+,Epigentek/EpiQuik Hydroxymethylated DNA Immunoprecipitation (hMeDIP) Kit/P-1038-96/96 reactions,酸碱缓冲液,Epigentek,epigentek group inc,,96 reactions蚂蚁淘商城

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Epigentek/EpiQuik Hydroxymethylated DNA Immunoprecipitation (hMeDIP) Kit/P-1038-96/96 reactions

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Epigentek/EpiQuik Hydroxymethylated DNA Immunoprecipitation (hMeDIP) Kit/P-1038-96/96 reactions

品牌 /

Epigentek

货号 /

P-1038-96

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InputType:	DNA
ResearchArea:	DNAMethylation
TargetApplication:	Immunoprecipitation
VesselFormat:	96-WellPlate
100%Guarantee:	6months

ProductOverview

TheEpiQuik™HydroxymethylatedDNAImmunoprecipitation(hMeDIP)Kit isacompletesetofoptimizedbuffersandreagentstocarryoutasuccessfulhMeDIPprocedurefortheselectiveenrichmentofDNAfragmentscontaining5-hydroxymethylcytosine(5-hmC)inahighthroughputformatusingDNAisolatedfromanyspecies.ThehydroxymethylatedDNAthatisenrichedwiththiskitcanbeusedinvariousdownstreamapplicationsincludingPCR(hMeDIP-PCR)andmicroarrays(hMeDIP-chip)forinvestigatinggene-specifichydroxymethylationincellsortissues.

About5-Hydroxymethylcytosine
5-hmCisamodifiedformofcytosine,recentlydiscoveredinanimaltissues,and playsanimportantanddifferentrolethan5-mCinregulationofDNAmethylation,chromatinremodeling,andgeneexpression,particularlyinbrain-specificgeneregulation.Quiterecently,5-hmCwasobservedtobelinkedtoepigeneticreprogramminginmammalianzygotes.However,theexactfunctionsof5-hmChavenotyetbeenfullyidentifiedsincegene-specificdistributionof5-hmCisunknownduetotheinABIlityofcurrentlyusedDNAmethylationanalysismethodstodistinguishbetween5-hmCand5-mC.

ProductFeatures
Becauseofthepresenceof5-hmCinDNAwithunclearfunctionsingeneregulationandbecauseofthediscoveryofenzymesthatproduce5-hmC,itiscrucialtoidentifyhydroxymethylationstatusinspecificgeneloci,whichwouldhelptobetterunderstandmethylation-basedepigeneticregulationofgenefunctions.Toachievethis,EpigentekhasdevelopedaninnovativemethodtocaptureDNAfragmentscontaining5-hmC,andincorporatedthismethodintoitsEpiQuik™HydroxymethylatedDNAImmunoprecipitation(hMeDIP)Kit.Thiskitusesahighaffinity5-hmCantibodytoselectivelycapturedouble-strandedorsinglestrandedDNAfragmentscontaining5-hmC.Thekithasthefollowingfeatures:

Extremelyfastandconvenientprotocol withatotalproceduretime(frominputsampletoready-to-usehydroxymethylatedDNA) oflessthan3hours,whichincludes aminimalhandlingtimeoflessthan20minutes.
FlexIBLe96stripwellmicroplateformatmakestheassayveryeasytohandle:manualmethodwithonereactionatatimeorhighthroughputmethodwith96reactionsatatime.
Highlyefficientenrichmentratioofpositive/negativecontrol>1000.
LowDNAinputrequirementofaslowas0.1µgperreaction.
Highreproducibilitythroughpre-optimizedhMeDIPconditions.
CompatiblewithvariousdownstreamanalysisworkflowsincludinghMeDIP-PCRandhMeDIP-chip.

