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immunodx
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活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。 查看更多>
淋巴细胞表面标记主要包括表面受体和表面抗原,淋巴细胞表面标记的检测已广泛用于基础、临床免疫学研究和患者免疫功能的测定。检测方法主要应用同位素、酶和荧光素及其它标记技术。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990) 查看更多>
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膜的流动性是生物膜结构的基本特征之一,主要指膜脂肪酸链部分及膜蛋白的运动状态。膜脂类分子在相变温度以上条件下主要有侧向扩散、旋转、左右摇摆、伸缩振荡、翻转及异化运动等方式。膜流动性的测定方法主要有荧光探针标记,电子自旋共振以及差示扫描量热法,x线衍射,棱碰共振等。 查看更多>
Media UsedTo prepare 100 ml mediumDMEM 80 ml FCS 15 ml Non-essential amino acids (100x) 1 ml Pen/strep (5,000 1U/ml, 5000 ug/ml) 1 ml L-Glutamine 200 mM 1 ml N 查看更多>
Closed gloving is performed after the surgeon has donned his/her gown, but BEFORE the surgeon pulls his/her hands through the cuffs of the gown.Step 1: An assi 查看更多>
报告基因广泛运用于植物分子生物学研究,主要用以鉴别基因的表达模式,同时在获得稳定转化植株的过程中也可用作转化细胞的标记。理想的标记基因应该具备以下特性:操作简单、价格便宜、无毒性、稳定。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯  P.R .休里 主编。 查看更多>
Integrating extrachromasomal arrays into the C. elegans chromosomes Why and how to do it, by Michael Koelle 4/6/94 What is the benefit of integrating an extrac 查看更多>
荧光剂,又名荧光增白剂,是一种荧光染料,或称为白色染料,也是一种复杂的有机化合物。它的特性是能吸收入射光线产生荧光,使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应,使肉眼看到的物质很白,达到增白的效果。其作用是把制品吸收的不可见的紫外线辐射转变成紫蓝色的荧光辐射,与原有的黄... 查看更多>
来源:《神经生物学实用实验技术》 查看更多>
2018-12-26
METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powd 查看更多>
Biosynth公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多>
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靓丽的橙色
是欢快活泼的光辉色彩,是暖色系中最温暖的色,它使人联想到金色的秋天,丰硕的果实;
是一种富足、快乐而幸福的颜色。让人感觉成一种稳重、含蓄又明快的温暖;
橙色也会带来一种甜甜的感觉。
听说活性荧光染料只有红黄,并且价格很高
一种染料的激发发射波长是488/560nm,显红色,其在细胞内分布未知,一种是核染料DAPI,这两种是确定会存在的荧光物质,而现在想选择一种能染出细胞轮廓(细胞膜或细胞骨架)的荧光染料,不知可选择哪些荧光染料染的效果比较好。FITC-鬼笔环肽不知是否可以,因为FITC的激发发射波长是495/520nm,想知道选择FITC-鬼笔环肽的话,在做共聚焦时会不会跟488/560nm的染料有干扰?因为好像使用的是同一个激发器。

随着免疫荧光技术的不断发展,荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前,市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(Biotium,USA);AlexaFluor®系列(Lifetechnology,USA);DyLight系列;Cy系列;IRDye系列等等。使用最多的为AlexaFluor®系列和CFTM系列。

一、CFTM系列染料的核心对比AlexaFluor®系列具有以下几点优势:

1、新型罗丹明核心

罗丹明染料以优异的耐光性和良好的荧光量子产量著称。因此很多AlexaFluor®染料具有罗丹明核心结构,但是,传统罗丹明的化学结构很难从长波长的荧光染料延伸至远红外区域甚至是更具挑战性的近红外区域,而且生物偶联后其水溶性并不理想。Biotium科学家发现从绿色到近红外多色荧光的罗丹明染料的新型化学方法。该方法被有效的应用于CF染料的产品中,尤其是远红外CF染料,而且通过这种方法制备的染料不仅水溶性极佳而且耐光性极好。

