Details
ReagentsSupplied
10XTthDNAPolymeraseReactionBuffer
Source
ThermusThermophilus
Applications
- Ccanreversetranscribeatelevatedtemperatures
- MinimizesproblemswithstrongsecondarystructureofRNA
- Resultsingreaterspecificityofprimerhybridizationandextension
- SuitableforhightemperaturesynthesisofDNA
- SynthesizesCDNAfromRNAtemplate
- StablethermophilicDNApolymerase(1)
UnitDefinition
Oneunitistheamountofenzymerequiredtoincorporate10nmolestotalnucleotideintoacidinsolublematerialat70°Cfor30minutes.
Concentration
5-10units/µl
StorageBuffer
50mMTrisHCl(pH7.5)
0.1mMEDTA
5.0mMdithiothreitol
50%(v/v)glycerol
StABIlizers
AssayConditions
25mMTris-HCl(pH9.5at25°C)
50mMpotassiumchloride
10mMmagnesiumchloride
1mMdithiothreitol
0.3µg/μlactivatedcalfthymusDNA
1μg/μl bovineserumalbumin
0.2mMofeachdCTP,dGTP,dTTPand[α-32P]dATP
Incubationisfor10minutesat70°C inatotalreactionvolumeof50µl
StorageConditions
Storeat-20°C
Productshippedondryice
References
(1)Wang,A.M.,Doyle,M.V.,andMark,D.F.(1989)Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA86,9717-9721
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Categories
Polymerases,MesophilicDNAPolymerases
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希望同路人多多交流啊!
这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。
比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。
dri,还可以看膜啊
cfda也不错
bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。
当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。