PrincipleandProcedure
TheEpiQuik™HydroxymethylatedDNAImmunoprecipitation(hMeDIP)KitcontainsallreagentsrequiredforcarryingoutasuccessfulhMeDIPprocedureusingDNAisolatedfrommammaliancellsortissues.ThiskitincludesapositivecontrolDNAfragment,anegativecontrolnon-immuneIgG,andcontrolprimersthatcanbeusedwiththepositivecontroltodemonstratetheenrichmentefficacyforhydroxymethylatedDNAwiththekitreagentsandprotocol.ThepositivecontrolDNAcontaining5-hmCcanbeimmunoprecipitatedbya5-hmCantibodybutnotbyanon-immuneIgG.InthishMeDIP,immunoprecipitationof5-hmC-enrichedDNAfragmentsisprocessedinamicroplateunderoptimizedreactionconditions,whichenableshMeDIPtobecompletedwithin3hourswithhighefficiency.ImmunoprecipitatedhydroxymethylatedDNAisthencleaned,released,andeluted.ElutedDNAcanbeusedforvariousdownstreamapplicationsincludingPCR(hMeDIP-PCR)andmicroarray(hMeDIP-chip).

Easy,Fast,andFlexible
TheentirehMeDIPprocedurehaseasy-to-followstepsforconvenienceandspeed,whichcanbecompletedin3hoursfromDNAshearingtohMeDNAelution.The96stripwellmicroplateformatpermitsmanualhandlingbydoing1reactionatatimeorhighthroughputhandlingbydoing96reactionsatatime.HydroxymethylatedDNAfragmentsandnon-immuneIgGareincludedwiththekitasthepositivecontrolandnegativecontrol,respectively,forhydroxymethylatedDNAenrichmentfromanyspeciesincludingmammalian,plant,fungal,bacterial,andviraltypes.

SelectiveandHighEnrichment
TheuniqueprocedureandproprietarykitcompositionsallowforaselectiveandhighenrichmentofhydroxymethylatedDNAfromgenomicDNAsamplesforgene-specifichydroxymethylationanalysis.CombiningrealtimePCRwiththiskit,5-hmCenrichmentintheOCT4promoterregionwasdetectedtobe110timeshigherthanthatintheGAPDHpromoterregion(seeFig.2),indicatingthattheOCT4promoterishydroxymethylated.Thereisnocross-reactivitytomethylcytosineandunmethylatedcytosinesothatonlyhydroxymethylatedDNA(5-hmC)isenriched(seeFig.3).

CompatibleWithMeDIP
TheEpiQuik™hMeDIPkitcanbeusedwithMeDIPproceduresforasimultaneousanalysisofhydroxymethylatedandmethylatedstatusesofspecificgeneloci.

Responsive,Reliable,andPractical
Basedonitsworkingprincipleandthemicroplateformat,thekitcanbeusedinahighthroughputmannerwithDNAfromanyspeciesinavarietyofformsincludingculturedcells,freshandfrozentissues,paraffin-embeddedtissues,bloodsamples,andbodyfluidsamples.Todemonstratethecapabilitiesofthekit,ithasbeensuccessfullyusedforcapturinghydroxymethylatedDNAfractionfromgenomicDNAisolatedfromhumanbraintissues.ThepercentcontentofhydroxymethylatedDNAinhumanbrainsenrichedwiththekit(0.80%)iscomparabletothatmeasuredwiththe EpiQuik™HydroxymethylatedDNAQuantificationKit (0.67%),suggestingthatthehydroxymethylatedDNAfractionisfullycapturedwiththehMeDIPkit.

Fig.1.SchematicprocedureoftheEpiQuik™HydroxymethylatedDNAImmunoprecipitation(hMeDIP)Kit.

Fig.2. Sensitivedetectionofgene-specifichydroxymethylationbyhMeDIP-PCR |HumanbrainDNA(500ng)wasfragmentedto200-600bps.ThefragmentedDNAwasusedforhydroxymethylatedDNAenrichmentwiththeEpiQuik™hMeDIPKit.ElutedDNAwasanalyzedbyrealtimePCRwithprimersspecificallyforOCT4orGAPDHsequencesinthepromoterregions.ResultsshowthatthepromoterregionishydroxymethylatedinOCT4butnotinGAPDH.Fold-enrichmentrepresentstheamountofrecoveredDNAandwascalculatedbasedontheCtValue.

Fig.3. SelectiveenrichmentofhydroxymethyatedDNAwiththeEpiQuik™hMeDIPKit |50pgofunmethylated,methylated,andhydroxymethylatedDNAcontrolwereeachspikedintofragmentedhumangenomicDNA(500ng).hMeDIPwasprocessedwiththe5-hmCantibodyandnon-immuneIgGincludedinthekit.ElutedDNAwasanalyzedbyrealtimePCRwiththecontrolprimersincludedinthekittodetectthepresenceofspikedcontrolDNA.Fold-enrichmentrepresentstheamountofrecoveredcontrolDNAandwascalculatedbasedontheCts.

