细胞因子的3种作用方式
| 实验方法原理 | 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异构受到抑制，成为唯一能发光的全反构型。 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 肿瘤细胞 试剂、试剂盒 | 磷酸盐缓冲液DPH 仪器、耗材 | 荧光分光光度计离心机 实验步骤 | 1. 取对数生长期的肿瘤细胞，以pH7.2，0.01mol/l磷酸盐缓冲液洗涤两次。 2. 取107个细胞，离心，加入2×106mol/lDPH溶液2ml。 3. 25℃振荡温育30min，再以PBS洗涤1次。 4. 悬浮于4mlPBS溶液中。 5. 测定仪器为荧光分光光度计，在激发波长362nm，发射波长432nm，狭缝10条件下测定荧光强度。 注意事项 | 由于DPH可进入细胞内部，后来又合成了其阳性离子衍生物1-（4-三甲胺苯基）-6-苯基-1,3,5-己三烯（TMDPH）。TMDPH不能透过细胞膜进入细胞，因此，理论上TMDPH标记法较DPH标记法更能准确的反映膜脂流动性。 |
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发布于 ： 2018-08-10
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