Description
Details
NHS Ester Modified fluorescent dye with Absorption 653nm / Emission 672nm, suitable for protein labeling, microarray experiments, FisH microscopy, and gel electrophoresis. Spectral similar to Cy5™ and Alexa Fluor® 647 commonly used with RadiantDy™ 547. The increased water solubility of RadiantDy™ fluorescent dyes allows a high label to protein ratio without precipitation during the conjugation reaction.
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1。称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中;
2。向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配制方法:
1。称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中;
2。加入约700ml去离子水,搅拌均匀;
3。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer
蛋白质上样缓冲液中的SDS和DTT分别可以屏蔽蛋白质电荷以及破坏二硫键,避免形成多聚体。
DNA上样缓冲液主要是起沉降和指示作用,不可用于蛋白,否则会影响蛋白相对分子量定量。
同样蛋白上样缓冲液中的tris-HCl浓度过高也会使溴酚蓝条带扭曲。
最好是测浓度,一般不超过30-40ug,上样缓冲液一般4×或者5×,这个没太大区别。
① 上样缓冲液中包括甘油,溴酚蓝,SDS等,甘油主要作用是防止样品漂浮出点样孔,溴酚蓝作为电泳指示剂,用来观察电泳进度,SDS用于一些核酸结合蛋白的变性解离.
②核酸染料与凝胶中核酸结合,以便于在紫外光下显示核酸条带.
0.5 M tris-HCl (pH 6.8) 20%
丙三醇 20%
20%SDS 20%
0.1%溴酚兰 5%
2-巯基乙醇 10%
双蒸水 25%
不调PH值,PH在配0.5 M tris-HCl 时已调,缓冲液呈蓝紫色。