2、特异性高的近红外染料

近红外染料最大的特点是比可见光范围要大很多,大滴的染料常会导致染料水溶性低、染料聚合体多、荧光量子产量差等问题。为了解决这些问题,许多商用的近红外染料比如AlexaFluor®、DyLight®dyes和IRDyes®近红外染料,在制备时吸附了大量的带负电荷的磺化基团,其磺化作用可以在一定程度上会提高染料的溶解性和荧光性,但这样也带来了另一些更加严重的问题,经这种染料标记的生物耦联物的非特异性结合。Biotium的科学家用**性的方法设计出近红外染料CF,在避免引入大量负电荷的情况下,极大的保证了染料优异的理化特性。Biotium近红外的CF染料以花青或罗丹明染料为核心结构,该核心结构的特殊化学修饰限制了染料的分子内位移,从而获得染料的高量子产率和更好的水溶性。因此,近红外CF染料比其他近红外染料荧光强度更高,光稳定性好。最重要的是,在免疫印迹实验上应用近红外CF染料标记蛋白质样品相对于其他商业用近红外染料制备的抗体偶联物,最大限度的提高了信噪比。

3、优异的标记效率

生物偶联后的活性染料一般很容易水解,会在运输,操作及储存中带来诸多不便,最终致染料结合效率低下。像AlexaFluor®dyes,DyLight™dyesandIRDyes®等严重的磺化作用有较强的吸湿性,恶化水解作用等问题。所有Biotium的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型,这比大部分AlexaFluor染料的SE更耐水解。总体来说,CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率,提供给用户更好的使用价值。


二、选择方案:

1、蓝色(350-450nm处激发)

CF350、AlexaFluor350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发。

CF350是类似于AlexaFluor350和传统荧光染料AMCA的蓝色荧光染料,CF350的荧光强度高于AlexaFluor350、AMCA,吸附在蛋白上的荧光超过50%,水溶性更好,耐光性非常优秀亮,更容易与现有的绿色荧光基团区分。

CF405S/CF405M、AlexaFluor405----近乎完美的匹配蓝色二极管激光器。

CF405S/CF405M、AlexaFluor405与近来使用的荧光显微镜流式细胞仪405nm;谱线的蓝色二极管激光器完美的匹配。在流式细胞仪上的分析结果显示CF405S/CF405M荧光信号强度高于AlexaFluor405染料1.7倍。

2、绿色(488nm处激发)

CF488A、AlexaFluor488、FITC、FAM、DyLight488、Cy2等----针对488nm氩离子激光器的绿色荧光染料。

以上染料其标记的抗体蛋白适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪,流式细胞仪的FL1通道检测,或者可用于荧光显微镜技术。

CF488A最低限度的带电量降低了与抗体耦联物的非特异性结合,在红色通道溢出少于AlexaFluor488,耐光性好、水溶性好和pH不敏感,良好的稳定性和活性染料的标记率。

AlexaFluor488在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10);

FITC激发波长488nm,最大发射波长525nm,缺点:荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。

3、橙红色(543-555nm处激发)

CF543、AlexaFluor546、ATTO550,Cy3,DyLight549,Rhodamine(TRITC)匹配543nm的橙色荧光染料;

CF™543荧光条带明亮,耐光,水溶性好,确保了CF543染料与抗体的耦联物保持优异的水溶性,为该波段最亮的橙色荧光染料。例如:同等的标记程度下,CF543标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用AlexaFluor546标记的2~10倍。

CF555、AlexaFluor555、Tetramethylrhodamine(TAMRA)等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料。

4、红色(568-594nm处激发)

CF568、AlexaFluor®568,ATTO565,RhodamineRed等568nm处红色荧光染料。

CF568染料耐光性最好;高效水溶性;比AlexaFluor568标记的抗体亮度更亮。

CF594、AlexaFluor®594,ATTO™594,DyLight™594,TexasRed等最亮红色荧光染料。

CF594由于其高量子产量和优异的水溶性而比AlexaFluor594明亮2~4倍。同时CF594对光极其稳定,使它能被理想地应用于诸如共聚焦显微镜和单分子显像条件苛刻的应用中去。

5、远红外(620-660nm处激发)

CF620R、LightCyclerRed640等620nm处。

CF™620R是以红色荧光染料罗若丹(rhodamine)为基础的远红外的荧光染料,该染料有高荧光亮度和极度的耐光性。它的吸收和发射光谱为617和639nm,该染料能被用于荧光能量共振转移中高能量的接收者,或者在激发和发射窗口能和该染料的光谱特性匹配的条件下,被应用于多色检测中的最高荧光量采集。染料的卓越的水溶性有利于生物耦合在水介质中,更好的保持耦联物的生物特异性结合。


CF633、AlexaFluor633,AlexaFluor647,Cy5,DyLight633,DyLight649等633/635nm激光线的最佳染料荧光染料。

