
Details
Chickenswereimmunizedwithasyntheticpeptide/keyholelimpethemocyanin(KLH)conjugate.ThepeptidecorrespondedtoaregionoftheCNPasegeneproductsharedbetweenthehuman(NP_149124,NCBI)andmouse(P16330,NCBI)sequences.Afterrepeatedinjections,immuneeggswerecollected,theIgYfractionswerepurifiedfromtheyolks,andthenaffinity-purifiedusingapeptidecolumn.Theconcentrationsoftheeluateswerethenadjustedto100µg/mL,andthepreparationwasfilter-sterilized.
Volume:1000µL
Concentration:100µg/mL
Clonality:Polyclonal
HostSpecies:Chicken
SpeciesReactivity:Human,Mouse,Rat
Applications:ICC,IHC,WB
ProteinName/Synonyms:2",3"-cyclic-nucleotide3"-phosphodiesterase,CNP,CNPase,EC3.1.4.37
GeneID:CNP
AntibodyRegistryID(RRID):AB_2313538
PhysicalState:Liquid
ValidationandApplicationNotes
MolecularWeight:47kDa
WesternBlotDilutionRange:1:500-1:1000
IHCDilutionRange:1:500-1:1000
QualityControl
Qualityassuranceanalysiswasperformedusingimmunohistochemistry(atadilutionof1:2000)usingfluorescein-labeledgoatanti-chickenIgY(1:500dilution,AvesLabsCat.#F-1005)asthesecondaryreagent.
Storage
Storeat4°Cinthedark.Undertheseconditions,theantibodiesshouldhaveashelflifeofatleast12months(providedtheyremainsterile).Donotfreezetheseantibodiesunlessyouwanttostorethemforlongerperiodsoftime.Note,however,thateachtimeanantibodypreparationisfrozen,abouthalfofitsbindingactivityislost.
NOTE
AvesLabsproductsareintendedforuseasresearchlaboratoryreagents.Theyarenotintendedforuseasdiagnosticortherapeuticreagentsinhumans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代,专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备,生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势,不仅品种多样,质量优良,而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究,包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外,AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务,您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽,我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究,可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究,可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样,除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同,因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应,特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖,可广泛用于WB,免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成,适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成,适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久,它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物,并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用,没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体,而不是血清。与此相反,在兔实验中,通过抑制动物,进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY,在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下,多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限,而且一旦冷冻,一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”,但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里,以备将来你需要更多的抗体。此外,我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费),以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性,因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统,允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合,避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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例如:5000个核苷酸残基就是5000×0.15=750纳米
核苷酸(hé gān suān) Nucleotide,一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。又称核甙酸。戊糖与有机碱合成核苷,核苷与磷酸合成核苷酸,4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸,许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能,如与能量代谢有关的三磷酸腺苷(ATP)、脱氢辅酶等。
治疗用单链寡核苷酸药物的非临床研究评价概述
余珊珊、胡晓敏、王海学、王旸、王庆利
(国家食品药品监督管理总局药品审评中心,北京100038)
[摘要]单链寡核苷酸(Single-strandedoligonucleotide,SSO)是一种人工合成寡核苷酸,可按碱基互补配对原则主要通过与靶RNA杂交,诱导断裂、调节剪切、抑制翻译等作用抑制靶RNA功能,在基因层面产具有潜在的治疗作用。但未经修饰的SSO易被核酸酶降解,经化学修饰的SSO(如经锁核酸修饰后的SSO)其稳定性、杂交亲和力和酶切效率大大提高,成药性显著增强。目前,已有4个治疗用SSO药物在美国或欧洲上市,更多的候选药物处于研发阶段。本文将从上市监管、非临床特点、非临床安全性试验一般原则等方面阐述治疗用SSO药物的非临床研究评价要点。
[关键词]治疗用单链寡核苷酸药物,锁核酸,非临床研究评价
http://www.cde.org.cn/dzkw.do?method=largePage&id=313894
核苷类药按其结构,也可分为3类: ① L-核苷类:,如拉米夫定和替比夫定;为嘧啶类②
无环磷酸盐类,阿德福韦酯和替诺夫韦;为嘌呤类,③ 环戊烷 /
烯类,如恩替卡韦。现在上市的有拉米夫定、替比夫定、阿德福韦和恩替卡韦;将要上市的还有替诺福韦。这一类新的药物还在不断研发,还会有更好的药物问世。
这一类药物有共同的特点。优点是应用方便,每天服一片药就行了;安全性强,很少不良反应,几乎没有禁忌症;最重要的是抑制病毒复制的活性很强,能较快改善病情。共同的缺点是需要长期用药,随意停药可能有反弹的风险;不计划、不规范用药容易发生耐药变异。
1、拉米夫定(贺普丁)有什么特点?
