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Monobind/Sample Diluent for High-Value Pregnancy Patients (hCG-Free)/8525145MM
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Monobind/Sample Diluent for High-Value Pregnancy Patients (hCG-Free)/8525145MM
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Monobind
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Sample Diluent (40.1ml) hCG-Free for High-Value Pregnancy Samples

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2021-07-24
DNA是真核生物的遗传物质,由脱氧核苷酸组成。它是双链互补螺旋结构,定向酶切技术就是用限制性内切酶去切割DNA片断,由于酶具有专一性,一种酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,所以可以用特定的这种酶去切割相应的DNA片断,进而达到定向切割的目的。... 查看更多>
wshtbio值暑期来临之际,上海万生昊天生物技术有限公司为回馈新老客户一直以来的大力支持,特别推出暑期三折优惠活动,原价192元的荧光型蛋白上样缓冲液,现在只需60元,同时还可获得我司预制胶试用装一份,惊喜多多,不容错过。Instant-Bands是一种可用于蛋白SDS-PAGE凝胶电泳的荧光上样缓冲液。本产品在进行蛋白样品变性处理的同时对蛋白进行预染色,电泳结束后即可直接使用凝胶成像仪的紫外光源或者LED灯观察电泳结果。其染色灵敏度... 查看更多>
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sds电泳上样缓冲液如何配置
实验室的一份protocol 上写配上样缓冲液的时候要加溴酚蓝bromophenol blue,但没写加的量是多少。实验室只有粉末状的溴酚蓝。请问大神们如何加,加多少啊?需要先把溴酚蓝配制成溶液吗?还是直接加进去?
(以下内容仅供参考)
2乘SDS-PAGE上样缓冲液(20ml体系)
1.0mol/L Tris-HCL (pH 6.8) 2ml
1.0mol/L DTT 4ml
SDS 0.8g
溴芬蓝 0.04g
甘油 4ml
dd水 定容至20ml
4℃冰箱保存,可以不分装,我们实验室一般用三个月以上
先配1.0mol/L的DTT,双蒸无菌水溶解4℃冰箱保存,配上样缓冲液的时候加入就可以了,都混匀保存也没问题的

实验小白刚刚起步,一般采用等质量上样的方法,但我算的上样量是没加缓冲液之前的,加完缓冲液蛋白样品浓度会变么?师姐说不会变,就按照算好的上样量加就行。

前几天提的样按50ug算每个样本的上样量也只有上5ul左右,按师姐说的就那么上了,结果发完光只有内参有条带,目标蛋白一点也没有,但以前做过一次是出过一点趋势的,而且这次整个过程感觉做的很仔细,发完光结果也很干净整齐,所以我在想是不是跟上样量有关系?上样缓冲液加入之后会使样本浓度稀释五倍么,这样的话上样量就得乘5。

变性前后加上样缓冲液的区别是什么呢?哪一种会改变蛋白浓度从而改变上样量呢?


找公司合成了一个30AA的阳离子多肽(纯度90%),加水溶解至6ng/μl,加入2x上样缓冲液后,立即出现沉淀,加热至99度10分钟仍不溶解,离心取上清电泳,蛋白Marker条带清晰,样品无条带形成,在预期位置的上方10~15kd处出现弥散状着色区,请问:
1)为何出现沉淀,怎样才能避免沉淀的出现?
2)为何没有预期大小的3.5kd条带出现?10~15kd处可能是什么?是不是分子聚合?若是分子聚合,怎样解聚?
今天老师跟我说,mark可以用蛋白上样缓冲液稀释,两者一比一稀释,蛋白上样缓冲液用两成的!这样可以吗?各位大神,给个答案吧!
蛋白上样缓冲液
蛋白电泳上样缓冲液包括2%SDS , 0.1%溴酚蓝 10%甘油,SDS是保证样品中的所有蛋白带电荷一致,减少电荷对电泳结果的影响。还原剂是让二硫键处于断开状态,保证蛋白分子的线性.
溴酚蓝作用是指示上样蛋白的跑胶时标记的,甘油是增加上样重量的,以免漂浮,煮沸是使蛋白变性的永久保存
不太好操作,里面有小分子的SDS、β巯基乙醇,较难浓缩,不是有4X的买么,还可以自己配啊,网上都有现成的配方,溴酚蓝、SDS、β巯基乙醇。。。
作为指示剂,因为溴酚蓝呈蓝色,而蛋白质是白色,在SDS-凝胶中不明显,且溴酚蓝的相对分子量比蛋白质(绝大部分)小,电泳时速度比蛋白质稍快,因此当溴酚蓝到达电泳槽底部(可看蓝色调带),则电泳结束。
上样缓冲液是4×,上样体积是24微升,则上样缓冲液应该是6微升。如果不按这个比例,多加或者少加有什么影响呢?谢谢

提了蛋白,加上样缓冲液煮过,但发现还是有很多胶状的沉淀,比较黏稠,堵枪头。于是自作主张又超声了一次,结果跑了一次,内参都没有。煮过之后的蛋白不能超声么?

电泳缓冲液的主要作用是使胶的导电性和体系的一致,这样跑出的条带才回一致;
加样缓冲液的主要作用是使PCR产物与其混合,
使DNA沉于加样孔的底部,防止DNA跑出来.