【求助】[求助]共聚焦荧光染料选择
2021-07-21
问题描述：
一种染料的激发发射波长是488/560nm，显红色，其在细胞内分布未知，一种是核染料DAPI，这两种是确定会存在的荧光物质，而现在想选择一种能染出细胞轮廓（细胞膜或细胞骨架）的荧光染料，不知可选择哪些荧光染料染的效果比较好。FITC-鬼笔环肽不知是否可以，因为FITC的激发发射波长是495/520nm，想知道选择FITC-鬼笔环肽的话，在做共聚焦时会不会跟488/560nm的染料有干扰？因为好像使用的是同一个激发器。
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imyanming
用户
要看你的共聚焦显微镜的激光管和滤光片配置，比如某台机器上有500-550nm的带通滤片可以采集FITC的荧光，>570nm的高通滤片可以看你的第一种红色染料，而DAPI是紫外激发的染料，紫外激发的时候另外两种染料不发光，这样就可以满足你的检测要求。根据机器配置适当的选择染料就好
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shachajiang
用户谢谢！我用的仪器是有4个独立激光器：（1）405nm激光；（2）458/488/514nm激光；（3）543nm激光；（4）633nm激光。但滤光片的配置没看到有写在仪器参数里，管仪器的老师也不清楚，所以也不知道到底会不会干扰？
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