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StressMarq/Anti-EGFR Antibody/SPC-1134D-A565/100-µl
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StressMarq/Anti-EGFR Antibody/SPC-1134D-A565/100-µl
品牌 / 
StressMarq
货号 / 
SPC-1134D-A565
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Overview:

ProductNameEGFRAntibody
Description

RabbitAnti-HumanEGFRPolyclonal

SpeciesReactivityHuman,Mouse
ApplicationsWB,AM
AntibodyDilutionWB(1:250);optimaldilutionsforassaysshouldbedeterminedbytheuser.
HostSpeciesRabbit
ImmunogenSpeciesHuman
ImmunogenSyntheticpeptideofhumanEGFR(AA980-993)
ConjugatesAlkalinePhosphatase,APC,ATTO390,ATTO488,ATTO565,ATTO594,ATTO633,ATTO655,ATTO680,ATTO700,Biotin,FITC,HRP,PE/ATTO594,PerCP,RPE,Streptavidin,Unconjugated

Properties

StorageBufferPBSpH7.4,50%glycerol,0.025%Thimerosal
StorageTemperature-20ºC
ShippingTemperatureBlueIceor4ºC
PurificationPeptideAffinityPurified
ClonalityPolyclonal
SpecificityDetects134.277kDa.
CiteThisProductStressMarqBiosciencesCat#SPC-1134,RRID:AB_2710811
CertificateofAnalysisA1:250dilutionofSPC-1134wassufficientfordetectionofEGFRin10µgofHeLacelllysatebyECLimmunoblotanalysisusinggoatanti-rabbitIgG:HRPasthesecondaryantibody.

BIOLOGicalDescription

AlternativeNamesAvianerythroblasticleukemiaviral(verbb)oncogenehomologAntibody,Cellgrowthinhibitingprotein40Antibody,Cellproliferationinducingprotein61Antibody,Epidermalgrowthfactorreceptor(avianerythroblasticleukemiaviral(verbb)oncogenehomolog)Antibodyy,EpidermalgrowthfactorreceptorAntibody,ERBBAntibody,ERBB1Antibody,ErrpAntibody,HER1Antibody,mENAAntibody,NISBD2Antibodyy,PIG61Antibody,SA7Antibody,wa2Antibody,Wa5Antibody
CellularLocalizationCellmembrane,EndoplasmicReticulum,Endosome,Golgiapparatus,Nucleus
AccessionNumberNP_005219
GeneID1956
SwissProtP00533
ScientificBackgroundEGFRisareceptor-tyrosinekinasethatisactivateduponbindingepidermalgrowthfactor(EGF)andtransforminggrowthfactor-alpha(TGFalpha).BindingofEGFellicitsapro-growthandanti-apoptoticresponsethroughtheRaspathway.Missensemutationsanddeletionsarecommoninavarietyofcancers.

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 ATTO565
Overview:
  • Highfluorescenceyield
  • HighthermalandphotostABIlity
  • Goodsolubilityinpolarsolvents
  • Excellentsolubilityinwater
  • Verylittleaggregation
  • Rhodaminedyederivative
  • MolarMass:611g/mol

ATTO565Datasheet

 ATTO 565 Fluorophore Excitation and Emission SpectraOpticalProperties:

λex =563nm

λem=592nm

εmax=1.2×105

Φf= 0.9

τfl =3.4n

Brightness=10

Laser =532nm

Filterset = TRITC

 

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2× SDS-PAGE 上样缓冲液:
0.5 M tris-HCl (pH 6.8) 20%
丙三醇 20%
20%SDS 20%
0.1%溴酚兰 5%
2-巯基乙醇 10%
双蒸水 25%

不调PH值,PH在配0.5 M tris-HCl 时已调,缓冲液呈蓝紫色。
不可以通用。
蛋白质上样缓冲液中的SDS和DTT分别可以屏蔽蛋白质电荷以及破坏二硫键,避免形成多聚体。
DNA上样缓冲液主要是起沉降和指示作用,不可用于蛋白,否则会影响蛋白相对分子量定量。
同样蛋白上样缓冲液中的tris-HCl浓度过高也会使溴酚蓝条带扭曲。
2ul 5×上样缓冲液中添加3ul水,混匀,即得2×上样缓冲液

实验小白刚刚起步,一般采用等质量上样的方法,但我算的上样量是没加缓冲液之前的,加完缓冲液蛋白样品浓度会变么?师姐说不会变,就按照算好的上样量加就行。

前几天提的样按50ug算每个样本的上样量也只有上5ul左右,按师姐说的就那么上了,结果发完光只有内参有条带,目标蛋白一点也没有,但以前做过一次是出过一点趋势的,而且这次整个过程感觉做的很仔细,发完光结果也很干净整齐,所以我在想是不是跟上样量有关系?上样缓冲液加入之后会使样本浓度稀释五倍么,这样的话上样量就得乘5。

变性前后加上样缓冲液的区别是什么呢?哪一种会改变蛋白浓度从而改变上样量呢?


上样缓冲液也有多种,一般是80ul的样本加20ul的上样缓冲液,这样基本上上样50ug的体积在10ul左右。
最好是测浓度,一般不超过30-40ug,上样缓冲液一般4×或者5×,这个没太大区别。
不太好操作,里面有小分子的SDS、β巯基乙醇,较难浓缩,不是有4X的买么,还可以自己配啊,网上都有现成的配方,溴酚蓝、SDS、β巯基乙醇。。。
sds电泳上样缓冲液如何配置

提了蛋白,加上样缓冲液煮过,但发现还是有很多胶状的沉淀,比较黏稠,堵枪头。于是自作主张又超声了一次,结果跑了一次,内参都没有。煮过之后的蛋白不能超声么?

dna上样缓冲液和rna上样缓冲液可以通用。
因为DNA和RNA链上的碱基都基本一致。而这两种上样缓冲液中含有的染料是二甲苯青和溴酚蓝,都可以与其碱基结合,跑出条带。
但是,如果使用DNA上样缓冲液,里面会夹杂一些RNA酶,这些酶有可能会影响到实验结果。使用前需要将RNA酶处理掉。
凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
急求20mmol/L,pH5的柠檬酸磷酸盐缓冲液如何配制???需要详细的配置过程,分别需要柠檬酸和磷酸氢二钠多少克???谢谢!!!!缓冲液是做为上样缓冲液用的,谢谢大神们给予一些指点
我做的是明胶酶谱实验,开始用以前师姐剩下的还原型上样缓冲液(成分不详)上样组织蛋白酶,电泳后洗脱掉SDS,置入反应液中,酶可以在相应位置降解明胶,这次换了新的上样缓冲液,就是含巯基乙醇的,可是电泳后酶却不能降解明胶了,不知道这个巯基乙醇打开蛋白质的结构后,对酶的活性有没有不可逆的影响,如果有的话,是不是要换一种上样缓冲液了?谢谢