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做CCK8很多次了,每次96孔板五个梯度的药物浓度OD值波动很大,同一块板子不同时间1.2.3.4h趋势都不同,浓度梯度和结果很乱,很是困惑,MTT做出一次,这个是6个复孔取平均值做的趋势图,五个点从左到右是由高浓度到低浓度,希望大神帮忙,
作者:PriCells原生原代
1.原代细胞培养最大优点是:细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够反映体内的状态。
2.细胞株和原代细胞不是完全一样。
3.并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株,有些细胞必须养原代,
4.细胞株是来源于原代细胞,原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株,细胞株带有癌变细胞的特点。
5.细胞株的遗传物质已经发生改变,并不再具有接触生长抑制现象。
6.细胞株形态及状态不如原代细胞,相对长时间传代;而原代细胞生长是有限性。
7.细胞株在传代过程中可能发生形态的改变及变异,细胞株没有用原代细胞稳定性。
8.原代细胞的受体能够正确反映体内的生理和病理状态。
9.原代细胞的信号传导信号系统能够正确反映体内的生理和病理状态。
10.原代细胞的蛋白质生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
11.原代细胞的RNA生物学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
12.原代细胞的DNA生物学和遗传学特征能够正确反映体内的生理和病理状态。
13.原代细胞对外界反应能够正确反映体内的生理和病理状态。
14.原代细胞对体外检测能够正确反映体内的生理和病理状态。
15.原代细胞对毒理和致畸反应能够正确反映体内的生理和病理状态。
16.原代细胞对药物筛选能够正确反映体内的生理和病理状态。
17.原代细胞对个体化药物治疗能够正确反映体内的生理和病理状态。
18.原代细胞培养与体内原组织在形态结构和功能活动上一样,绝对是检测判断、药物治疗最好的实验对象。
19.如在中国进行体外检测和药物研发进行细胞培养,请要用中国人组织源性原代细胞。
转染分2种,一种是瞬时转染,即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白,提一次蛋白,转染一次,这种方式一般不传代;
另一种转染为稳定转染,转染后加入一定选择压力进行筛选,没有转染的细胞不能存活,只留下转染的细胞,这种情况下可以筛选单个转染细胞,构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
请大神前辈指点指点,已经研三了,实验很不顺利,再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙,做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的?谢谢了!
看到之前的一个朋友也发了IBC会议的PPT内容,不过好像没有这个PPT(不确定,要是重复了请见谅)。
因为会议上投影的问题,当时有些内容贾老师没介绍太多。不过内容相当不错,主要是国内比较缺乏这方面的信息和经验。可以算得上是干货吧,不过里面主要是一些规则性或方向性的内容,需要具体细节,只能花钱请她做顾问了。
AudreyJia是美籍华人,在FDA做CMCReviewer之前也一直是从事细胞开发及细胞培养的工作。她应该也是目前唯一一个生物大分子部门中,唯一从FDA离职出来从事顾问工作的。可能很多国内单抗药企大佬都认识她,可能很多园子里面的人也见过她了。
谁能赏几个积分啊?新人,没积分,一些东西想看或者下载都不行。
版主jackieustc留言:
感谢分享,鼓励新人,我给你打赏,多交流自然有收获!
Monoclonality_JIA1.pdf(952.57k)
心肌梗死(Myocardialinfarction,MI)特征是心脏供血减少和心肌功能减弱,成人心脏的自我再生能力有限,使得心肌梗死的状况雪上加霜。由于干细胞具有自我更新复制能力和分化潜能,因此干细胞移植是使心脏组织再生和增强心脏功能的新的方法。最近的研究表明脂肪组织来源干细胞(ADSCs),即从脂肪组织分离的多能干细胞,具有广泛的分化潜能,可分化为心肌细胞。现分享一篇DNA转染(Entranster-H4000)与脂肪来源干细胞和心肌梗死研究的文献,以供参考。
Real-timetrackingofADIposetissue-derivedstemcellswithinjectablescaffoldsintheinfarctedheart.pdf(866.54k)
你的第一部分,白细胞和中性粒细胞偏低,说明免疫力低,最近要多保养,不受凉,近期容易生病。不过数据也不是太低的,也不用过于担心,多吃多睡,过一段时间复查,可能会好转为正常。另外消炎药,止痛,退热药尽量不吃,这些药会加重白细胞下降的。
第二部分,最主要的红细胞和血红蛋白是正常的,总体看还是正常的。但是下面数据有点低,而且只低一点,问题不大,多吃点米饭,红枣,肉等,会好转的。
第三部分,血小板部分是正常的。
你这种检查单,最主要的是免疫力低下,注意多吃多睡,别受凉,少烦神少劳累,引起白细胞低的药物尽量不吃。

