【求助】几种蛋白电泳缓冲液的异同以及PVDF转膜过程中缓冲液要加甲醇吗

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2021-07-24

问题描述：

目前常用的SDS-PAGE电泳缓冲液有：
Tris-Glycine/SDS;
MOPS/SDS;
Bis-Glycine/SDS等不同的缓冲液、预混液等。
不知道这几种缓冲液有什么异同呢？
比如如果是Invitrogen的预制胶-预混液电泳系统，每种预制胶有适配缓冲液，但是如果用其他的缓冲液似乎也可以得到不错的结果，那么是否说明电泳缓冲液只要满足了缓冲ph范围，其他的不是特别重要呢？
此外，附加提问是，PVDF膜在转膜的时候，转膜缓冲液中不需要加入甲醇，那么是加入甲醇转膜效果好还是不加好呢？
谢谢！

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zcxy4316

用户

我自己来回复吧= =|||是的，在非极端情况下，几种缓冲液可以混着用。但是条带大小会有漂移。PVDF膜在转膜的时候加不加甲醇影响不大，只要之前充分浸泡过就好了。

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wenshl2005

用户

缓冲液提供合适的pH值，提供足够的带电离子。也许SDS还能弥补转膜过程中从蛋白肽链上脱落的部分SDS。甲醇可增加PVDF膜对蛋白的吸附能力。

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livefox2016

用户

Methanolisonlynecessaryifusingnitrocellulose.IfusingPVDF,methanolcanberemovedfromthetransferbufferaltogether,andisonlyneededtoactivatethePVDFbeforeassemblingthegel/membranesandwich.

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