| Peak Wavelengths | 650 nm, unstopped, blue reaction product450 nm, stopped, yellow reaction product |
|---|---|
| Reaction Temperature | Room temperature |
| Substrate Concentration | 2.08 mmol/L |
This high sensitivity liquid substrate for peroxidase consists of Tetramethylbenzidine (TMB) plus dilute hydrogen peroxide in a single-reagent stabilized form. The reagent has been specifically formulated for measuring peroxidase in ELISA systems which is stable for long-term storage providing sensitivity greater than OPD.
This reagent is available as a single component, ready-to-use reagent. When used in conjunction with our proprietary TMB Stop Buffer (TSB), the resulting color product will not fade or darken for several hours.
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② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③ 当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。
1. Buffer中离子浓度过大,甘氨酸或者Tris碱有可能疏忽多加了
2.没有加相应浓度的SDS
3.电泳周围温度高,也是一个原因
我使用的是1%琼脂糖凝胶,电泳缓冲液为0.5×TBE。
请问各位大虾,在不影响实验结果的前提下,这样的含EB的电泳缓冲液可以反复使用多少次?
谢谢^_^
500ml
2。阴极缓冲液 ( 10 × ) :将 60.55g Tris ,89.58g Tricine 及 5g SDS 溶于400ml 蒸馏水中,加水至终体积为500ml
使用时稀释至1×的缓冲液,电泳槽内槽加入阴极电泳缓冲液,外槽加入阳极电泳缓冲液。形成Trcine-SDS-PAGE电泳系统。
如果你是制胶或者做电泳缓冲液的话,不用灭菌。
Tris-Glycine/SDS;
MOPS/SDS;
Bis-Glycine/SDS等不同的缓冲液、预混液等。
不知道这几种缓冲液有什么异同呢?
比如如果是Invitrogen的预制胶-预混液电泳系统,每种预制胶有适配缓冲液,但是如果用其他的缓冲液似乎也可以得到不错的结果,那么是否说明电泳缓冲液只要满足了缓冲ph范围,其他的不是特别重要呢?
此外,附加提问是,PVDF膜在转膜的时候,转膜缓冲液中不需要加入甲醇,那么是加入甲醇转膜效果好还是不加好呢?
谢谢!

