AntibodyDilution WB(1:1000),ICC/IF(1:100);optimaldilutionsforassaysshouldbedeterminedbytheuser. Conjugates AlkalinePhosphatase,APC,ATTO390,ATTO488,ATTO565,ATTO594,ATTO633,ATTO655,ATTO680,ATTO700,Biotin,FITC,HRP,PE/ATTO594,PerCP,RPE,Streptavidin,Unconjugated PerCP Overview: Peridinin-Chlorophyll-ProteinComplex Smallphycobiliprotein Isolatedfromredalgae Largestokesshift(195nm) MolecularWeight:35kDa PerCPDatasheet
OpticalProperties: λex =482nm
λem =677nm
εmax =1.96x106
Laser =488nm
PE/ATTO594 PE/ATTO594isatandemconjugate,wherePEisexcitedat535nmandtransfersenergytoATTO594viaFRET(fluorescenceresonanceenergytransfer),whichemitsat627nm. Overview: Highfluorescenceyield HighphotostABI Veryhydrophilic Excellentsolubilityinwater Verylittleaggregation PE/ATTO594Datasheet
OpticalProperties: λex =535nm
λem =627 nm
Laser = 488to561nm
FITC(Fluorescein) Overview: Excellentfluorescencequantumyield Highrateofphotobleaching Goodsolubilityinwater Broademissionspectrum pHdependentspectra Molecularformula:C20 H12 O5 Molarmass:332.3g/mol FITC-Fluorescent-conjugate
OpticalProperties: λex =494 nm
λem =520 nm
εmax =7.3×104
Φf = 0.92
τfl =5.0ns
Brightness = 67.2
Laser = 488 nm
Filterset = FITC
ATTO700 Overview: Highfluorescenceyield Excellentthermalandphotostability Quenchedbyelectrondonors Veryhydrophilic Goodsolubilityinpolarsolvents Zwitterionicdye MolarMass:575g/mol ATTO700Datasheet
OpticalProperties: λex =700 nm
λem =719nm
εmax =1.25×105
Φf = 0.25
τfl =1.6ns
Brightness = 31.3
Laser =676nm
Filterset =Cy®5.5
ATTO680 Overview: Highfluorescenceyield Excellentthermalandphotostability Quenchedbyelectrondonors Veryhydrophilic Goodsolubilityinpolarsolvents Zwitterionicdye MolarMass:631g/mol ATTO680Datasheet
OpticalProperties: λex =680nm
λem =700 nm
εmax =1.25×105
Φf = 0.30
τfl =1.7ns
Brightness =37.5
Laser =633 –676nm
Filterset =Cy®5.5
ATTO655 Overview: Highfluorescenceyield Highthermalandphotostability Excellentozoneresistance Quenchedbyelectrondonors Veryhydrophilic Goodsolubilityinpolarsolvents Zwitterionicdye MolarMass:634g/mol ATTO655Datasheet
OpticalProperties: λex =663nm
λem =684nm
εmax =1.25×105
Φf = 0.30
τfl =1.8ns
Brightness = 37.5
Laser =633 –647nm
Filterset =Cy®5
ATTO633 Overview: Highfluorescenceyield Highthermalandphotostability Moderatelyhydrophilic Goodsolubilityinpolarsolvents StableatpH4–11 Cationicdye,perchloratesalt MolarMass:652.2g/mol ATTO633Datasheet
OpticalProperties: λex =629nm
λem =657nm
εmax =1.3×105
Φf = 0.64
τfl =3.2ns
Brightness =83.2
Laser =633 nm
Filterset =Cy®5
ATTO594 Overview: Highfluorescenceyield Highphotostability Veryhydrophilic Excellentsolubilityinwater Verylittleaggregation Newdyewithnetchargeof-1 MolarMass:1137g/mol ATTO594Datasheet
OpticalProperties: λex =601 nm
λem =627nm
εmax =1.2×105
Φf = 0.85
τfl =3.5ns
Brightness =102
Laser =594nm
Filterset =TexasRed®
ATTO565 Overview: Highfluorescenceyield Highthermalandphotostability Goodsolubilityinpolarsolvents Excellentsolubilityinwater Verylittleaggregation Rhodaminedyederivative MolarMass:611g/mol ATTO565Datasheet
OpticalProperties: λex =563nm
λem =592nm
εmax =1.2×105
Φf = 0.9
τfl =3.4n
Brightness =10
Laser =532nm
Filterset = TRITC
ATTO488 Overview: Highfluorescenceyield Highphotostability Veryhydrophilic Excellentsolubilityinwater Verylittleaggregation Newdyewithnetchargeof-1 MolarMass:804g/mol ATTO488Datasheet
OpticalProperties: λex =501nm
λem =523nm
εmax =9.0×104
Φf = 0.80
τfl =4.1ns
Brightness = 72
Laser = 488 nm
Filterset = FITC