CF633染料的优点:当被633nm氦氖激光或635nm红色二极管激光激发时,产生最亮的抗体耦联物,光稳定性远高于AlexaFluor647,高效的水溶性。


CF640、AlexaFluor647,ATTO647N,Cy5,DyLight649等远红外荧光染料。

CF640R的优点:以红色染料罗丹明(rhodamine)为基础,吸收和发射峰类似Cy5、AlexaFluor647;但以罗丹明(rhodamine)为基础的红色染料CF640R它最大的优点就是对光稳定性,Cy5和AlexaFluor647以花青素为基础,因此有着和花青素一样的特点即耐光性较差。极好的亮度和耐光性使CF™640R被理想的用于共聚焦显微镜和单分子成像等条件苛刻的检测中。


CF647、AlexaFluor647,ATTO647N,DyLight649等远红外荧光染料。

以花青素为基础的远红外荧光染料CF647比Cy5、AlexaFluor647明亮。

CF660、AlexaFluor®660,Allophycocyanin(APC)等介于远红外近红外之间的荧光染料。

6、近红外(680-790nm处激发)

CF680R/680、AlexaFluor680,Cy5.5,IRDye680等近红外荧光染料。

CF680是高水溶性的以花青素为基础的染料,分子量大约为3000。该染料标记抗体极佳,发出最亮的荧光和在免疫染色光谱相似的染料中产生最高的信噪比。

CF680R分子量约为900,更适合标记核酸或者相对小的生物分子。CF680R是新型的以罗丹明(rhodamine)为基础的高荧光亮度,极度耐光性染料,这使它可被理想地用于共聚焦显微镜,单分子成像等条件要求苛刻的应用中。


CF750、CF™770andCF™790等近红外荧光染料。

CF750、CF770、CF790是领域内真正具有突破性的长波长的新型染料代表。其他近红外染由于受到染料聚集和稳定性差等因素的影响而导致荧光亮度有限。基于Biotium科学家研制的新型分子工程技术,近红外CF染料克服了这些问题。即使在633nm被激发,CF750也会比APC-AlexaFluor750拥有足够的亮度来在流式细胞仪检测中带来更好的信噪比,而且不存在串联染料的低稳定性等问题。另外,近红外CF染料高度水溶性,没有会增加抗体耦联物非特异性结合的过剩的负电荷,也代表了该产品的优秀性能。


请问有哪位高手用过EvaGreen的荧光染料,最近有人推荐其性能很好,目前已经有很多原来使用SYBRGreen的国内用户都已经改用该产品,不知具体效果究竟如何,有谁亲自用过啊,介绍一下经验吧,非常感谢!!!
请问表达绿色荧光蛋白(GFP)的细胞做流式检测表面分子的表达情况能够使用Fitc标记的抗体么?
PCR核酸检测试剂中常用的荧光染料,如RTGreen、SYBRGreen、EvaGreen等,其核心原料的化学结构是什么?它们到底是菁基染料、酞菁、方酸染料,还是新型罗丹明?有没有相关技术说明?FITC-异硫氰酸荧光素(CAS:3326-32-7)算不算是其中常用的一个?
荧光染料是一种能吸收部分子外光,将紫外光转化为可见光,从而增加亮度的着色剂,从而使颜色极为鲜明。
荧光燃料使用的问题有两个:
一个就是迁移性,使用时要严格控制用量,以避免产生迁移现象;
二是荧光染料使用有一个极限值,如果超量使用,导致荧光线被吸收,使吸收和发光成叠所致。
荧光染料选择和数据分析 123
众里寻清忧2021-07-26
最常用的就是洗衣粉中的荧光增白剂,也就是白色荧光染料,几乎所有配方的洗衣粉中都有。
然后是碱性荧光染料,造纸厂用来增加纸的亮度。
直接和分散的荧光黄,印染厂用来增加棉质和化纤面料的艳度
荧光染料与DNA作用机制123
zhang8404072021-08-17
我最近要用到嵌入DNA双链间的荧光染料,只找到一个EB,可是它的毒性特别大,后来在文献看到GelRed和GelGreen染料、SYTOX系列染料,我想请教高人一下,这些染料是通过嵌插方式与DNA双链作用的吗?而且不能插入到双链的大、小勾之间,必须是插入到碱基之间的。...
我养的是内皮祖细胞,贴壁生长,我想用一种膜荧光染料和DAPI双染来检测凋亡。请问大侠们哪种荧光染料较合适?
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