| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 403/454 |
| MW | 555.94 |
| CAS# | N/A |
| Solvent | DMSO |
| Storage | F/D/L |
| Category | EnzymeDetection PeptidasesandProteases |
| Related | CellApoptosis ApoptosisandCytotoxicity BiochemicalAssays |
| Spectrum | AdvancedSpectrumViewer |
1. GeneralSolutionCaspaseAssaysUsingAMC,AFC,pNA,R110andProRedSubstrates
1.1. Preparea10mMstocksolutioninDMSO.
1.2. Preparea2Xcaspase substrate(50µM)assaysolutionasthefollowing:
50µLsubstratestocksolution
100 µLDTT(1M)
400 µLEDTA(100mM)
10mLTrisBuffer(20mM),pH=7.4
1.3. Mixequalvolumeofthecaspasestandardsorsampleswith2Xcaspasesubstrateassaysolution(fromStep1.2),andincubatethesolutionsatroomtemperatureforatleast1hour.
1.4. Monitorthefluorescenceusingafluorescencemicroplatereader,orabsorbanceusinganabsorbancemicroplatereader.
2. CellCaspaseAssaysUsingCell-PermeableFMKCaspaseProbes
2.1. Preparea2-5mMstocksolutioninDMSO.
2.2. Treatcellsasdesired.
2.3. Preparea2Xpermeablecaspasesubstrate(20µM)assaysolutionbydilutingtheDMSOstocksolution(fromStep2.1)inHankswith20mMHepesbuffer(HHBS).
2.4. Mixequalvolumeofthetreatedcellswith2Xcaspasesubstrateassaysolution(fromStep2.3),andincubatethecellsina37°C,5%CO2incubatorforatleast1hour.
2.5. WashthecellswithHHBSforatleastonce.
2.6. Monitorthefluorescenceintensitybyaflowcytometer,afluorescencemicroscopeorafluorescencemicroplatereader.
3. CellCaspaseAssaysUsingCell-PermeableFMKCaspaseProbes(For#13470-13476only)
3.1. Preparea250Xstocksolutionbyadding50µLDMSOintothevial.
3.2. Treatcellsasdesired.
3.3. Add250XDMSOstocksolution(fromStep3.1)intothecellsolutionata1:250ratio(suchas2uLto500uLcells),andincubatethecellsina37°C,5%CO2incubatorfor1hour.
3.4. WashthecellswithHHBSforatleastonce.
3.5. Monitorthefluorescenceintensitybyflowcytometer,fluorescencemicroscopyorfluorescentmicroplatereader.
| References&Citations |  PrinterFriendlyVersion |
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AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
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(1)、分子内含有发射荧光的基团，如羰基、氮氮双键、碳氮双键等。
(2)、分子内含有助色基团。助色基团使光谱红移并增大荧光效率，如伯胺基、仲胺基、羟基、醚键、酰胺基等。
(3)、分子内含有刚性平面结构的共轭π键。分子内共轭体系愈大平面性愈强其荧光强度愈高。一些能提高共轭度的因素能提高荧光效率，并使荧光波长向长波方向移动。 就是荧光染料的附着物，主要作用有帮助荧光染料展色、提高荧光染料与下游树酯的相溶性、保护荧光染料的性能。通常载体树脂是强极性树脂，分子中含有胺基、羟基、醚键、酰胺基等强极性基团，一方面有助色作用，增大荧光效率;另一方面与荧光染料有很好的相溶性，有助于染料的均匀分散。
荧光颜料常用的载体树脂有胺基树脂、苯代三聚氰胺一甲醛树脂、聚丙烯酸酯树脂、聚酰胺树酯、聚酯树脂、聚氨酯树脂等。 （1）、热塑性荧光颜料：线型
（2）、热固性荧光颜料： 体型
（3）、可溶解色精荧光颜料
（4）、水乳型荧光颜料 （1）、胺基树酯
（2）、聚酰胺树酯
（3）、聚酯树酯
（4）、丙烯酸乳液 （1）、塑胶类
低温型
中温型
高温型
（2）、涂料类
水性涂料
油性涂料
粉末涂料 （1）、含甲醛
（2）、不含甲醛
希望同路人多多交流啊!
想请问一下，DAPI这个染料到底有没有膜通透性，我通过百度搜索查询关于DAPI染料的，基本上是说它能透过细胞膜对活细胞和死细胞均能染上蓝色；但是也有人说DAPI只可以透过死细胞膜，不能对活细胞进行染色，用以区分活死细胞，到底哪个是对的啊，蒙了！！！！！！