ATTO390 Overview: Highfluorescenceyield LargeStokes-shift(89nm) Goodphotostability Moderatelyhydrophilic Goodsolubilityinpolarsolvents Coumarinderivate,uncharged Lowmolarmass:343.42g/mol ATTO390Datasheet
OpticalProperties: λex =390nm
λem =479nm
εmax =2.4×104
Φf = 0.90
τfl =5.0ns
Brightness = 21.6
Laser =365or405nm
APC (Allophycocyanin)Overview: Highquantumyield Largephycobiliprotein 6chromophorespermolecule Isolatedfromredalgae MolecularWeight:105kDa APCDatasheet
OpticalProperties: λex =650nm
λem =660nm
εmax =7.0×105
Φf = 0.68
Brightness = 476
Laser =594or633 nm
Filterset =Cy®5
Streptavidin Properties:
Homo-tetramericproteinpurifiedfromStreptomycesavidinii whichbindsfourbiotinmoleculeswithextremelyhighaffinity Molecularweight:53kDa Formula:C10 H16 N2 O3 S Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA StreptavidinDatasheet
Biotin Properties:
BindstetramericavidinproteinsincludingStreptavidinandneuravidinwithveryhighaffinity Molarmass:244.31g/mol Formula:C10 H16 N2 O3 S Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA BiotinDatasheet
HRP(HorserADI Properties:
Enzymaticactivityisusedtoamplifyweaksignalsandincreasevisibilityofatarget Readilycombineswithhydrogenperoxide(H2 O2 )toformHRP-H2 O2 complexwhichcanoxidizevarioushydrogendonors Catalyzestheconversionof:Chromogenicsubstrates(e.g.TMB,DAB,ABTS)intocolouredproducts Chemiluminescentsubstrates(e.g.luminolandisoluminol)intolightemittingproductsviaenhancedchemiluminescence(ECL) Fluorogenicsubstrates(e.g.tyramine,homovanillicacid,and4-hydroxyphenylaceticacid)intofluorescentproducts Highturnoverrateenablesrapidgenerationofastrongsignal 44kDaglycoprotein Extinctioncoefficient:100(403nm) Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA HRPDatasheet
AP(AlkalinePhosphatase) Properties:
Broadenzymaticactivityforphosphateestersofalcohols,amines,pyrophosphate,andphenols Commonlyusedtodephosphorylatethe5’-terminiofDNAandRNAtopreventself-ligation Catalyzestheconversionof:Chromogenicsubstrates(e.g.pNPP,naphtholAS-TRphosphate,BCIP)intocolouredproducts Fluorogenicsubstrates(e.g.4-methylumbelliferylphosphate)intofluorescentproducts Molecularweight:140kDa Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA APDatasheet
R-PE (R-Phycoerythrin)Overview: Broadexcitationspectrum Highquantumyield Photostable Memberofthephycobiliproteinfamily Isolatedfromredalgae Excellentsolubilityinwater MolecularWeight:250kDa R-PEDatasheet
OpticalProperties: λex =565nm
λem =575nm
εmax =2.0×106
Φf = 0.84
Brightness =1.68x103
Laser = 488to561nm
Filterset = TRITC
ProductImages Immunocytochemistry/ImmunofluorescenceanalysisusingMouseAnti-TASK1PotassiumChannelMonoclonalAntibody,CloneS374-48(SMC-473).Tissue:NeuroblastomacelllineSK-N-BE.Species:Human.Fixation:4%Formaldehydefor15minatRT.PrimaryAntibody:MouseAnti-TASK1PotassiumChannelMonoclonalAntibody(SMC-473)at1:100for60minatRT.SecondaryAntibody:GoatAnti-MouseATTO488at1:100for60minatRT.Counterstain:PhalloidinTexasRedF-Actinstain;DAPI(blue)nuclearstainat1:1000,1:5000for60minRT,5minRT.Localization:Membrane.Magnification:60X.(A)DAPI(blue)nuclearstain(B)PhalloidinTexasRedF-Actinstain(C)TASK1PotassiumChannelAntibody(D)Composite.
WesternBlotanalysisofRatBrainMembraneshowingdetectionof~50kDaTASK1PotassiumChannelproteinusingMouseAnti-TASK1PotassiumChannelMonoclonalAntibody,CloneS374-48(SMC-473).Lane1:MolecularWeightLadder(MW).Lane2:Ratbrainmembrane.Load:15µg.Block:2%BSAand2%SkimMilkin1XTBST.PrimaryAntibody:MouseAnti-TASK1PotassiumChannelMonoclonalAntibody(SMC-473)at1:1000for16hoursat4°C.SecondaryAntibody:GoatAnti-MouseIgG:HRPat1:2000for60minatRT.ColorDevelopment:ECLsolutionfor6minatRT.Predicted/ObservedSize:~50kDa.
