
Type:WashBuffer
Applications:E
E=ELISA;FACS;FC=FlowCytometry;FPLC=FastProteinLiquidChromatography;GF=GravityFlow;HPLC=HighPerformanceLiquidChromatography;ICC=Immunocytochemistry;IF=Immunofluorescence;IHC=Immunohistochemistry;IP=Immunoprecipitation;NAC=Non-adherentCellAssays;NB=NeutralizationofBioactivity;SE=SandwichELISA;TPE=TargetedProteinExpression;WB=Westernblotting;;AC=AdherentCellAssays;FM=FluorescentMicsroscopy;;;BSC-CM5=BiacoreSensorChipCM5;BSM=BiosactiveSmallMoleculeorPeptide;CDM=CellDifferentiationMedia;;;;;;HealthandFitness;;;DNAExtraction/Purification;;InvivoLikeAssaysFormat:liquid
ThisELISAWashBufferformulationisanoptimalformulationofpHstABIlizers,salts,anddetergentsdesignedtoeffectivelyremoveexcessmaterialfromthemicrotiterplatewellswithoutdisruptingtheELISAbindingreaction.Bymaintainingtheproperbufferingenvironment,unboundcomponentscanbewashedawaywithoutsuppressingantigen-antibodybindinginteractions,therebyreducingnonspecificbackgroundnoiseandincreasingthespecificsignal.
ItiscompatIBLewithallroutinelyusedconjugatecomponentssuchasHRP,AP,andavidin,amongothers.
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1。称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中;
2。向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配制方法:
1。称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中;
2。加入约700ml去离子水,搅拌均匀;
3。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer
蛋白质上样缓冲液中的SDS和DTT分别可以屏蔽蛋白质电荷以及破坏二硫键,避免形成多聚体。
DNA上样缓冲液主要是起沉降和指示作用,不可用于蛋白,否则会影响蛋白相对分子量定量。
同样蛋白上样缓冲液中的tris-HCl浓度过高也会使溴酚蓝条带扭曲。
因为DNA和RNA链上的碱基都基本一致。而这两种上样缓冲液中含有的染料是二甲苯青和溴酚蓝,都可以与其碱基结合,跑出条带。
但是,如果使用DNA上样缓冲液,里面会夹杂一些RNA酶,这些酶有可能会影响到实验结果。使用前需要将RNA酶处理掉。
0.5 M tris-HCl (pH 6.8) 20%
丙三醇 20%
20%SDS 20%
0.1%溴酚兰 5%
2-巯基乙醇 10%
双蒸水 25%
不调PH值,PH在配0.5 M tris-HCl 时已调,缓冲液呈蓝紫色。
加样缓冲液的主要作用是使PCR产物与其混合,
使DNA沉于加样孔的底部,防止DNA跑出来.

