C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells
Catalog No. mGFP-6085
Suggested Medium: Smooth Muscle Cell Medium /w Kit – 500 ML
Catalog No. M2268
Product Description
C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells from Cell Biologics are isolated from C57BL/6-GFP-Tg(CAG-EGFP)1Osb/J mouse brain tissue of pathogen-free laboratory mice. C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells are grown in T25 tissue culture flasks pre-coated with gelatin-based coating solution for 2 min and incubated in Cell Biologics Culture Complete Growth Medium generally for 3-7 days. Prior to shipping, cells at passage 1 are detached from flasks and immediately cryo-preserved in vials. Each vial contains at least 1x106 cells per ml and is delivered frozen. The cells are characterized by immunofluorescent method with antibodies to α-smooth muscle actin. C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells are negative for bacteria, yeast, fungi, and mycoplasma. Cells can be expanded on a multiwell culture plate ready for experiments under the cell culture conditions specified by Cell Biologics (Cells may be expanded for 2 or 3 passages at a split ratio of 1:2 under the cell culture conditions specified by Cell Biologics). Repeated freezing and thawing of cells is not recommended.
Laboratory Applications
C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells can be used in assays of standard biochemical procedures performed with cell cultures include RT-PCR, Western blotting, immunoprecipitation, immunofluorescent flow cytometry, or generating cell derivatives for desired research applications.
Storage of Cell Biologics Products
Cell Biologics ships frozen cells on dry ice. On receipt, immediately transfer frozen cells to liquid nitrogen (-180 °C) until ready for experimental use. Live-cell shipment is also available on request.
Never can primary cells be kept at -20 °C.
Authorized Uses of Cell Biologics Products
C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells from Cell Biologics are distributed for research purposes only. Our products are not authorized for human use, for in vitro diagnostic procedures, or for therapeutic procedures. Transfer or resale of any Cell Biologics’ cells or products from the purchaser to other markets, organizations or individuals is prohibited by Cell Biologics without the company’s written consent. Cell Biologics’ Terms and Conditions must be accepted before submitting an order.
Disclaimer
Although C57BL/6-GFP Mouse Primary Brain Vascular Smooth Muscle Cells are isolated from laboratory mice testing pathogen-free, investigators should handle the cells that they receive from Cell Biologics with caution and treat all animal cells as potential pathogens, since no test procedure can completely guarantee the absence of infectious agents.
Warranty and Liability
Cell Biologics’ guarantee applies only to your purchase of Cell Biologics’ cells with Cell Biologics’ Media and Coating Solution for appropriate cell culture and cell testing following Cell Biologics’ online protocols within 35 days from the date of product delivery.
Cell BIOLOGics公司提供高质量的基因改造小鼠及正常小鼠原代内皮细胞，小鼠干细胞，小鼠原代上皮细胞，小鼠骨髓细胞，小鼠胚胎细胞，小鼠白细胞和其它小鼠细胞。为科研者的研究提供高质量的原代细胞，并针对实验中的问题提供更多有效的和低成本的方法。 Cell Biologics细胞生物制剂公司总部位于美国芝加哥，是全球独家提供Jackson Lab基因敲除小鼠原代细胞的专业公司，产品已获美国农业部SPF认证，并经中国进出口商品检验检疫局检验准许进口。 自成立以来，Cell Biologics已开发出13个品系1,000多种可直接使用的Jackson Lab基因敲除小鼠、正常野生型小鼠、大鼠原代细胞，必将填补细胞生物学 界研究的空白。另外，Cell Biologics拥有AAALAC认证的动物实验室，提供Jackson Lab与国外其他著名实验室所有允许商用的基因敲除小鼠原代细胞分离服务。
CellBiologics是原代培养细胞和细胞培养产品的主要制造商。我们提供各种高质量的人和动物原代细胞，包括内皮细胞，上皮细胞，肿瘤细胞和干细胞，以及优化的细胞培养基和其他相关产品。小鼠原代内皮细胞最初是由CellBiologics提供的，可以根据特定的科学需求进行定制订购。您可以指望我们的高质量定制细胞分离服务！该公司还在开发针对炎性疾病的治疗平台和具有治疗活性的生物制剂的新型输送系统。我们的产品和服务 原代细胞疾病模型细胞培养基和试剂先进技术服务腺相关病毒（AAV）生产服务内皮特异性腺病毒过表达系统通用服务AAV产品-EC，神经，免疫，癌症相关基因新产品和定制服务下一代测序库生成服务ATAC-Seq库生成服务ChIP-seq库RNA-seq文库所有新产品刊物 Tie2-Notch1信号轴调节内皮骨髓小生境的再生。血液学。2019三月28。抑制MicroRNA-155支持氧-葡萄糖剥夺后的内皮细胞紧密连接完整性。JAmHeartAssoc。2018年6月26日;7（13）。主要和永生化的巨噬细胞对鼠诺如病毒感染的比较转录组学反应。JImmunol。2018年6月15日;200（12）：4157-4169。Ena/VASP蛋白通过促进跨内皮迁移过程中的尿布分离来调节活化的T细胞运输。ProcNatlAcadSci美国A.2017年4月4日;114（14）：E2901-E2910。Mas1受体介导的血管内皮信号传导机制。动脉血栓栓塞血管生物学。2017年3月;37（3）：433-445。
