpeptidecontentislowerduetocounterionsandresidualwaterpresentinthematerial.Tocompensateforthistheamountofpeptideweighedoutisadjustedsothattheamountofactivematerialreceivedisexactlyasstatedonthevial.Thismeansthatthetotalmasswillbeinexcessof200µg,buttherewillbeexactly200µgoftheactivepeptideinthevial.Theremainderoftheweightisduetothecounterionsandresidualwater. |
| Regulatorystatement | Productforresearchuseonly.Notintendedfordiagnosticortherapeuticuse. |
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两个CEX方法A和B测定同一单抗，结果碱性峰比例差不多，酸性峰比例相差约7%，相应主峰也差了7%左右。
具体来说，A方法酸性峰高，主峰低，碱性峰稍微低点；B方法酸性峰低，主峰高，碱性峰稍微高点；另外也做了CIEF，结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来，AB两个方法的峰性和数量差不多，就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液，一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下：
1.两个方法哪个方法更准确，是以酸性峰高的为准还是什么？为什么？
2.这显著差异是由方法造成，具体原因是什么？柱子？
3.CIEF的结果和A方法更接近，是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好（因为CIEF更快更方便）？
欢迎讨论~
纠正下，A方法用的是Tosoh的柱子，B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料，10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少，这次信手用用，结果发现差异很大
那我现在就考虑，在以后方法开发过程中，除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离，还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度，尤其是主峰和邻近峰的分离度，获得最大分离度，自然可以做到主峰尽可能纯，但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧！
另外，CIEF和CEX方法原理还是有点差异的，所以分的是不同的异质体，原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段，哪个方法才是又快又准。CIEF（iCE280)一般15分钟一个样，比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果，是不是真的完全可以取代CEX呢？CEX分离出的峰远比CIEF的多！
欢迎大家继续讨论~
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。
常用流动相加酸碱后PH的总结，希望大家能够提供一点自己测过的结果，谢谢先
这就是说不用酸碱预处理吗？
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力，请问又经验的战友应该是多少？
Whatman的网站上：
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.
DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.
附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.
lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用pH计测量？谢谢!
有了源数据之后把源数据按照大小排列，
选中源数据区域-->ALT+A1-->选中图标区右键-->更改图表类型-->散点图