	EpiQuik™hMeDIP	Supplier1"shMeDIP	Supplier2"shMeDIP
WorkingPrinciple	Immunocapture	Immunocapture	Immunocapture
WorkingFormat	Microplate-based	Beads-based	Beads-based
MaxNumberofReactionsPerRun	96	10	16
HighThroughputCapable	Yes	No	No
Convenience(AssaySteps)	12steps	20steps	28steps
TotalProcedureTime	<3hours	~24hours	~24hours
PhysicalHandlingTime	<15minutes	>1hour	>1hour
AmountofInputDNA	0.1-1µgss/dsDNA	0.1-1µgss/dsDNA	1.2µgss/dsDNA
FoldEnrichmentWithSpiked5-hmCControl	>1000	>1000	>1000
FoldEnrichmentWithGenomicDNASamplesFromCells/Tissues	>100	N/A	N/A
YieldofEnrichedhmeDNAfromGenomicDNASamples	~4ngper500ngofhumanbrainDNA	N/A	N/A
Specificity(Positive/NegativeRatio)	>99%	>99%	>99%
CostPerReaction	$10	$35	$47

ProductComponents

WashBuffer
AntibodyBuffer
hMeDIPSolution
DNAReleaseBuffer
Non-ImmuneIgG(0.6mg/ml)
5-hmCAntibody(0.6mg/ml)
ControlDNA(500ng/ml)
ProteinaseK(10mg/ml)
ControlPrimer-Forward(20µM)
ControlPrimer-Reverse(20µM)
8-WellAssayStrips(WithFrame)
Adhesive8-WellStripFilm
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重庆市卫生健康委员会

2018-07-16

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德国Merck Dtube透析管说明书

2021-09-03

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miRNA慢病毒构建与包装服务

2018-07-15

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TAE (50X)(Tris乙酸盐EDTA缓冲液)(ST716)

2021-09-09

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4%多聚甲醛溶液的配制方法

2021-07-27

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吉林省德商药业股份有限公司所属域名dspharm.com.cn备案详细信息

2018-07-16

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南方科技大学本科生招生系统

2021-07-23

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，简称PBS）的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。... 查看更多>

人维生素D(VD)试剂盒(ELISA)

2021-09-21

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2021-09-14

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2021-08-25

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ssc(柠檬酸钠缓冲液)

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【求助】关于流动相添加剂分析技术论坛123

快乐药师2021-07-22

我们常用的色谱柱的PH耐受大概是PH（2-9），最近摸条件，但是pH计坏了，想调一下流动相的PH，苦于PH试纸的不精确性，特此求助：

常用流动相加酸碱后PH的总结，希望大家能够提供一点自己测过的结果，谢谢先

短期内输库存血,病人容易发生的酸碱平衡紊乱是() 123

fdsez2015-08-06

相关疾病：高钾血症碱中毒代谢性酸中毒输入库存血，钾离子大量释放入血，会导致高钾血症，同时容易伴发代谢性碱中毒，查了相关资料解释说：大量输...

磷酸钠缓冲液的配制方法 123

高展远瞩2014-10-12

看了GE公司的NiSephrose6FastFlow说明书，说bindingbuffer建议20mMsodiumphosphate,0.5MNaCl,pH7.4,elutingbuffer中是在bindingbuffer中加了高浓度的咪唑，我想问一下，这个怎么配制啊？那个sodiumphosphate是什么？磷酸钠溶液？貌似不具有缓冲性，磷酸钠缓冲液？有可能，但是这个咋配啊？有我能想到的三个配制方法，想求助一下;
1.直接用固体磷酸钠配制成50mM的磷酸钠溶液，再调pH到7.4；（我们试着用这个做了下，发现挂不上柱）
2.配置磷酸钠盐缓冲液：按NaH2PO4：Na2HPO4以19：81的摩尔比配制成pH7.4的缓冲液？（附一张百度出来的配方
）