Cellbiologics有数百种不同的可直接用于体外试验的动物源和人源的原代细胞。包括：小鼠、大鼠、兔、猪和食蟹猴等动物源及人源各类原代内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞、干细胞、骨髓间充质干细胞、白细胞以及巨噬细胞等。还提供高质量的人、动物原代细胞完全配套培养基产品。热销产品货号规格CompleteEndothelialCellMedium/wKit(withVEGF)M1168500mlEndothelialCellGrowthSupplement-ECGS(500X)(仅限港澳地区销售)11661MLEndothelialCellMedium-SerumFree/wKitM1266SF500mlGelatin-BasedCoatingSolution-readytouse6950100MLCompleteEndothelialCellMedium/wKitM1266500mlCompleteEpithelialCellMedium/wKitM6621500mlC57BL/6MousePrimaryLungMicrovascularEndothelialCellsC57-6011FrozenVial(1x106Cells)C57BL/6MousePrimaryKidneyGlomerularEndothelialCellsC57-6014GFrozenVial(1x106Cells)CompleteCellCultureMedium/wKitM5567500mlCD1mouseprimarylivercellsCD-1018FrozenVial(1-2x106Cells)C57BL/6MousePrimaryCoronaryArteryEndothelialCellsC57-6093FrozenVial(1x106Cells)EndothelialCellMedium-SerumFree/wKitM1168SF500mlEndothelialCellBasalMediumM1168b500mlC57BL/6MousePrimaryRetinalMicrovascularEndothelialCellsC57-6065FrozenVial(1x106Cells)
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
1、弱酸和它的盐（如：HAc---NaAc）的水溶液组成；
2、弱碱和它的盐（如：NH3·H2O---NH4Cl）的水溶液组成；
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如：NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。
酸碱缓冲溶液的选型一般应根据具体情况进行选择。缓冲酸性可选用碱性缓冲液，缓冲酸性可采用碱性缓冲液。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
【酸碱缓冲溶液】由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为酸碱缓冲溶液。
两个CEX方法A和B测定同一单抗，结果碱性峰比例差不多，酸性峰比例相差约7%，相应主峰也差了7%左右。
具体来说，A方法酸性峰高，主峰低，碱性峰稍微低点；B方法酸性峰低，主峰高，碱性峰稍微高点；另外也做了CIEF，结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来，AB两个方法的峰性和数量差不多，就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液，一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下：
1.两个方法哪个方法更准确，是以酸性峰高的为准还是什么？为什么？
2.这显著差异是由方法造成，具体原因是什么？柱子？
3.CIEF的结果和A方法更接近，是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好（因为CIEF更快更方便）？
欢迎讨论~
纠正下，A方法用的是Tosoh的柱子，B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料，10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少，这次信手用用，结果发现差异很大
那我现在就考虑，在以后方法开发过程中，除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离，还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度，尤其是主峰和邻近峰的分离度，获得最大分离度，自然可以做到主峰尽可能纯，但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧！
另外，CIEF和CEX方法原理还是有点差异的，所以分的是不同的异质体，原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段，哪个方法才是又快又准。CIEF（iCE280)一般15分钟一个样，比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果，是不是真的完全可以取代CEX呢？CEX分离出的峰远比CIEF的多！
欢迎大家继续讨论~
有了源数据之后把源数据按照大小排列，
选中源数据区域-->ALT+A1-->选中图标区右键-->更改图表类型-->散点图
pH(1)=pKa+lg[c(CH₃COONa)/c(CH₃COOH)]=pKa=4.74
通HCl后,溶液是c(CH₃COOH)=0.2mol/L、c(NaCl)=0.1mol/L的混合溶液,溶液pH按照弱酸溶液pH的求法求.
c(H⁺)=√[Ka*c(CH₃COOH)]=√(10^-4.74*0.2)=0.00191(mol/L)（采用了近似公式）
pH(2)=-lg{c(H⁺)}=2.72
两个pH求得,那么pH的变化量也就可得了.pH的变化量=|pH(2)-pH(1)|=|2.72-4.74|=2.02
1）PH缓冲溶液作用原理和pH值
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液.弱酸及其盐的混合溶液（如HAc与NaAc）,弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液.
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗：
所以溶液的pH值几乎不变；当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化.
2）PH缓冲溶液的缓冲能力
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用.这说明它的缓冲能力是有一定限度的.
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关.0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大.关于这一点通过计算便可证实.但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用.
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH最小,缓冲能力大.不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用.缓冲溶液的pH值可用下式计算：
此时缓冲能力大.缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用.对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内.
弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1
弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76～5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用.配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时（c（HAc）/c（NaAc）=1.
3）PH缓冲溶液的配制和应用
为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液.
以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法.对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法.
PH缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2离子时,可用下面的反应：
白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg（OH）2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应.