拉米夫定是第一个研发出来的口服抗病毒药,已经上市10年了,治疗了上百万人,救治了无数病人,取得了丰富的经验。
在上述几种口服抗病毒药中,拉米夫定抑制病毒复制的活性居于中等水平,一年平均可降低对数的5次方(即降到治疗前的1/10万)。随着病毒水平的降低,有七成病人血清转氨酶在3个月内降至正常;自觉症状也随之改善;肝组织病变在6个月内会有明显进步。肝硬化病人的恢复要慢一些。
拉米夫定是最安全的核苷类药,价格也较适当,过去、现在和在近期内都是应用最广泛的抗病毒药物,一个月的费用约460圆。
但拉米夫定也是最容易发生耐药变异的,每年以20%的比率递增。过去由于“一花独秀”,也有过一些误导,使我国有众多耐药变异的乙肝病毒感染者,因对其他核苷类药可能会发生交叉耐药,造成治疗困难。今后如能吸取教训,使用得当,仍不失为一个好药。
2、阿德福韦有什么特点?
阿德福韦抑制病毒复制的作用稍弱,1年降低4次方,故控制病情较缓慢,1年只有半数的病人血清转氨酶正常。但阿德福韦发生耐药变异较少,只要血清病毒长期维持在很低的复制水平,就有可能较长时间稳定控制病情。
阿德福韦是我国拥有自主知识产权的新药,目前国内有多家企业生产。在多种核苷类药物中,价格是最低的(一个月的费用约430圆),而且药品价格还在不断下调中。既能解决患者问题,又不至于增添患者太多经济负担。
但要注意的是:老年病人和肝移植病人可能有潜在的肾损害,用药中要多做检查。
3、恩替卡韦有什么特点?
恩替卡韦,在已经上市和尚未上市的几种药物中,抑制病毒复制的活性最强,一年平均可降低对数的7次方,几乎是拉米夫定的100倍,对极大多数病毒水平很高的病人也能在1年左右降至不能检出。早期作用更明显,头2周就能降低2次方,对救治重症病人特别有利。在肝移植病人可用于抑制病毒复现,可长期应用预防再感染导致的移植肝排斥。
恩替卡韦在没有用过核苷类药的初治病人,耐药变异的发生率很低,对已经拉米夫定耐药的病人疗效会明显降低。最大的问题是价格最贵,一个月的费用达1100圆。
4、替比夫定有什么特点?
替比夫定是拉米夫定的同类药,而抑制病毒作用约有拉米夫定的10倍,一年平均可降低血清病毒水平6次方,约60%的病人不能检出病毒。不过这些数据多来源国外,从临床疗效来看,控制病情、HBV-DNA阴转率、变异率稍优于拉米夫定,但从统计学上来分析,没有实际意义的差别。替比夫定一个月的费用约700圆,尚没有纳入国家医保。拉米夫定效果不佳时,可以考虑换用替比夫定,但一年后的耐药率也不低于10%。
怎样正确应用这一类药物?
因为服用这类药物很方便、很安全,有些病人像用止痛片或胃病药一样,随意停停用用,血清转氨酶升高了就用,正常了就停。这样不规范的用药很少有不出问题的,过去曾经有过不少教训。必须在医生指导下,按规定的剂量服药,要定期检查,发现问题要及时处理。
各位战友,你们好!我最近在做载体构建的实验,我打算将一段40bp左右的寡核苷酸连接到载体上,但是做了几次都是阴性结果,求各位大神指教!谢谢
我的操作过程如下:
我是将含有酶切位点的寡核苷酸引物稀释成100uM,各取1ul,加8ul水,95℃5mins,然后自然冷却至室温,然后再将退火后的核苷酸双链稀释了100倍。稀释后的核苷酸双链进行双酶切,酶切体系是:
10xBuffer4ul
Oligo30ul
酶12ul
酶22ul
ddH2O2ul
混匀后37℃水浴40min,在用65℃将酶变性20min
接下来就将寡核苷酸与双酶切回收载体连接(确认已经酶切开)
连接体系:
载体:2ul
oligo:10ul
10xT4buffer:2ul
T4连接酶:2ul
ddH2O:4ul
16℃连接过夜。
转化克隆后,挑取单克隆测序,发现全是没有连上,可能是什么原因呢?能帮忙解答一下吗?
Musmusculus2dayspregnantadultfemaleovaryCDNA,RIKENfull-lengthenrichedlibrary,clone:E330021J16product:inferred:SRY-boxcontaininggene4/sox-4,fullinsertsequence。
product:inferred:SRY-boxcontaininggene4/sox-4,fullinsertsequence是什么意思,这个基因推测产物是sox-4?fullinsertsequence是什么意思?
这个缩写,N是nicotinamideA是腺嘌呤adenineD是二核苷酸dinucleotideP是磷酸基团phosphate那么H是什么的缩写呢?是还原H的意思吗?