3.如果是磷酸钠盐缓冲液，可以直接将50mM的NaH2PO4的水溶液用NaOH调成pH7.4吗？
再者，2和3这两个方法配制的磷酸钠盐缓冲液有什么区别？最终效果是一样的吗？如果不一样，有什么理论的知识支撑呢？个人感觉是分析化学中酸碱理论中的缓冲液那里的知识。求帮忙解答这些疑问。
另外，我还想问一下，pH对于Ni柱对His-tagged的蛋白的分离纯化影响大吗？是怎么影响的？谢谢大家了！

酸碱加入到缓冲液做的excel的散点图怎么做123

怪小米米2017-10-03

首先你需要有源数据，
有了源数据之后把源数据按照大小排列，
选中源数据区域-->ALT+A1-->选中图标区右键-->更改图表类型-->散点图

我是菜鸟,请教各位:强酸碱性样品可以用普通C18柱吗?谢谢了~ ...123

yandongliu2021-07-24

我的实验是考察药物不同PH值（水溶液，HCL和NaOH调PH值）下的稳定性情况等，PH从2-13。请问各位大侠：这种强酸性或强碱性水溶液样品可以直接进普通C18柱进行分析吗？
因为是考察不同PH对药物的影响，样品又不好改变其PH值，这种情况怎么办？希望有经验的高手指教。

我的流动相是甲醇-水（90：10）

谢谢赐教！

请进子版按格式发贴，自行修改，谢谢。

各类真空泵原理图解_二哈的世界你永远不懂!_真空泵原理123

2017-10-03

缓冲物质更重要。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。

【求助】蛋白质酸碱性对离子交换色谱填料的选择蛋白质和糖学...123

ldx74226632009-08-05

求助：我目前需用离子交换法进行蛋白质的分离和纯化，但是我不知道要纯化的蛋白质的等电点，怎么样选择柱料及洗脱缓冲液呢？如果必须知道，有没有什么简便的方法测定蛋白质的等电点呢？谢谢

凝胶电泳缓冲液的配制123

haina1682021-07-23

我按下面方法配制电泳缓冲液：
Tris-base15.1g
甘氨酸94g
SDS5g
H2O1000ml
听人说就这样配制，PH值就会在8.3左右，都不要怎么调PH的，但不知我这样配制后PH值在6.4左右？迷惑，配制了几次还是这样。本人初次做sds-page，请前辈们指教。
另外Tris是以前师兄留下的，几年了已经，SDS也是以前的，但是没有开封，密封的很好。甘氨酸是新买进口封装的。会不会试剂过期的原因？

培养基高压蒸气灭菌后pH值的变化及其对细菌生长的影响123

mars7472005-08-25

:)
我在做一细菌不同酸碱度生长状况时,发现这些奇怪现象:pH=3的培养基灭菌(TSB液体培养基)灭菌后pH上升到到9.2!而原来pH=9.0的降到8.7(基本没多少变化),请问各位大侠,这是什么原因?

一般做不同酸碱度生长实验时,该如何才能防止pH在湿热灭菌后基本不变化?

如何选择缓冲溶液?_123

sweetwater2021-07-21

做试验的时候用到很多种缓冲液，Tris,triethanolamine,HEPES,还有磷酸缓冲液，不知道这些缓冲液之间有没有大的区别，选择缓冲液的依据是什么？

如果只是为了缓冲酸碱度，是不是可以用一种缓冲液来代替所有其他的？这样做试验就方便多了。谢谢指教

一种缓冲溶液是一个共轭酸碱的混合物,那么为什么邻苯二甲酸氢钾、四硼 ...123

TWDAFRA01242017-10-03

缓冲溶液是含共轭酸碱对的，其中共轭酸与共轭碱都必须是弱酸或弱碱，这样才能组成缓冲液。因为邻苯二甲酸是弱酸，氨是弱碱，并且它们的同浓度的电离度相似，所以组成的缓冲溶液缓冲能力强。

药典中,纯化水酸碱度能用PH计测量吗?《中国药典》2020版讨论区...123

rainbow09282021-07-25

药典上说取本品10ml，加甲基红指示液（变色范围ph4.2-6.3，红~黄）2滴不得显红色；加溴麝香草酚蓝（变色范围ph6.0-7.6，黄~蓝）5滴不得显蓝色。
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用pH计测量？谢谢!