关于高校学生党建工作的调查报告_
本方法通过SDS裂解细胞，蛋白酶降解蛋白，CTAB去除多糖成分一：仪器：同方法一二：试剂：TE、TAE缓冲液；10%SDS；５ＭNaCL；20mg/ml蛋白酶Ｋ；CTAB/NaCL溶液(10%CTAB，0.7MNaCL4.1gNaCL溶于80ml水中，缓慢加入10gCTAB，加热溶解)；25/24/1,酚/氯仿/异戊醇;24/1,氯仿/异戊醇；异丙醇；７０％及100%乙醇三：操作1.5ml对数生长期细菌细胞离心，5000rpm,1min沉淀溶于500μlTE缓冲液中混匀30μl10%SDS,3μL蛋白酶Ｋ，混匀，37℃,1小时100μlNaCL(5M)混匀80μl的CTAB/NaCL,*混匀；65℃10min（可不做）加入等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心12000rpm,4-5min取上清，以下操作与方法一中有机溶剂抽提、沉淀、干燥、除RNA、复溶等步骤一致。注意１，*此步操作后，离心管中NaCL的浓度不应低于0.5M，否则DNA将与CTAB共沉淀。2,本法适用于从多糖含量高的样品中提取DNA。对于菌体样品,通过此流程,可以获得较为完整的DNA分子。
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发布于 ： 2018-12-26
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