| Overview | PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 490/514 |
| MW | 376.27 |
| CAS# | 518-47-8 |
| Solvent | Water |
| Storage | F/D/L |
| Category | MicroBIOLOGy iFluorRapidTests |
| Related | BiochemicalAssays |
| Spectrum | AdvancedSpectrumViewer |
| References&Citations | PrinterFriendlyVersion |
1. RogalskaA,GajekA,SzwedM,JozwiakZ,MarczakA.(2011)TheroleofreactiveoxygenspeciesinWP631-induceddeathofhumanovariancancercells:acomparisonwiththeeffectofdoxorubicin.ToxicolInVitro,25,1712.
2. ZhangYH,WuYL,TashiroS,OnoderaS,IkejimaT.(2011)Reactiveoxygenspeciescontributetooridonin-inducedapoptosisandautophagyinhumancervicalcarcinomaHeLacells.ActaPharmacolSin,32,1266.
3. HossainMZ,KleveMG.(2011)Nickelnanowiresinducedandreactiveoxygenspeciesmediatedapoptosisinhumanpancreaticadenocarcinomacells.IntJNanomedicine,6,1475.
4. YangY,LouJ,LiZ,SunW,WangB,JiaY.(2011)[Effectofglucocorticoidonproductionofreactiveoxygenspeciesinbonemicrovascularendothelialcells].ZhongguoXiuFuChongJianWaiKeZaZhi,25,533.
5. QinLX,MaW,LiDW,LiY,ChenX,KrAATzHB,JamesTD,LongYT.(2011)CoenzymeQfunctionalizedCdTe/ZnSquantumdotsforreactiveoxygenspecies(ROS)imaging.Chemistry,17,5262.
6. LinWN,LinCC,ChengHY,YangCM.(2011)Regulationofcyclooxygenase-2andcytosolicphospholipaseA2geneexpressionbylipopolysaccharidethroughtheRNA-bindingproteinHuR:involvementofNADPHoxidase,reactiveoxygenspeciesandmitogen-activatedproteinkinases.BrJPharmacol,163,1691.
7. YuH,LiQ,ZhouX,KolosovVP,PerelmanJM.(2011)RoleofhyaluronanandCD44inreactiveoxygenspecies-inducedmucushypersecretion.MolCellBiochem,352,65.
8. BorgesonE,LonnJ,BergstromI,BrodinVP,RamstromS,NayeriF,SarndahlE,BengtssonT.(2011)LipoxinAinhibitsporphyromonasgingivalis-inducedaggregationandreactiveoxygenspeciesproductionbymodulatingneutrophil-plateletinteractionandCD11bexpression.InfectImmun,79,1489.
9. GuthrieHD,WelchGR,TheisenDD,WoodsLC,3rd.(2011)Effectsofhypothermicstorageonintracellularcalcium,reactiveoxygenspeciesformation,mitochondrialfunction,motility,andplasmamembraneintegrityinstripedbass(Moronesaxatilis)sperm.Theriogenology,75,951.
10. HeWH,LiB,ZhuX,ZhangKH,LiBM,LiuZJ,LiuGY,WangJ.(2010)[TheroleandmechanismofNADPHoxidaseinleptin-inducedreactiveoxygenspeciesproductioninhepaticstellatecells].ZhonghuaGanZangBingZaZhi,18,849.
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest,Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品,快速的丰富各个领域的产品。
1)我们提供反应荧光探针和发光探针,生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物,如蛋白、核酸以及其他碳水化合物;2)我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白,核酸和活细胞。3)我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶,特别是检测水解酶和氧化还原酶类;4)我们致力于开发用于信号转导研究的试剂;5)我们提供生理和神经探针,特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
作为AATBioquestInc.的中国区域代理,艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品,同时更为您售前售后全面技术支持。
AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
有了源数据之后把源数据按照大小排列,
选中源数据区域-->ALT+A1-->选中图标区右键-->更改图表类型-->散点图
这就是说不用酸碱预处理吗?
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力,请问又经验的战友应该是多少?
Whatman的网站上:
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.
DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.
附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.
lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)
pH(1)=pKa+lg[c(CH₃COONa)/c(CH₃COOH)]=pKa=4.74
通HCl后,溶液是c(CH₃COOH)=0.2mol/L、c(NaCl)=0.1mol/L的混合溶液,溶液pH按照弱酸溶液pH的求法求.
c(H⁺)=√[Ka*c(CH₃COOH)]=√(10^-4.74*0.2)=0.00191(mol/L)(采用了近似公式)
pH(2)=-lg{c(H⁺)}=2.72
两个pH求得,那么pH的变化量也就可得了.pH的变化量=|pH(2)-pH(1)|=|2.72-4.74|=2.02
1)PH缓冲溶液作用原理和pH值
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液.弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液.
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:
所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化.
2)PH缓冲溶液的缓冲能力
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用.这说明它的缓冲能力是有一定限度的.
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关.0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大.关于这一点通过计算便可证实.但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用.
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH最小,缓冲能力大.不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用.缓冲溶液的pH值可用下式计算:
此时缓冲能力大.缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用.对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内.
弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1
弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用.配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1.
3)PH缓冲溶液的配制和应用
为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液.
以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法.对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法.
PH缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2离子时,可用下面的反应:
白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应.
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6?能否直接用pH计测量?谢谢!
两个CEX方法A和B测定同一单抗,结果碱性峰比例差不多,酸性峰比例相差约7%,相应主峰也差了7%左右。
具体来说,A方法酸性峰高,主峰低,碱性峰稍微低点;B方法酸性峰低,主峰高,碱性峰稍微高点;另外也做了CIEF,结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来,AB两个方法的峰性和数量差不多,就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液,一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下:
1.两个方法哪个方法更准确,是以酸性峰高的为准还是什么?为什么?
2.这显著差异是由方法造成,具体原因是什么?柱子?
3.CIEF的结果和A方法更接近,是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好(因为CIEF更快更方便)?
欢迎讨论~
纠正下,A方法用的是Tosoh的柱子,B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料,10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少,这次信手用用,结果发现差异很大
那我现在就考虑,在以后方法开发过程中,除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离,还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度,尤其是主峰和邻近峰的分离度,获得最大分离度,自然可以做到主峰尽可能纯,但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧!
另外,CIEF和CEX方法原理还是有点差异的,所以分的是不同的异质体,原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段,哪个方法才是又快又准。CIEF(iCE280)一般15分钟一个样,比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果,是不是真的完全可以取代CEX呢?CEX分离出的峰远比CIEF的多!
欢迎大家继续讨论~