ProductCitations(0) Currentlytherearenocitationsforthisproduct.
FITC(Fluorescein) Overview: Excellentfluorescencequantumyield Highrateofphotobleaching Goodsolubilityinwater Broademissionspectrum pHdependentspectra Molecularformula:C20 H12 O5 Molarmass:332.3g/mol FITC-Fluorescent-conjugate
OpticalProperties: λex =494 nm
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εmax =7.3×104
Φf = 0.92
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Brightness = 67.2
Laser = 488 nm
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回答：可以耐受的啊,这个是viskase的
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求助：我目前需用离子交换法进行蛋白质的分离和纯化，但是我不知道要纯化的蛋白质的等电点，怎么样选择柱料及洗脱
缓冲液 呢？如果必须知道，有没有什么简便的方法测定蛋白质的等电点呢？谢谢
缓冲物质更重要。
【酸碱缓冲溶液的类型及选择】酸碱缓冲溶液有三种类型：
通HCl前,溶液是c(CH₃COOH)=c(CH₃COONa)=0.1mol/L的混合溶液,按照缓冲溶液pH的求法求.
25倍电转
缓冲液 的ph＝8.3真的不能调吗？听师兄说一次配好液后它的ph值就必须是8.3，不能再进行加酸或加碱调节，可我配了一天也没达到这个要求，用的是18g甘氨酸和3.64g的trisbase加dd水到100ml，总是ph值到8.8左右，在配过程中可以加热吗，不然太难溶解了，
相关疾病： 高钾血症碱中毒代谢性酸中毒输入库存血，钾离子大量释放入血，会导致高钾血症，同时容易伴发代谢性碱中毒，查了相关资料解释说：大量输...
看了GE公司的NiSephrose6FastFlow说明书，说bindingbuffer建议20mMsodiumphosphate,0.5MNaCl,pH7.4,elutingbuffer中是在bindingbuffer中加了高浓度的咪唑，我想问一下，这个怎么配制啊？那个sodiumphosphate是什么？磷酸钠溶液？貌似不具有缓冲性，磷酸钠
缓冲液 ？有可能，但是这个咋配啊？有我能想到的三个配制方法，想求助一下;
1.直接用固体磷酸钠配制成50mM的磷酸钠溶液，再调pH到7.4；（我们试着用这个做了下，发现挂不上柱）
2.配置磷酸钠盐缓冲液：按NaH2PO4：Na2HPO4以19：81的摩尔比配制成pH7.4的缓冲液？（附一张百度出来的配方
）
3.如果是磷酸钠盐缓冲液，可以直接将50mM的NaH2PO4的水溶液用NaOH调成pH7.4吗？
再者，2和3这两个方法配制的磷酸钠盐缓冲液有什么区别？最终效果是一样的吗？如果不一样，有什么理论的知识支撑呢？个人感觉是分析化学中酸碱理论中的缓冲液那里的知识。求帮忙解答这些疑问。
另外，我还想问一下，pH对于Ni柱对His-tagged的蛋白的分离纯化影响大吗？是怎么影响的？谢谢大家了！
Whatman的网站上说DE52（货号4057-200）是预膨胀的（Preswollen），有的中文网站上说DE52是即用型。
EDTA对金属离子的络合能力随酸度改变而不同，酸度越低，络合能力增强；酸度越高，络合能力越弱。可见控制溶液的pH在络合滴..
缓冲溶液是含共轭酸碱对的，其中共轭酸与共轭碱都必须是弱酸或弱碱，这样才能组成缓冲液。因为邻苯二甲酸是弱酸，氨是弱碱，并且它们的同浓度的电离度相似，所以组成的缓冲溶液缓冲能力强。
药典上说取本品10ml，加甲基红指示液（变色范围ph4.2-6.3，红~黄）2滴不得显红色；加溴麝香草酚蓝（变色范围ph6.0-7.6，黄~蓝）5滴不得显蓝色。
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用
pH计 测量？谢谢!
![StressMarq/Anti-TASK1 Potassium Channel Antibody [S374-48]/SMC-473D-FITC/100-µg](images/StressMarq/201710/SMC-473-TASK1-Potassium-Channel-Antibody-S374-48-ICC-IF-Human-Neuroblastoma-cell-line-SK-N-BE-60X-Composite-1-150x150.png)
